摘要：采用超聲波輔助提取蓮子胚芽中的黃酮類物質(zhì)，通過(guò)正交試驗(yàn)確定了最佳提取工藝為以40%的乙醇作提取劑，按料液比1∶50（m/V，g∶mL），在60 ℃下采用超聲波提取60 min，蓮子胚芽總黃酮提取率達(dá)1.80%。該法優(yōu)于常規(guī)熱回流法。

關(guān)鍵詞：蓮子胚芽；超聲波；總黃酮

中圖分類號(hào)：TS254.4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）24-6132-03

蓮子胚芽（蓮子心）是睡蓮科植物蓮（Nelumbo nucifera Gaertn）的成熟果實(shí)中的干燥幼葉及胚根，又名蓮心、薏、苦薏、蓮薏。蓮子胚芽具有多方面的藥用和保健價(jià)值，其保健作用早在《本草綱目》中就有記載[1]。隨著科研工作的不斷深入，特別是隨著當(dāng)今市場(chǎng)人們對(duì)蓮子需求的上升，有效開發(fā)利用蓮子胚芽將具有很高的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益[2]。本試驗(yàn)對(duì)蓮子胚芽樣品總黃酮進(jìn)行超聲波輔助提取，為蓮子心的藥用價(jià)值和在食品加工中的開發(fā)應(yīng)用提供科學(xué)根據(jù)[3]。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 蓮子胚芽 蓮子胚芽購(gòu)于中藥店，置于烘箱內(nèi)（60 ℃）干燥2 h，粉碎，裝瓶，置于干燥器中備用。

1.1.2 儀器 722S分光光度計(jì)、KQ500DB型數(shù)控超聲波清洗器等。

1.1.3 試劑 蕓香葉苷（生化試劑，BR），其他試劑均為分析純。

1.2 方法

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)提取率的影響 如圖2所示，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大，黃酮類化合物浸出率也隨著增大；根據(jù)相似相溶原理，黃酮類化合物容易溶于乙醇中，所以乙醇所占比例越大，就越容易將黃酮類化合物提取出來(lái)。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)較低（≤40%）時(shí)，由于將一些水溶性成分如糖類或其他雜質(zhì)也提取出來(lái)，提取液黏稠，抽濾或過(guò)濾較困難。但乙醇體積分?jǐn)?shù)過(guò)高則某些脂溶性物質(zhì)溶出也增多，干擾因素隨之增大，給提純帶來(lái)困難。因此確定乙醇體積分?jǐn)?shù)在40%～80%為好。同時(shí)，結(jié)果也表明兩種不同方法對(duì)總黃酮提取率的影響不同，在乙醇體積分?jǐn)?shù)為20%時(shí)，傳統(tǒng)醇浸提的得率高些，隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大，超聲波輔助提取的得率隨著增大，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了傳統(tǒng)醇浸提法，因此采用超聲波輔助提取法較好。

2.1.2 料液比對(duì)提取率的影響 如圖3所示，提取率在料液比為 1∶20～1∶30時(shí)，隨著料液比減小，提取率反而降低，但當(dāng)料液比大于1∶30后，提取率隨之增加，在料液比為1∶35時(shí)，提取率達(dá)到最高；之后隨著料液比的減小，提取率幾乎不變。在實(shí)際操作中， 當(dāng)浸提的料液比過(guò)大時(shí)， 提取液偏少， 不利于過(guò)濾分離；當(dāng)浸提的料液比過(guò)小時(shí)， 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)轉(zhuǎn)移溶劑時(shí)耗時(shí)長(zhǎng)、耗能多，另外，料液比過(guò)小不但會(huì)增加溶劑的用量，而且會(huì)增大去除溶劑所需負(fù)荷，故料液比1∶40較為合適。

2.1.3 提取溫度對(duì)提取率的影響 如圖4所示，溫度對(duì)蓮子胚芽總黃酮提取的影響較明顯。一般來(lái)說(shuō)，隨著溫度的升高，分子運(yùn)動(dòng)速度加快，滲透、擴(kuò)散、溶解速度加快，使黃酮類物質(zhì)更易從細(xì)胞中轉(zhuǎn)移到溶劑中。但是溫度過(guò)高容易使黃酮類物質(zhì)產(chǎn)生氧化，溫度過(guò)高也不容易操作，且能耗大。結(jié)果表明，提取溫度以50 ℃左右為宜。

2.1.4 提取時(shí)間對(duì)提取率的影響 如圖5所示，浸提的時(shí)間越長(zhǎng)，浸提越完全，提取率越高。但是考慮到盡量節(jié)約時(shí)間、節(jié)約能源的關(guān)系，將提取時(shí)間定在40～60 min。

2.2 正交優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果

從表2結(jié)果可知， 各因素對(duì)蓮子胚芽總黃酮的提取率影響表現(xiàn)出一定的差異性[6]，各因素影響主次順序?yàn)镃>D>B>A，即乙醇體積分?jǐn)?shù)>料液比>提取時(shí)間>提取溫度，最佳條件為A3B3C1D3。進(jìn)行驗(yàn)證性試驗(yàn)，在溫度60 ℃、用40%的乙醇、料液比1∶50、超聲波功率80 W條件下提取60 min，測(cè)得蓮子胚芽總黃酮的含量為 18.01 mg/g，提取率為1.80%。

2.3 回收率試驗(yàn)結(jié)果

采用樣品加標(biāo)回收率試驗(yàn)法[7]，準(zhǔn)確量取最優(yōu)條件下的提取液1 mL，分別加入0.3、0.4、0.5 mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液顯色后測(cè)吸光度，計(jì)算回收率，結(jié)果見表3。表3結(jié)果表明，采用分光光度法測(cè)定提取液中的總黃酮含量的樣品加標(biāo)回收率較高，平均為99.81%。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.706%，較小，因此該方法準(zhǔn)確度較高。

3 結(jié)論

采用超聲波輔助提取的方法，考察了提取溫度、提取時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比等因素對(duì)蓮子胚芽總黃酮提取率的影響。根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，以提取溫度、提取時(shí)間、乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比為考察因素，進(jìn)行L9（34）正交試驗(yàn)。結(jié)果表明，影響超聲波輔助提取蓮子胚芽總黃酮得率的因素主次順序?yàn)橐掖俭w積分?jǐn)?shù)、料液比、提取時(shí)間、提取溫度。最佳提取工藝條件為提取溫度60 ℃、提取時(shí)間60 min、乙醇體積分?jǐn)?shù)40%、料液比1∶50，此時(shí)總黃酮得率為1.80%。通過(guò)試驗(yàn)得出，超聲波技術(shù)用于蓮子胚芽總黃酮的提取具有省時(shí)、高效、節(jié)能的優(yōu)點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

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