摘要：在室內培養(yǎng)條件下，采用菌絲生長速率法測定腐霉利等6種商品殺菌劑及其復配劑對草莓灰霉病菌（Botrytis cinerea Pers.）的抑制作用。結果表明，不同殺菌劑對草莓灰霉病菌均表現出明顯的抑制作用，0.01～10.00 mg/L的腐霉利、嘧霉胺、苯醚甲環(huán)唑、乙蒜·丁子香酚、嘧菌環(huán)胺和武夷菌素的抑菌率分別為6.81%～70.93%、5.59%～69.06%、6.09%～72.93%、10.37%～100.00%、9.00%～42.04%、17.62%～48.37%；EC50分別為3.704、4.837、2.266、0.075、22.771、55.277 mg/L。復配劑嘧菌環(huán)胺∶腐霉利1∶1有特別明顯的增效作用；嘧菌環(huán)胺∶腐霉利1∶2、乙蒜素∶苯醚甲環(huán)唑1∶2和2∶1、嘧霉胺∶苯醚甲環(huán)唑1∶2有明顯的增效作用；武夷菌素∶嘧霉胺1∶1和2∶1、乙蒜素∶苯醚甲環(huán)唑1∶1等復配劑略有增效作用。

關鍵詞：殺菌劑；復配；草莓灰霉病菌（灰葡萄孢）；毒力測定

中圖分類號：S482.2 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）14-3299-03

草莓灰霉病病原為灰葡萄孢（Botrytis cinerea Pers.），是保護地草莓生產中的主要病害。草莓灰霉病常造成花及果實腐爛，影響產量與品質，嚴重時減產可達60%以上，甚至絕收[1]。帶菌果實在貯運、銷售和消費期間繼續(xù)發(fā)病，嚴重影響果品的商品性。草莓灰霉病菌除為害草莓外，還侵染茄子、辣椒、黃瓜、番茄、西葫蘆、萵苣、葡萄等多種園藝作物，防治非常困難[2]。由于草莓種質資源中缺少高抗草莓灰霉病的品種，生產上草莓灰霉病的防治以化學防治為主，輔以農業(yè)技術防治、生物防治及生態(tài)防治。目前防治草莓灰霉病的常用化學藥劑有苯胺基嘧啶類的嘧霉胺（施佳樂）、二甲酰亞胺類的腐霉利（速克靈）、苯并咪唑類的多菌靈、苯醚甲環(huán)唑類的捷菌等[3]。但灰葡萄孢具有繁殖快、遺傳變異大和適應力強等特點，極易產生抗藥性[4]，使常用殺菌劑防治效果大大降低[5]。本試驗旨在明確草莓灰霉病菌對幾種商品殺菌劑的抗藥性，篩選高效防治草莓灰霉病菌的復配劑。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株 草莓灰霉病菌（灰葡萄孢）GYBc-1菌株。采集貴州省貴陽市花溪區(qū)草莓種植大棚中的病果，經單孢分離、純化獲得[6]。

1.1.2 供試藥劑 35%腐霉利懸浮劑（簡稱腐霉利，宜賓川安農藥有限公司），400 g/L嘧霉胺懸浮劑（簡稱嘧霉胺，德國拜耳作物科學公司），10%苯醚甲環(huán)唑（世高）水分散粒劑（簡稱苯醚甲環(huán)唑，山東曹達化工有限公司），50%嘧菌環(huán)胺（瑞鎮(zhèn)）水分散粒劑（簡稱嘧菌環(huán)胺，瑞士先正達作物保護有限公司），2%武夷菌素原藥（簡稱武夷菌素，山東濰坊萬勝生物農藥有限公司），20%乙蒜·丁子香酚可濕性粉劑（簡稱乙蒜·丁子香酚，江蘇省綠盾植保農藥實驗有限公司），80%乙蒜素乳油（簡稱乙蒜素，河南啄木鳥農化公司），均為市售商品殺菌劑。

1.2 方法

1.2.1 6種殺菌劑毒力測定 將6種商品殺菌劑同培養(yǎng)基充分混勻，配制成0.01、0.05、0.10、0.50、1.00、5.00、10.00 mg/L系列濃度的含藥PDA培養(yǎng)基。用打孔器從在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)3 d的草莓灰霉病菌菌落邊緣取直徑5 mm的菌餅，菌絲面向下接種在含藥PDA培養(yǎng)基上，每皿一個菌餅，25 ℃倒置培養(yǎng)，每處理3個重復，以無藥平板作為對照。接種后5 d檢查菌絲生長情況并用十字交叉法測量菌落直徑，計算（相對）抑菌率。借助SPSS軟件，以藥劑濃度的對數值為橫坐標（x），抑菌率為縱坐標（y），求得6種殺菌劑對草莓灰霉病菌的毒力回歸方程、EC50和相關系數[7]。

1.2.2 復配殺菌劑的聯合毒力測定及增效研究 結合商品殺菌劑的交互抗性，對商品殺菌劑進行復配組合，配制終濃度為1.00、5.00 mg/L的含藥PDA培養(yǎng)基，以不加藥劑的PDA培養(yǎng)基作為對照，每處理3個重復。以腐霉利、嘧霉胺、苯醚甲環(huán)唑為標準藥劑，參照文獻[6-8]的方法，計算復配劑實際毒力指數（ATI）、理論毒力指數（TTI）和共毒系數（CTC），評價增效作用、確定最佳配比。

2 結果與分析

2.1 6種商品殺菌劑抑菌作用

腐霉利、嘧霉胺、苯醚甲環(huán)唑、乙蒜·丁子香酚、嘧菌環(huán)胺、武夷菌素6種殺菌劑在濃度為0.01～10.00 mg/L時，對灰葡萄孢的抑菌率分別為6.81%～70.93%、5.59%～69.06%、6.09%～72.93%、10.37%～100.00%、9.00%～42.04%、17.62%～48.37%（表1）。

2.2 6種商品殺菌劑毒力

6種殺菌劑對草莓灰霉病菌的毒力回歸方程、EC50和相關系數見表2。乙蒜·丁子香酚、苯醚甲環(huán)唑對灰葡萄孢的抑制效果好，EC50分別為0.075、2.266 mg/L；其次是腐霉利、嘧霉胺，EC50分別為3.704、4.837 mg/L，武夷菌素的抑制效果最差，EC50高達55.277 mg/L。

2.3 復配殺菌劑的聯合毒力

不同組合、不同配比的復配殺菌劑對草莓灰霉病菌的抑制作用和毒力不同，具體情況見圖1、表3、表4。1.00 mg/L苯醚甲環(huán)唑∶腐霉利的抑菌效果比單劑好，抑菌率分別為67.48%、73.08%、74.21%；5.00 mg/L 2∶1時抑菌率為74.05%。5.00 mg/L乙蒜素∶苯醚甲環(huán)唑的抑菌效果比苯醚甲環(huán)唑單劑好，抑菌率分別為77.94%、74.16%、64.92%。嘧菌環(huán)胺∶腐霉利1∶1抑菌效果比單劑好，抑菌率分別為70.01%、73.14%；1.00 mg/L 2∶1復配抑菌率為71.67%。計算6種復配藥劑對草莓灰霉病菌的毒力回歸方程及EC50，嘧菌環(huán)胺∶腐霉利1∶1抑菌效果最好，其EC50為0.062 mg/L；草莓灰霉病菌對乙蒜素∶苯醚甲環(huán)唑1∶1、1∶2、2∶1敏感，EC50分別為0.875、0.065、0.833 mg/L；嘧霉胺∶苯醚甲環(huán)唑1∶ 2也表現較高的抑菌活性，EC50為1.927 mg/L。

復配劑的聯合毒力測定結果見表5、表6、表7。嘧菌環(huán)胺∶腐霉利1∶1的增效作用最為顯著；復配劑嘧菌環(huán)胺∶腐霉利1∶2、乙蒜素∶苯醚甲環(huán)唑1∶2和2∶1、嘧霉胺∶苯醚甲環(huán)唑1∶2有明顯的增效作用；武夷菌素∶嘧霉胺1∶1和2∶1、嘧菌環(huán)胺∶腐霉利2∶1、乙蒜素∶苯醚甲環(huán)唑1∶1略有增效作用。嘧菌環(huán)胺與腐霉利按1∶1的比例復配抑制草莓灰霉病菌效果明顯好于單劑，嘧菌環(huán)胺與腐霉利1∶2、乙蒜素與苯醚甲環(huán)唑1∶1、1∶2和2∶1、嘧霉胺與苯醚甲環(huán)唑1∶2復配等抑制草莓灰霉病菌效果也好于單劑。

3 小結與討論

試驗測定了腐霉利、嘧霉胺、苯醚甲環(huán)唑、乙蒜·丁子香酚、嘧菌環(huán)胺和武夷菌素及部分復配劑對草莓灰霉病菌的抑制效果。結果表明，苯醚甲環(huán)唑、乙蒜·丁子香酚對草莓灰霉病菌抑制效果較好。使用復配殺菌劑可以達到比殺菌劑單用更好的防治效果，減少病原菌產生抗藥性的風險[9]。草莓灰霉病菌是一種非常容易產生抗藥性的病原菌，不同作用機理且無正交互抗性的藥劑復配有增效作用，為防止或減緩抗藥性的產生，不同殺菌機理的藥劑復配或交替使用對草莓灰霉病菌防治具有重要意義。嘧霉胺是一種內吸性新型殺菌劑，屬苯胺基嘧啶類，結構新穎，作用機理獨特，通過抑制病原菌侵染酶的產生，從而阻止病菌的侵染并殺死病菌，該藥與防治草莓灰霉病的主要殺菌劑無交互抗性。苯醚甲環(huán)唑是真菌甾醇合成抑制劑，廣譜、高效而和其他藥劑不易產生交互抗性，研究證明，苯醚甲環(huán)唑與嘧霉胺、腐霉利之間不存在交互抗性。二甲酸亞胺類殺菌劑腐霉利屬于多作用位點殺菌劑，嘧菌環(huán)胺對多種作物病原真菌和部分細菌有很強的抑殺作用，不同作用機制的腐霉利和嘧菌環(huán)胺可以復配。

根據殺菌劑的作用機理及交互抗性，設計不同組合的藥劑復配，結果表明，復配劑嘧菌環(huán)胺∶腐霉利1∶1、嘧菌環(huán)胺∶腐霉利1∶2、乙蒜素∶苯醚甲環(huán)唑1∶2、嘧霉胺∶苯醚甲環(huán)唑1∶2都有明顯的增效作用。嘧菌環(huán)胺與腐霉利1∶2、乙蒜素與苯醚甲環(huán)唑1∶1和2∶1、嘧霉胺與苯醚甲環(huán)唑1∶2復配及武夷菌素與嘧霉胺1∶1復配抑制草莓灰霉病菌效果也好于單劑。這些試驗效果很好的復配劑及其復配比的選定，為草莓灰霉病菌田間防治的殺菌劑選用、復配或混用提供了理論依據。

參考文獻：

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