摘要：為了解近來豬偽狂犬病（PR）在黔北山區(qū)規(guī)模豬場的流行情況，2011-2012年對(duì)采自27個(gè)不同規(guī)模豬場的1 238份血清，采用PRV gE蛋白ELISSA抗體檢測試劑盒進(jìn)行檢測和分析，檢出PR血清抗體陽性111份、陽性率8.97%（111/1 238），所檢血清中種母豬陽性率達(dá)12.22%（49/401）、商品豬陽性率8.94%（38/425）、仔豬陽性率5.83%（24/412），檢出陽性場比例達(dá)48.15%（13/27）。結(jié)果表明，黔北山區(qū)規(guī)模豬場中存在豬偽狂犬病感染，種母豬群體陽性檢出率高于其他階段豬，但整體陽性率低于國內(nèi)相關(guān)報(bào)道。

關(guān)鍵詞：黔北山區(qū)；規(guī)模豬場；偽狂犬??；血清學(xué)；調(diào)查

中圖分類號(hào)：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1007-273X（2013）11-0009-02

豬偽狂犬?。≒seudorabies，PR）是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的一種高度傳染性、致死性的傳染病，也稱奧捷氏病、假性狂犬病、奇癢病等[1，2]。該病最早發(fā)現(xiàn)于美國，后由匈牙利科學(xué)家Au-jeszky首先分離出病毒[3]。臨床癥狀表現(xiàn)為母豬返情屢配不孕，懷孕母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎或木乃尹胎，新生仔豬在一周內(nèi)發(fā)生大量死亡，斷奶仔豬發(fā)熱、腹瀉、呼吸困難、肌肉震顫并繼發(fā)麻痹、共濟(jì)失調(diào)，育肥豬生長遲緩和飼料報(bào)酬降低等[1-3]。黔北地區(qū)生豬養(yǎng)殖量較大，年出欄商品豬達(dá)400萬頭以上，是貴州省最大的生豬養(yǎng)殖區(qū)域，同時(shí)近年來該地區(qū)生豬規(guī)?；B(yǎng)殖場數(shù)量不斷增加。2011-2012年期間，筆者對(duì)黔北地區(qū)27個(gè)規(guī)模豬場1 238份血清進(jìn)行PR檢測和分析，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 待檢血清 2011-2012年，在遵義市28個(gè)規(guī)模豬場隨機(jī)采集豬血1 238份，從豬耳靜脈或前腔靜脈采血，3 000 r/min離心10 min后分離血清，冰箱冷凍保存，待測。

1.1.2 試劑 PRV gE蛋白ELISSA抗體檢測試劑盒，購自武漢科前生物制品有限公司。

1.2 方法

試驗(yàn)方法如下：①在血清稀釋板中按1：40的體積比稀釋待檢血清樣品、陰性和陽性對(duì)照。②將稀釋好的待檢血清樣品、陰性和陽性對(duì)照各取100 μL加入抗原包被板中，待檢樣品加1孔、陰性和陽性對(duì)照加2孔，輕輕振勻后置37 ℃溫育30 min。③甩掉板孔中溶液，每孔加入稀釋后的洗滌液200 μL靜置30 min倒掉，在吸水紙上拍干，反復(fù)洗5次。④每孔加羊抗豬酶標(biāo)二抗100 μL，置37 ℃溫育30 min，后重復(fù)步驟③洗滌5次。每孔先加底物液A 50 μL、再加底物液B 50 μL，混勻，室溫（18～25 ℃）避光顯色10 min。⑥加入終止液50 μL，10 min內(nèi)測結(jié)果。

1.3 結(jié)果判定

采用PRV gE蛋白ELISSA抗體檢測試劑盒檢測血清中PRV gpl抗體，按照試劑說明書操作，在酶標(biāo)儀上測各孔OD630 nm值。試驗(yàn)成立的條件是陽性對(duì)照孔平均OD630 nm≥0.6，陰性對(duì)照孔平均OD630 nm<0.3。當(dāng)樣品孔OD630 nm≥0.45判為陽性，樣品孔OD630 nm<0.40為陰性，樣品孔OD630 nm值介于0.40～0.45判為疑似陽性。

2 結(jié)果與分析

從表1可以看出，黔北山區(qū)27個(gè)種豬場采集的1 238份血清中檢出PR血清抗體陽性111份，陽性率為8.97%（111/1238）。從不同豬群階段看，種母豬階段陽性率明顯高于商品豬和仔豬，所檢血清中種母豬陽性率達(dá)12.22%（49/401），特別是能繁母豬群陽性率高達(dá)12.98%（37/285）；從不同性別看，商品豬和斷奶仔豬中母豬群體陽性率分別為9.43%（20/212）、5.05%（10/198），差異較明顯顯著。

從表2、表3可知，調(diào)查的27個(gè)豬場中陽性場比例達(dá)到了48.15%（13/27），陽性率在3.76%～31.42%之間，但中小型豬場陽性率普遍高于大型豬場。

3 討論

（1）目前世界上有40多個(gè)國家都有PR報(bào)道，PR的危害已經(jīng)超過豬瘟，給世界養(yǎng)豬業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將該病列為B類動(dòng)物傳染病，我國列為二類動(dòng)物疫病。我國自1947年首次報(bào)道該病以來，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)已有20多個(gè)省、市流行過該病，在許多種豬場呈暴發(fā)流行趨勢，己成為我國養(yǎng)豬業(yè)不可忽視的主要傳染病之一[3]。本次檢測1 238份血清中檢出PR血清抗體陽性111份，陽性率為8.97%（111/1 238），表明遵義市規(guī)模豬場豬群中存在PRV的隱性感染。

（2）根據(jù)PR血清學(xué)調(diào)查相關(guān)資料顯示，臺(tái)灣屠宰場豬群陽性率為65.6%，黑龍江、吉林、遼寧和內(nèi)蒙古4省區(qū)陽性率為58.8%，四川省陽性率為20.2%，廣東省陽性率為15.3%～19.2%，貴州省非免疫豬群陽性率為15.8%，江蘇省陽性率為12.1% [4，5]。本次調(diào)查結(jié)果顯示黔北山區(qū)規(guī)模豬場中PR陽性率遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于國內(nèi)相關(guān)報(bào)道，但值得注意的是與鄧位喜等[6]對(duì)遵義市PR血清學(xué)調(diào)查的5.69%相比有所上升，陽性場比例達(dá)到了48.15%、陽性率在3.76%～31.42%之間，部份規(guī)模較小的豬場陽性率較高，臨床發(fā)病較多，表明黔北山區(qū)規(guī)模豬場PR防控工作任重道遠(yuǎn)，應(yīng)引起高度重視。

（3）PRV可感染各種年齡段的豬，易繼發(fā)豬瘟、豬繁殖與呼吸障礙綜合征和豬傳染性胸膜肺炎等疫病混合感染又可致豬隱性感染，而隱性感染的帶毒豬是規(guī)模化豬場發(fā)生PR的主要傳染源之一[7]。所以控制該病最好的方法就是用偽狂犬gE基因缺失弱