摘要：采用帶毒培養(yǎng)基-菌絲生長(zhǎng)速率法，以多菌靈為對(duì)照藥劑，進(jìn)行20%寡聚酸碘對(duì)稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）菌絲生長(zhǎng)抑制效果測(cè)定。結(jié)果表明，該藥劑對(duì)稻瘟病菌的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用，且表現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系。20%寡聚酸碘167倍稀釋液和5.0 μg/mL多菌靈對(duì)稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果最好，相對(duì)菌絲生長(zhǎng)抑制率達(dá)100.00%。隨著稀釋倍數(shù)的增加，20%寡聚酸碘對(duì)稻瘟病菌的抑制效果降低，在167～1 000稀釋倍數(shù)范圍內(nèi)，20%寡聚酸碘對(duì)稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制率高于2.5 μg/mL多菌靈，且在0.05水平有顯著差異。

關(guān)鍵詞：稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）；20%寡聚酸碘；抑菌效果

中圖分類(lèi)號(hào)：S435.111 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）24-6037-03

水稻稻瘟病是水稻重要的真菌性病害，由半知菌亞門(mén)（Deuteromycotina）的稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）引起，廣泛分布于世界各稻區(qū)。稻瘟病可以危害水稻的苗、葉、莖節(jié)、穗頸和谷粒，一般以葉瘟、節(jié)瘟和穗頸瘟危害較大。在水稻產(chǎn)區(qū)，如遇適宜的環(huán)境條件，局部發(fā)生的稻瘟病可以迅速地蔓延擴(kuò)散，在短時(shí)間內(nèi)造成水稻大面積受害，輕者減產(chǎn)，嚴(yán)重者造成絕收，該病已成為中國(guó)水稻高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)的重要制約因素之一[1，2]。

氨基寡糖素是一種良好的生物源農(nóng)藥，能夠誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗病性，對(duì)煙草病毒病、棉花枯萎病、西瓜枯萎病、番茄病毒病和小麥常見(jiàn)病害等多種植物病害具有良好的防治效果[3-8]，但防治的速效性較差，難以應(yīng)對(duì)突發(fā)性病害。20%寡聚酸碘[9]是農(nóng)業(yè)部規(guī)劃設(shè)計(jì)研究院利用寡糖衍生物絡(luò)合碘研制的新一代非特異性寡糖衍生物農(nóng)藥，具有快速殺滅植物病原物和誘導(dǎo)植物抗病的作用，同時(shí)具有對(duì)人畜安全、無(wú)污染、無(wú)公害、長(zhǎng)期使用病菌不產(chǎn)生抗性等優(yōu)點(diǎn)[10]。為指導(dǎo)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，有效防治水稻稻瘟病，試驗(yàn)通過(guò)測(cè)定20%寡聚酸碘對(duì)稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)抑制情況，明確20%寡聚酸碘對(duì)稻瘟病菌的抑菌效果，為該藥劑用于稻瘟病田間防治提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試病原菌

稻瘟病菌P131生理小種，由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物病理學(xué)系提供。

1.2 供試藥劑

20%寡聚酸碘，由農(nóng)業(yè)部規(guī)劃設(shè)計(jì)研究院提供，多菌靈（純度99%）為美國(guó)Aldrich公司生產(chǎn)。

1.3 試驗(yàn)方法

采用帶毒培養(yǎng)基-菌絲生長(zhǎng)速率法[11，12]進(jìn)行20%寡聚酸碘對(duì)稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)抑制效果測(cè)定。

1.3.1 基本培養(yǎng)基的制備 用于藥物抗菌活性測(cè)定的培養(yǎng)基為番茄燕麥（OTA）培養(yǎng)基。具體配方為燕麥30 g，番茄汁150 mL，瓊脂20 g，加水定容至1 000 mL。

1.3.2 含藥培養(yǎng)基的制備 分別量取一定量的20%寡聚酸碘母液，加水稀釋成不同濃度的供試藥液，加入到未凝固的OTA培養(yǎng)基中，搖勻后迅速倒入直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，配制成終濃度為20%寡聚酸碘167、200、250、333、500、1 000、1 500、2 000、3 000倍稀釋的9個(gè)濃度梯度的含藥培養(yǎng)基，待其凝固后備用。陽(yáng)性對(duì)照為多菌靈，先用20% 乙醇溶解，再制成終濃度為2.5、5.0 μg/mL的含藥OTA培養(yǎng)基，同時(shí)制作含相同濃度乙醇的OTA培養(yǎng)基（乙醇），設(shè)置無(wú)藥OTA培養(yǎng)基為空白對(duì)照（CK）。5個(gè)重復(fù)。

1.3.3 接種與培養(yǎng) 將稻瘟病菌活化，選擇生長(zhǎng)良好的菌落，在無(wú)菌條件下用直徑為5 mm的滅菌打孔器在菌落外緣打孔，制備均勻一致的菌餅。用消毒接種器將菌餅接種于不同處理的培養(yǎng)基中央，有菌絲的一面向下與培養(yǎng)基貼合，置于25 ℃暗培養(yǎng)12 d后進(jìn)行結(jié)果調(diào)查。

1.4 結(jié)果調(diào)查

采用十字交叉法垂直測(cè)量各處理的菌落直徑，取其平均值作為各處理菌落的直徑。根據(jù)測(cè)量結(jié)果，計(jì)算各處理對(duì)稻瘟病菌的菌絲絲生長(zhǎng)相對(duì)抑制率（抑制率），試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SPSS 11.5軟件輔助進(jìn)行差異顯著性等分析。

2 結(jié)果與分析

乙醇對(duì)稻瘟菌的抑制效果與空白對(duì)照相當(dāng)（表1），說(shuō)明使用20%乙醇溶解多菌靈不會(huì)使多菌靈對(duì)稻瘟菌的抑制效果受到影響。由試驗(yàn)結(jié)果（表1、圖1、圖2）可以看出，20%寡聚酸碘167倍稀釋液和5.0 μg/mL多菌靈對(duì)稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制效果最好，培養(yǎng)基上均無(wú)菌絲生長(zhǎng)，抑制率達(dá)100.00%。隨著稀釋倍數(shù)的增加，20%寡聚酸碘對(duì)稻瘟病菌的抑制效果降低；在250～1 500稀釋倍數(shù)范圍內(nèi)，20%寡聚酸碘對(duì)稻瘟病菌的抑制效果隨濃度變化而變化趨勢(shì)較明顯；在1 500～3 000稀釋倍數(shù)范圍內(nèi)，20%寡聚酸碘對(duì)稻瘟病菌的抑制效果隨濃度變化不明顯。20%寡聚酸碘167、200、250、333、500、1 000倍稀釋對(duì)稻瘟病菌的相對(duì)抑制率分別為100.00%、90.56%、84.75%、63.61%、38.83%和24.27%，均顯著高于對(duì)照藥2.5 μg/mL多菌靈（P<0.05）。試驗(yàn)結(jié)果表明，在一定濃度范圍內(nèi)，20%寡聚酸碘稀釋液能很好地抑制稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)，具有開(kāi)發(fā)為防治稻瘟病藥劑的潛力。

3 小結(jié)與討論

在OTA培養(yǎng)基上的菌絲生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)結(jié)果表明，20%寡聚酸碘對(duì)稻瘟病菌的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用，且表現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系。試驗(yàn)證實(shí)該藥劑對(duì)稻瘟病菌有一定的直接抑制作用，在一定程度上克服了氨基寡糖素不能迅速殺滅病原物的缺點(diǎn)。由于該試驗(yàn)是在室內(nèi)離體條件下進(jìn)行的，對(duì)于20%寡聚酸碘中另一主要成分寡糖衍生物促進(jìn)植株產(chǎn)生誘導(dǎo)抗病作用、該藥劑誘導(dǎo)抗病性和碘對(duì)病原菌快速殺滅作用以及對(duì)水稻稻瘟病所表現(xiàn)的綜合防治效果，還需通過(guò)田間試驗(yàn)來(lái)進(jìn)一步研究。

致謝：感謝中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院植物病理學(xué)系周立剛副教授及其碩士研究生徐梁和雒瑞雅在本試驗(yàn)中給予的指導(dǎo)和幫助。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李小闖.稻瘟病的危害與綜合防治[J].農(nóng)技服務(wù)，2010，27（12）：1585-1586.

[2] 吳裕霖.稻瘟病的危害及防治[J].安徽農(nóng)業(yè)，1995（8）：27.

[3] 蘇小記，賈麗娜.2%氨基寡糖素水劑防治煙草病毒病藥效試驗(yàn)[J].陜西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005（3）：55-56.

[4] 李質(zhì)根，張根培，王德勝.氨基寡糖素防治棉花枯萎病的效果[J].江西棉花，2009，31（2）：60-61.

[5] 姚滿昌，張明志，丁琴翠，等.氨基寡糖素對(duì)西瓜枯萎病的防治試驗(yàn)[J].長(zhǎng)江蔬菜，2009（8）： 71-72.

[6] 喬 康，姬小雪，邱士芬.氨基寡糖素2%水劑防治番茄病毒病試驗(yàn)[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理， 2012，33（5）：59-61.

[7] 薛改妮，張寶強(qiáng).氨基寡糖素在小麥上的應(yīng)用效果研究[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2012（18）：97-98.

[8] 王士奎，劉衛(wèi)萍，張志民，等.20%寡聚酸碘田間防治黃瓜炭疽病的效果[J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，51（5）：922-923.

[9] 王士奎，劉衛(wèi)萍，王金環(huán)，等.寡聚酸碘及其制備方法與應(yīng)用[P].中國(guó)：CN101967203 A，2011-02-09.

[10] 高劍龍，藍(lán)炎陽(yáng)，王少峰.寡糖在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].福建熱作科技，2012，37（3）：70-73.

[11] 唐 靜，周立剛，曹曉冬，等.植物提取物、碳酸鈉和碳酸氫鈉對(duì)楊樹(shù)潰瘍病菌生長(zhǎng)的抑制作用[J].植物病理學(xué)報(bào)，2006，36（4）：446-453.

[12] 唐 靜，周立剛，周亞明，等.黃柏果實(shí)提取物對(duì)植物病原真菌的抑制作用[J].天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2008，20（3）：505-507.