摘要：為了研究X射線輻照對(duì)黑花生紫1F4真葉中多酚氧化酶（PPO）活性的影響，采用不同能量的X射線輻照黑花生種子，并在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待其長(zhǎng)出真葉后，提取PPO，測(cè)定PPO的活性。結(jié)果表明，PPO活性總體上隨X射線激勵(lì)電壓的增大先增大后減小，隨輻照時(shí)間的增加先增大后減小。經(jīng)過(guò)X射線輻照處理后大部分處理的PPO活性要小于對(duì)照組。

關(guān)鍵詞：黑花生紫1F4；X射線；多酚氧化酶（PPO）活性； 輻照

中圖分類(lèi)號(hào)：S565.2；Q506；Q544+.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）19-4589-02

多酚氧化酶（Polyphenol oxidase，PPO）是自然界中分布極廣的一種金屬蛋白酶，普遍存在于植物、真菌、昆蟲(chóng)的質(zhì)體中，甚至在土壤中腐爛的植物殘?jiān)隙伎梢詸z測(cè)到多酚氧化酶的活性。由于其檢測(cè)方便，是被最早研究的幾類(lèi)酶之一。1883年Yoghid發(fā)現(xiàn)日本漆樹(shù)液汁變硬可能和某種活性物質(zhì)相關(guān)，1938年Keilin和Mann研究了蘑菇多酚氧化酶的提取和純化，得到多酚氧化酶并將這類(lèi)酶稱為Polyphenol oxidase。由于其能有效催化多酚類(lèi)化合物氧化形成相應(yīng)的醌類(lèi)物質(zhì)，因此被認(rèn)為是導(dǎo)致酶促褐變反應(yīng)的主要因素[1]。多酚氧化酶與植物的抗逆性有關(guān)，可以增加植物對(duì)病原體的抗性[2]。目前，在各種有機(jī)酸對(duì)PPO活性的影響方面有較多的報(bào)道，如Dedeoglu等[3]發(fā)現(xiàn)草酸能抑制蘑菇PPO活性；Nirmal等[4]報(bào)道了阿魏酸可以抑制PPO的活性從而改善冷藏過(guò)程中果蔬的品質(zhì)；烷基苯甲酸對(duì)馬鈴薯的PPO也有明顯的抑制作用[5]；檸檬酸是食品工業(yè)中常用的一種護(hù)色劑，對(duì)PPO具有明顯的抑制作用，Jiang等[6]發(fā)現(xiàn)檸檬酸能夠明顯抑制荔枝的PPO活性，Demir等[7]發(fā)現(xiàn)蘋(píng)果PPO也能被檸檬酸抑制，Wuyts等[8]報(bào)道檸檬酸對(duì)香蕉PPO同樣具有抑制作用?；ㄉ俏覈?guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物，提高花生植株的抗逆性及花生的產(chǎn)量、質(zhì)量等是一個(gè)重要的課題。因此，對(duì)黑花生種子進(jìn)行X射線輻照處理后提取真葉的PPO并對(duì)其PPO活性進(jìn)行研究，有利于開(kāi)展黑花生的育種工作。

1 材料與方法

1.1 材料

PC-1600紫外光譜儀（上海美譜達(dá)公司）；CM-5分光測(cè)色儀（日本柯尼卡美能達(dá)公司）；高速離心機(jī)，手提式X射線透射儀。以黑花生紫1F4為試驗(yàn)材料。

1.2 種子處理

把黑花生紫1F4種子分為30組分別放在激勵(lì)電壓為45、50、55、60、65 kV的X射線下，種子胚部朝向束流方向且單層排列分別處理1、2、3、4、5、6 min后種植，長(zhǎng)出真葉備用。

1.3 PPO提取

1.4 PPO活性測(cè)定

2 結(jié)果與分析

2.1 不同X射線激勵(lì)電壓下PPO活性與輻照時(shí)間的關(guān)系

2.2 不同輻照時(shí)間下PPO活性與X射線激勵(lì)電壓的關(guān)系

3 結(jié)論

在X射線激勵(lì)電壓為60 kV，輻照時(shí)間為5 min時(shí)黑花生紫1F4葉片中PPO活性最大，為559.8 U。在X射線激勵(lì)電壓為65 kV，輻照時(shí)間為3 min時(shí)PPO活性最低，為145.8 U。從試驗(yàn)結(jié)果可以看出，PPO活性隨處理?xiàng)l件的變化沒(méi)有明顯的線性關(guān)系，但是總體上隨著X射線激勵(lì)電壓的增大PPO活性先增大后減小，隨著輻照時(shí)間的增加PPO活性先增大后減小。經(jīng)過(guò)X射線輻照處理后大部分處理組的PPO活性要小于對(duì)照組。隨著處理?xiàng)l件的變化PPO活性變化有較大的波動(dòng)，當(dāng)X射線激勵(lì)電壓較大時(shí)，PPO活性較低，這可能是因?yàn)閄射線能量過(guò)高會(huì)引起分子的極化，使電子躍遷至高能級(jí)引起電離，促使化學(xué)反應(yīng)發(fā)生，從而損害了DNA的結(jié)構(gòu)，影響了PPO的表達(dá)，使得PPO的活性降低。

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