摘要：為了掌握近年來甘肅省武威市涼州區(qū)規(guī)模養(yǎng)殖場豬偽狂犬病感染情況，2010-2012年，在全區(qū)46個養(yǎng)豬場（點(diǎn)/次）共采集1 899份血清，用ELISA檢測試劑盒進(jìn)行了豬偽狂犬病抗體檢測。結(jié)果顯示，抗體陽性數(shù)148份， 抗體陽性率7.79%，其中2010-2012年抗體陽性率分別為9.12%、8.70%、4.38%。結(jié)果表明，涼州區(qū)規(guī)模養(yǎng)殖場不同程度地受到豬偽狂犬病的野毒感染。

關(guān)鍵詞：豬偽狂犬??；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；調(diào)查

中圖分類號：S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2013）10-0043-02

豬偽狂犬病是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的多種家畜和野生動物的一種急性傳染病[1，2]。PRV感染豬主要通過母豬胎盤和公豬精液垂直傳播，同時也可水平傳播。該病可引起種公豬的不育、妊娠母豬的流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和木乃伊胎，可引起新生仔豬的大量死亡而造成養(yǎng)豬業(yè)的較大經(jīng)濟(jì)損。20世紀(jì)90年代以來分子生物學(xué)和基因工程技術(shù)取得了重大進(jìn)展，研制出了豬偽狂犬病病毒基因缺失疫苗，應(yīng)用ELISA方法檢測gE抗體，可以區(qū)分疫苗抗體和野毒抗體，在近20年來有效阻止和控制了豬偽狂犬病的發(fā)生[3]。

武威市涼州區(qū)是全國生豬調(diào)出大縣，2012年底，生豬飼養(yǎng)量達(dá)73.9萬頭，規(guī)模養(yǎng)豬場達(dá)到1.9萬戶，養(yǎng)豬近55萬頭，占豬飼養(yǎng)量的75%。因此，做好規(guī)模豬場豬偽狂犬病血清學(xué)檢測，能夠及時清除隱性帶毒豬，不斷提高豬場的養(yǎng)殖效益。為了解甘肅省武威市涼州區(qū)規(guī)模養(yǎng)豬場偽狂犬病的流行情況，在2010-2012年期間共采集規(guī)模豬產(chǎn)場血清1 899份，進(jìn)行豬偽狂犬病血清學(xué)調(diào)查，現(xiàn)將調(diào)查結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 待檢血清

2010-2012年在涼州區(qū)養(yǎng)豬場46個場點(diǎn)次，共采集1 899份血清。

1.2 試劑

豬偽狂犬gE-ELISA抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司。

1.3 方法

ELISA方法[4]：①取出抗原包被板，在每孔中加入50 μL稀釋液、50 μL陰陽性對照和待檢血清，陰性對照設(shè)3 孔，陽性對照設(shè)2孔。②輕輕混勻，用封條封閉微量反應(yīng)板，置室溫孵育1 h。③用洗滌液洗板3次，300 μL/孔，最后一次將板中殘留洗滌液扣拍到吸水材料上。④每孔加100 μL 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗PRV gE抗體，室溫孵育20 min。⑤洗滌3次，方法同③。⑥每孔加入100 μLTMB底物溶液，避光且室溫孵育15 min。⑦每孔加入50 μL終止液，酶標(biāo)儀上測各孔OD650 nm值。⑧試驗(yàn)成立條件是陰性對照0D650 nm平均值減去陽性對照0D650 nm平均值必須≥0.3。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)

通過計算樣品與陰性對照的比例（S/N）來確定豬偽狂犬病病毒抗體的有無。如果S/N值≤0.6，樣品判為PRV gE抗體陽性；如果S/N值>0.6但≤0.7，樣品應(yīng)重新測定；如果S/N值>0.7，樣品判為PRV gE抗體陰性。

2 結(jié)果

2010-2012年共檢測本地養(yǎng)豬場46個場次，1 899份樣品， 抗體陽性數(shù)148份， 抗體陽性率7.79%，其中2010-2012年抗體陽性率分別為9.12%、8.70%、4.38%（表1）。

3 討論

（1）通過此次調(diào)查，結(jié)果表明涼州區(qū)養(yǎng)豬場不同程度的受到豬偽狂犬病毒的感染，涼州區(qū)的豬偽狂犬病gE抗體陽性率為7.79%。據(jù)調(diào)查，涼州區(qū)只有部分規(guī)模養(yǎng)豬場和種豬場使用豬偽狂犬病毒gE缺失疫苗，但是還有部分豬場豬偽狂犬病毒感染率比較高，建議豬偽狂犬病毒陽性豬場要進(jìn)行定期監(jiān)測普查，及時清除野毒感染豬，使豬群逐步得到凈化。

（2）豬免疫偽狂犬病毒gE基因缺失疫苗后，配合使用豬偽狂犬病ELISA gE抗體試劑盒，進(jìn)行抗體檢測，能夠區(qū)分免疫抗體和野毒感染，清除野毒感染的豬，使豬群得到凈化，該方法操作簡單、特異、敏感、快速、準(zhǔn)確，在凈化豬偽狂犬病中起到了很重要的作用。

（3）豬感染偽狂犬病后主要表現(xiàn)為母豬繁殖障礙和呼吸系統(tǒng)疾病綜合征（PRDC），給豬場造成很大的損失，凈化該病以后母豬繁殖障礙和呼吸系統(tǒng)疾病綜合征能夠得到很好的改善，顯著提高生產(chǎn)效益。

參考文獻(xiàn)：

[1] 費(fèi)恩閣，李德昌，丁 壯，等.動物疫病學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2004.205-209.

[2] 殷 震，劉景華.動物病毒學(xué)，[M].第2版.北京： 北京科學(xué)出版社，1997.998-1009.

[3] 王金花，丁秀丹，武 彤.豬偽狂犬病的新特點(diǎn)及免疫凈化措施[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問，2009，10：124-124.

[4] 王科文，楊漢春.我國重點(diǎn)養(yǎng)豬區(qū)域偽狂犬病野毒感染血清學(xué)調(diào)查報告[J]，養(yǎng)豬，2010（02）：45-47.