楚紅英，曹 靜，魏家紅，王哲嶸

（黃河水利職業(yè)技術學院，河南 開封 475004）

0 引言

苦菜（Sonchus oleraceus L）為菊科苦苣屬的一年生或兩年生草本植物，又稱苦苣菜、苣荬菜、甘馬菜等，全草含有多種營養(yǎng)成分，是一種藥食同源的植物[1-2]。 作為食材，苦菜味道獨特、營養(yǎng)豐富，含有人體需要的多種維生素、礦物質、糖類等成分[3]，越來越成為人們餐桌上的珍品。 作為藥材，苦菜具有防治貧血、消暑保健、清熱解毒、殺菌消炎、提高免疫力、抗腫瘤等作用[4]。 研究表明，苦菜中含有豐富的鐵[5]。 鐵是血紅蛋白、肌紅蛋白、細胞色素和其他酶系統(tǒng)的主要成分，可幫助氧的運輸，缺鐵可能造成貧血，并容易使人疲勞[6]。 因此，定量分析苦菜中鐵的含量，具有一定的應用價值。

鐵含量測定方法有EDTA 滴定法、X 射線熒光光譜法、電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法、光度法等。 其中，EDTA 滴定法對滴定條件要求比較嚴格；X 射線熒光光譜檢測技術具有分析速度快、檢測元素范圍廣、前處理簡便、無污染，以及無損檢測等優(yōu)點[7]；電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法具有檢出限低、基體效應小、線性范圍寬，以及多元素同時分析等諸多優(yōu)點[8]。但是，X 射線熒光光譜法、電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法儀器比較昂貴。 而鄰菲啰啉分光光度法（光度法中的一種）具有高靈敏度、高選擇性、穩(wěn)定性好、干擾易消除等優(yōu)點[9]。 本文試采用鄰菲啰啉分光光度法測定苦菜中鐵的含量，并探討了酸堿度、緩沖溶液的用量以及樣品處理方法（濕法和干法消解）對測定鐵含量的影響。

1 實驗部分

1.1 試劑與儀器

實驗所用苦菜為2012 年4 月上旬在黃河水利職業(yè)技術學院梨院內采的野生苦菜。 所用試劑有：硫酸鐵銨、鹽酸羥胺、乙酸鈉、氫氧化鈉、鄰菲啰啉、濃硫酸、濃硝酸（以上試劑均為分析純）。 實驗用水為二次蒸餾水。

實驗儀器包括：PB1502-L 型分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；ZRD-8210 電熱風干燥箱（上海智誠分析儀器制造有限公司）；電子萬用爐（北京市永光明醫(yī)療儀器廠）；TU-1810 型紫外-可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責任公司）。

1.2 溶液的制備

1.2.1 鐵標準溶液的制備

將2.0 g 硫酸鐵銨溶于200 mL 水中，然后在該溶液中加入5mL 濃硫酸，并用水定容至1 000 mL。從1000 mL 溶液中吸取10 mL 到100 mL 容量瓶中，再用水定容至100 mL，得到濃度為0.2 mg/mL 的鐵標準溶液。

1.2.2 緩沖溶液的制備

將54.6 g 乙酸鈉放入20 mL 物質的量為1 mol/L的乙酸溶液中，待溶解后，加水稀釋至500 mL，得到1 mol/L 的乙酸-乙酸鈉緩沖溶液。

1.3 鐵標準曲線的制作

吸取鐵標準溶 液0.00、2.00 mL、4.00 mL、6.00 mL、8.00 mL、10.00 mL，分別置于50 mL 的比色管中，在每個比色管中均加10%的鹽酸羥胺1.00 mL、1.5 g/L 的鄰菲啰啉溶液1.00 mL 和緩沖溶液5.00 mL，并加水定容至50 mL。 然后，用紫外分光光度計掃描 （波長范圍為400～800nm），并與空白溶液對比，從而確定檢測波長。 掃描結果發(fā)現(xiàn)，溶液在510 nm 處有最大吸收量，由此確定檢測波長為510 nm。在此波長下，測定每個標準樣的吸光度值。 以吸光度值為縱坐標，以標準樣品濃度為橫坐標，繪制標準曲線（如圖1 所示）。 求得該曲線的線性回歸方程，為A=0.0175c+0.0105。 由圖1 可以看出，濃度在0～40 mg/L 之間，吸光度值與樣品濃度呈線性關系，其相關系數r=0.9992(n=6)。

圖1 鐵標準曲線Fig.1 Standard curve of iron

1.4 樣品處理

將苦菜洗凈，放陰涼處自然風干后，在瓷研缽中研細，過100 目篩子，于干燥器中儲存?zhèn)溆谩?/p>

1.4.1 濕法消解苦菜樣品

準確稱取苦菜樣品1.0 g，置于三角燒瓶中，再將10 mL 濃硝酸和2 mL 濃硫酸加入三角燒瓶中，消解苦菜，用小燒杯蓋口，靜置過夜。 將三角燒瓶放在電爐上煮沸至棕色后冷卻，逐滴加2 mL 濃硝酸，再煮沸，反復多次，直到溶液保持淡黃色[10]。 用蒸餾水清洗，定容至50 mL 容量瓶中，作為儲備液。

1.4.2 干法消解苦菜樣品

準確稱取苦菜樣品1.0 g，放入瓷坩堝中, 將瓷坩堝置于電爐上，用小火炭化至無煙后，放入馬弗爐中, 從低溫升至800℃, 灼燒4h 后取出，冷卻。 再加少量的硝酸，用小火加熱至無炭粒[11]，過濾。 將濾液定容至50 mL 容量瓶中，作為儲備液。

2 結果與討論

2.1 實驗條件分析

2.1.1 酸堿度的影響

取8 支50 mL 的比色管，用移液管分別移取1.00 mL 樣品儲備液，轉入比色管中，用一定濃度的NaOH 溶液或HCl 溶液將pH 值調節(jié)為1～8。以空白試劑作參比，在510nm 波長下測定吸光度。 通過對比，發(fā)現(xiàn)當pH 值小于2 時，溶液在30min 內幾乎看不到顯色。 這是因為鄰菲羅啉顯色較慢，所以吸光度較低。在pH 值大于2 時，隨著pH 值的增加，吸光度明顯增加，當pH=5～6 時，吸光度值達到最大。 當pH 值大于7 時，由于鹽酸羥胺的還原性增強，將部分還原為鐵單質[12]，吸光度開始減小。 選擇pH=5 時進行測試。

2.1.2 緩沖溶液的用量

本實驗選用乙酸-乙酸鈉作為緩沖溶液。 取10支50mL 的比色管，用移液管分別移取1.00mL 樣品儲備液，轉入比色管中，然后分別移取緩沖溶液1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL、6.00 mL、7.00 mL、8.00 mL、9.00 mL、10.00 mL 至不同的比色管中。 結果隨著緩沖溶液用量的增加，吸光度開始明顯呈上升趨勢，但用量達到5.00 mL 以后吸光度趨于穩(wěn)定，故選擇緩沖溶液的適用量為5.00 mL。

2.2 苦菜中鐵的含量

從樣品儲備液中吸取5.00 mL 置于50 mL 比色管中(每種樣品平均做3 次)，加堿中和至pH 值為5左右，然后，加入1.00 mL 的10%鹽酸羥胺溶液，搖勻，再加入1.5 g/L 鄰菲啰啉溶液1.00 mL 和1 mol/L的緩沖溶液5.00 mL，用水稀釋至刻度，顯色時間為20 min，分別測定其吸光度值。 將吸光度值代入回歸方程，計算出苦菜不同部位鐵的含量（如表1 所示）。

表1 苦菜中鐵的含量Table 1 Iron content of sow thistle

由表1 可以得知，濕法和干法處理樣品的結果稍有差異。 這主要是由于反應機理的不同，干法消解是通過高溫灰化徹底破壞樣品中的有機物，而濕法消解則是通過加入混合酸去破壞、消除苦菜中的有機物。 實驗發(fā)現(xiàn)，濕法消解得到的是淡黃色澄清的溶液，且在苦菜根的消解溶液中發(fā)現(xiàn)有渾濁現(xiàn)象（說明有機物破壞得不徹底）。 這可能是導致濕法消解偏低的原因。 然而，無論濕法或干法，苦菜根中鐵的含量均較高，其次是全草，苦菜葉中鐵的含量較低。

2.3 回收率試驗

準確移取已知鐵含量的苦菜葉儲備液6 份（每份7.0μg），分別加入不同量的鐵標準溶液，各份均按處理樣品的方法進行處理，測定鐵含量。 測定結果如表2 所示。

表2 測定鐵含量回收率試驗結果Table 2 Recovery rate test results of iron content

由表2 可知，平均回收率為97.6%，RSD 為3.4%。

3 結語

采用鄰菲啰啉分光光度法，在檢測波長510 nm、pH=5、緩沖溶液用量為5.00 mL 的條件下，分別用干法消解和濕法消解處理苦菜樣品，測定苦菜中鐵的含量。 結果表明：濕法測定苦菜葉、苦菜根、全草中鐵的含量分別為405.8 mg/kg、726.2 mg/kg、536.6 mg/kg；干法測定苦菜葉、苦菜根、全草中鐵的含量分別為416.3 mg/kg、735.4 mg/kg、546.0 mg/kg。 野生苦菜具有無污染、味道獨特、營養(yǎng)價值豐富等優(yōu)點，開發(fā)利用價值較大。

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