劉波

宜昌市第二人民醫(yī)院，設(shè)備科湖北 宜昌 443000

LIU Bo

Department of Equipment, The Second Hospital of Yichang, Yichang Hubei 443000, China

作為應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù)平臺(tái)，現(xiàn)代流式細(xì)胞儀產(chǎn)生于20世紀(jì)60～70年代。經(jīng)過近40年的發(fā)展和完善，今天的流式細(xì)胞儀已經(jīng)十分成熟，并被廣泛的運(yùn)用于從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的各個(gè)方面，涵蓋了細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)及臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域，在各學(xué)科中發(fā)揮著重要的作用。隨著現(xiàn)代科技的高速發(fā)展，為了滿足生命科學(xué)對(duì)細(xì)胞分析更高層次的要求，流式細(xì)胞技術(shù)已經(jīng)在檢測(cè)技術(shù)、分選技術(shù)及高通量分析等方面取得了許多突破。流式細(xì)胞儀是以激光為光源，集流體力學(xué)技術(shù)、電子物理技術(shù)、光電測(cè)量技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)以及細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)為一體的新型高科技儀器。

1 流式細(xì)胞儀的工作原理[1-4]和基本結(jié)構(gòu)

1.1 流式細(xì)胞儀的工作原理

流式細(xì)胞儀用于檢測(cè)單細(xì)胞或微粒的信號(hào)，一般是將待測(cè)細(xì)胞或微粒進(jìn)行熒光染色后制成懸液標(biāo)本，在一定氣體壓力下將待測(cè)樣品壓入流動(dòng)室，不含細(xì)胞或微粒的緩沖液（又稱鞘液）在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管入口方向與待測(cè)細(xì)胞或微粒流成一定角度，使鞘液包繞著細(xì)胞或微粒高速流動(dòng)，形成一個(gè)圓形的流束（即鞘流），待測(cè)細(xì)胞在鞘液的包裹下單行排列，依次通過流式細(xì)胞儀的檢測(cè)區(qū)域。激發(fā)光源經(jīng)過聚焦整形后的光束垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下產(chǎn)生激發(fā)熒光，同時(shí)產(chǎn)生散射光。這兩種光信號(hào)被在90°方向的光電倍增管熒光檢測(cè)器和前向角光電二極管散射光檢測(cè)器接收，經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，再通過A/D轉(zhuǎn)換器，將轉(zhuǎn)換來的電信號(hào)轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號(hào)輸送給計(jì)算機(jī)。計(jì)算機(jī)將各種數(shù)字信號(hào)進(jìn)行計(jì)算處理后，得到相應(yīng)的細(xì)胞大小、活性、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子、DNA含量和細(xì)胞周期、核糖核酸（Ribonucleic Acid，RNA）含量、酶和抗原的性質(zhì)等參數(shù)。

細(xì)胞的分選是通過分離含有單細(xì)胞的液滴而實(shí)現(xiàn)的。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)頻率為30 kHz的壓電晶體，充電后振動(dòng)，使嘖出的液流斷裂為一連串均勻的液滴，待測(cè)細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負(fù)不同的電荷，當(dāng)液滴流經(jīng)帶有幾千伏的偏轉(zhuǎn)板時(shí)，在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉(zhuǎn)，落入各自的收集容器中，不予充電的液滴落入中間的廢液容器，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。

1.2 流式細(xì)胞儀的基本結(jié)構(gòu)[5-11]

以庫爾特FC50和BD公司的LDR流式細(xì)胞儀為例，流式細(xì)胞儀的基本結(jié)構(gòu)可以分為液流系統(tǒng)、光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)以及數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換處理系統(tǒng)三部分。

1.2.1 液流系統(tǒng)

液流系統(tǒng)是流式細(xì)胞儀的核心部件。流動(dòng)室由石英玻璃制成，并在石英玻璃中央開一個(gè)微孔，供細(xì)胞單個(gè)流過，檢測(cè)區(qū)在該孔的中心，流動(dòng)室內(nèi)充滿了鞘液,鞘液的作用是將樣品流環(huán)包。樣品流在鞘流的環(huán)包下聚焦，保證每個(gè)細(xì)胞通過激光照射區(qū)的時(shí)間相等，從而得到準(zhǔn)確的細(xì)胞熒光信息。液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)由空氣泵、壓力調(diào)節(jié)、壓力傳感器等組成。空氣泵產(chǎn)生壓縮空氣，通過鞘流壓力調(diào)節(jié)器加在鞘液上一恒定的壓力，這樣鞘液可勻速流過流動(dòng)室。

鞘流原理：根據(jù)流體力學(xué)理論，流動(dòng)的液體分為穩(wěn)流和湍流兩種狀態(tài)。1883年雷諾發(fā)現(xiàn)了液體流動(dòng)狀態(tài)的分界點(diǎn)，即雷諾系數(shù)，其定義為：在一個(gè)直徑為d的管子內(nèi)，液體的流速為v，密度為ρ，黏滯系數(shù)為n，Re = dρv/n。當(dāng)Re＞2300 時(shí)，液流處于穩(wěn)流狀態(tài)；當(dāng)Re＜2300時(shí)，液流處于湍流狀態(tài)。

在流式細(xì)胞儀中，希望標(biāo)本處于穩(wěn)流狀態(tài)。如果標(biāo)本流的直徑固定為100μm，根據(jù)水密度和黏粘滯系數(shù)帶入公式可計(jì)算出v=23 m/s，這就是保持標(biāo)本流穩(wěn)定的最高速度，考慮到標(biāo)本流和管壁之間的浸潤情況，常把流速限制在10 m/s以下。

為了穩(wěn)定標(biāo)本流的直徑，流動(dòng)室在設(shè)計(jì)時(shí)還利用了液流的聚焦作用。根據(jù)流體力學(xué)的伯努利定律， S1V1=S2V2，S和V分別為兩個(gè)管道的截面積和液體流速。在流動(dòng)室中，S1>S2，則V2>V1。當(dāng)兩個(gè)截面積突然發(fā)生變化時(shí)，液流從截面積大的部分流入截面積小的部分后，并非全部形成于管壁的穩(wěn)流，而是在入口處有一段收縮的區(qū)域，這種現(xiàn)象稱為液流聚焦，見圖1。在細(xì)胞儀中常把激光激發(fā)點(diǎn)設(shè)在此處。由于標(biāo)本流變小，通常為10～20μm，可避免多個(gè)細(xì)胞重疊進(jìn)入檢測(cè)區(qū)，只需要簡單的改變標(biāo)本的濃度，就可以設(shè)置細(xì)胞流經(jīng)激發(fā)點(diǎn)的平均距離，使其間隔達(dá)數(shù)百μm，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè)細(xì)胞的測(cè)量。

圖1 液流聚焦示意圖

1.2.2 光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)

現(xiàn)代流式細(xì)胞儀的激發(fā)光源通常采用激光，由于激光焦點(diǎn)處能量分布為正態(tài)分布，中心處能量最高。因此，當(dāng)樣本速率選擇高速時(shí)，處在樣本流不同位置的細(xì)胞或顆粒，受激光照射的能量不一樣，從而被激發(fā)出的熒光強(qiáng)度也不相同。流式細(xì)胞儀光路布局為多個(gè)波長的激光器通過棱鏡組聚集成一束光束，在通過消色差透鏡聚焦到流動(dòng)室上，對(duì)標(biāo)本液流進(jìn)行照射。標(biāo)本被激光照射后產(chǎn)生前向散射光（FSC）和側(cè)向散射光（SSC）及側(cè)向熒光（SFL）。在流式細(xì)胞分析中，需要針對(duì)細(xì)胞的熒光特性進(jìn)行分析，所以采用前向散射光和側(cè)向熒光對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分析。

前向散射光（FSC）主要為了獲取細(xì)胞體積大小的數(shù)據(jù)，散射光經(jīng)過透鏡、狹縫、濾光片后被光電接收二極管采集，送往后續(xù)電路處理分析。側(cè)向熒光（SFL）主要是分析細(xì)胞的熒光特性，根據(jù)熒光探針的機(jī)理，細(xì)胞被熒光染料著色后，在相應(yīng)波長的激光照射下，激發(fā)熒光，在該波長下顯現(xiàn)出該細(xì)胞特有的熒光特性，從而進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù)和分析。側(cè)向散射光（SSC）則對(duì)細(xì)胞的內(nèi)容物核質(zhì)比等信息進(jìn)行分析，作為流式細(xì)胞分析的輔助手段，該項(xiàng)技術(shù)在血細(xì)胞分析儀中成為篩選分析細(xì)胞類型的手段。側(cè)向熒光（SFL）經(jīng)過透鏡和不同波長的分光器，分送到各個(gè)光電倍增管（PMT）中進(jìn)行信號(hào)接收，并送往后續(xù)電路進(jìn)行分析。側(cè)向散射光（SSC）一般經(jīng)過分光后直接交給光電二極管進(jìn)行接收分析。

1.2.3 數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換處理系統(tǒng)

（1）電子系統(tǒng)。流式細(xì)胞儀的電子系統(tǒng)主要由光電轉(zhuǎn)換器件光電二極管、PMT和信號(hào)處理電路組成。PMT可將光子轉(zhuǎn)換為電子，當(dāng)一個(gè)光子到達(dá)PMT的光電陰極時(shí)，可產(chǎn)生數(shù)十萬的電子。流式細(xì)胞儀中所用PMT的電流放大倍數(shù)可達(dá)106，但是從統(tǒng)計(jì)學(xué)角度來說，為了保證檢測(cè)的靈敏度和精密度，最好能從整體中抽取更多的樣本進(jìn)行分析，測(cè)定結(jié)果才會(huì)更準(zhǔn)確地反映整體的真實(shí)情況，精密度會(huì)更好。光電轉(zhuǎn)換器件可將光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電流信號(hào)，但傳統(tǒng)的模擬電路更適合處理電壓信號(hào)而不是電流信號(hào)，需要由前置放大電路進(jìn)行處理。前置放大電路是流式細(xì)胞儀信號(hào)處理電路中的第一個(gè)環(huán)節(jié)，它將電流信號(hào)轉(zhuǎn)換為電壓信號(hào)，同時(shí)可調(diào)整直流背景噪音為零，也就是說，在沒有光信號(hào)進(jìn)入時(shí)所輸出的電壓值為零。前置放大器的性能(增益、信噪比)是決定整個(gè)流式細(xì)胞儀電子系統(tǒng)輸出信號(hào)質(zhì)量的關(guān)鍵部分。前置放大電路所輸出的電壓信號(hào)為脈沖信號(hào)，脈沖高度與入射光信號(hào)的強(qiáng)度成正比，其峰值為被測(cè)細(xì)胞通過光束中心位置時(shí)所產(chǎn)生的最強(qiáng)信號(hào)。為了記錄這一峰值信號(hào)，在前置放大電路之后使用了峰值檢測(cè)器，峰值檢測(cè)器可在信號(hào)脈沖消失之后保持峰值信號(hào)，直到模/數(shù)轉(zhuǎn)換電路將模擬的峰值信號(hào)轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號(hào)之后才重新復(fù)位，記錄下一個(gè)信號(hào)。

（2）計(jì)算機(jī)系統(tǒng)。計(jì)算機(jī)系統(tǒng)用于控制整個(gè)儀器的運(yùn)行和數(shù)據(jù)采集、數(shù)據(jù)分析。操作平臺(tái)上BD流式細(xì)胞儀應(yīng)用了蘋果系統(tǒng)而貝克曼庫爾特流式細(xì)胞儀大多為WINDOWS界面,方便用戶對(duì)數(shù)據(jù)和圖片的處理、打印報(bào)告單及論文資料的整理發(fā)表、硬件升級(jí)以及網(wǎng)絡(luò)化管理等，同時(shí)它用于對(duì)儀器的硬件部分進(jìn)行控制，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)的采集和對(duì)數(shù)據(jù)的分析。

流式細(xì)胞儀的數(shù)據(jù)格式為FCS2.0，是國際分析細(xì)胞學(xué)學(xué)會(huì)ISAC修改確定的。

數(shù)據(jù)分析模式為列表模式（List Mode）和直方圖模式（Histogram Mode），前者將每個(gè)細(xì)胞各個(gè)檢測(cè)參量一次排列存儲(chǔ)。如1個(gè)細(xì)胞被激光照射后，會(huì)產(chǎn)生多個(gè)數(shù)據(jù)：前向散射光、側(cè)向散射光、數(shù)個(gè)熒光信號(hào)，這些數(shù)據(jù)被列表保存。優(yōu)點(diǎn)是可對(duì)原數(shù)據(jù)進(jìn)行再處理和分析，缺點(diǎn)是文件體積較大，不夠直觀。后者只能記錄每個(gè)樣本檢測(cè)結(jié)果的圖形數(shù)據(jù)，可以顯示和打印文件，文件體積小，但不能對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行再次分析。

流式細(xì)胞分析的設(shè)門，是伴隨數(shù)據(jù)的圖形化分析而產(chǎn)生的，指在細(xì)胞分布圖中指定一個(gè)范圍或一片區(qū)域，對(duì)其中的細(xì)胞進(jìn)行單參數(shù)或多參數(shù)分析。門的形狀包括線性門、矩形門、圓形門、多邊形門、任意形狀門、四象限門。反向設(shè)門用于FSC/SCC散點(diǎn)圖中細(xì)胞群間相互重疊的情況。

2 流式細(xì)胞儀的臨床應(yīng)用

流式細(xì)胞儀目前被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)等理論科學(xué)的研究和臨床醫(yī)學(xué)的疾病診斷、治療和監(jiān)測(cè)等醫(yī)療實(shí)踐中[12-14]。

2.1 流式細(xì)胞儀在免疫學(xué)中的應(yīng)用

利用多參數(shù)FCM，對(duì)淋巴細(xì)胞比例、淋巴細(xì)胞中T、B、NK細(xì)胞的比例及T細(xì)胞亞群及細(xì)胞表型進(jìn)行分析[15]。

2.2 細(xì)胞周期測(cè)定和DNA倍體分析[16-17]

細(xì)胞增殖周期分為G0、G1、S、G2、M期。S期是DNA合成期，在S期內(nèi)，DNA進(jìn)行復(fù)制，使細(xì)胞的DNA含量由2倍體(46條染色體)變?yōu)?倍體。G1和G2期為DNA合成前、后期，這兩個(gè)時(shí)期無DNA的合成，但RNA和蛋白質(zhì)進(jìn)行合成。M期為有絲分裂期，在此期一個(gè)細(xì)胞分裂為2個(gè)細(xì)胞。細(xì)胞內(nèi)的92條染色體分裂成2組46條染色體，使每個(gè)細(xì)胞內(nèi)具有46條染色體。在M期分裂成2個(gè)子細(xì)胞之前，G2和M期細(xì)胞的DNA含量均為恒定的4C。M期以后部分細(xì)胞進(jìn)入G1期，繼續(xù)進(jìn)行增殖，部分細(xì)胞進(jìn)入G0期，即靜止期，不再繼續(xù)增殖。

利用DNA的熒光染料碘化丙啶（Propidium Iodide，PI），與細(xì)胞內(nèi)的DNA結(jié)合，可反映細(xì)胞內(nèi)DNA含量，用DNA直方圖顯示。FCM分析一個(gè)群體細(xì)胞峰DNA倍體與細(xì)胞周期，將DNA含量直方圖分為3部分，即G0/G1,S,G2/M期3個(gè)細(xì)胞峰。G0/G1和G2/M細(xì)胞峰DNA的含量成正態(tài)分布，S期細(xì)胞峰則是一個(gè)加寬的正態(tài)分布，具有2倍體DNA含量細(xì)胞為G0/G1期細(xì)胞，4倍體DNA含量細(xì)胞為G2/M期細(xì)胞，DNA含量介于兩者之間的細(xì)胞為S期細(xì)胞。

DNA倍體用DNA指數(shù)（DIVA Index, DI）表示，DNA指數(shù)是指測(cè)量樣本G0/G1期DNA含量與正常人淋巴細(xì)胞G0/G1期DNA含量的比值。正常細(xì)胞DNA指數(shù)為1.00，DNA指數(shù)> 1，為超2倍體，< 1為亞2倍體，兩者可統(tǒng)稱為非整倍體。非整倍體細(xì)胞中腫瘤的特異性標(biāo)志，是癌前病變發(fā)生癌變的一個(gè)重要指標(biāo)。

2.3 流式細(xì)胞儀在血液系統(tǒng)疾病檢測(cè)中的應(yīng)用

FCM通過對(duì)外周血細(xì)胞或骨髓細(xì)胞表面抗原和DNA的檢測(cè)分析，對(duì)各種血液病的診斷、預(yù)后判斷和治療起著舉足輕重的作用[18-20]。

（1）白血病的診斷和治療。FCM采用各種抗血細(xì)胞表面分化抗原(cD)的單克隆抗體，借助于各種熒光染料測(cè)定一個(gè)細(xì)胞的多種參數(shù)，以正確地判斷出該細(xì)胞的屬性。各種血細(xì)胞系統(tǒng)都具有其獨(dú)特的抗原，當(dāng)形態(tài)學(xué)檢查難以區(qū)別時(shí)，免疫表型參數(shù)對(duì)各種急性白血病的分型診斷和鑒別診斷有決定性作用。同其他腫瘤的治療一樣，測(cè)定DNA倍體和進(jìn)行細(xì)胞周期分析對(duì)指導(dǎo)白血病化療有一定作用，不同的白血病患者或同一患者在不同病期白血病細(xì)胞增殖狀況不同，定期了解細(xì)胞增殖情況采取相應(yīng)藥物可以提高療效。FCM通過對(duì)人白細(xì)胞抗原(HIA)配型的測(cè)定可以為異體干細(xì)胞移植病人選擇出最合適的供體。FCM測(cè)定CD34HLA—DR、CD33等細(xì)胞表面標(biāo)記物，是干細(xì)胞移植術(shù)重要的監(jiān)測(cè)手段。用FCM檢測(cè)一系列指標(biāo)觀察病人的恢復(fù)狀態(tài)，可以對(duì)預(yù)后做出早期的判斷。

（2）其他種類血液病的診斷和治療監(jiān)測(cè)。陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥是一種造血干細(xì)胞克隆病，細(xì)胞CD44、CD59抗原表達(dá)減低是該病的一個(gè)特點(diǎn)。該抗原屬于血細(xì)胞表面磷脂酰肌醇錨連蛋白家族，是重要的補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白，它通過與補(bǔ)體C8、C9的結(jié)合以阻止補(bǔ)體膜攻擊復(fù)合物的形成，從而抑制細(xì)胞被補(bǔ)體系統(tǒng)溶解。FCM采用熒光標(biāo)記的單克隆抗體對(duì)血細(xì)胞CD59的表達(dá)做定量分析，可以協(xié)助臨床做出診斷并判斷疾病的嚴(yán)重程度。

（3）網(wǎng)織紅細(xì)胞的測(cè)定及臨床應(yīng)用。目前，F(xiàn)CM檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞主要用于預(yù)測(cè)骨髓移植的效果解釋各種紅細(xì)胞增長低下性貧血的發(fā)病原因，評(píng)價(jià)某些新的重組生物制劑的治療效果。

2.4 流式細(xì)胞儀在血栓與血小板相關(guān)疾病中的應(yīng)用

血小板活化時(shí)其質(zhì)膜糖蛋白較其靜止期發(fā)生顯著改變，F(xiàn)CM可以通過單抗免疫熒光標(biāo)記監(jiān)測(cè)血小板及活化情況。采用全血法測(cè)定，只需微量標(biāo)本，在許多血小板相關(guān)疾病的診斷上有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。

（1）血栓性疾病。動(dòng)脈粥樣硬化前期血小板沉積，可導(dǎo)致心肌梗死和卒中(中風(fēng))，抗血小板藥能降低心肌缺血的發(fā)生率，證明心肌缺血與血小板活化有關(guān)。全血法FCM檢測(cè)表明心絞痛和心肌梗死患者循環(huán)系統(tǒng)中有活化的血小板.血小板活力也增強(qiáng)。冠狀竇血液的檢測(cè)表明，冠狀血管成形術(shù)會(huì)導(dǎo)致血小板活化。如果血流恢復(fù)后有高水平的活化血小板，血管可能因?yàn)閮?nèi)皮細(xì)胞嚴(yán)重?fù)p傷或血小板栓塞而發(fā)生再狹窄。因此，活化血小板的檢測(cè)能預(yù)測(cè)冠狀血管成形術(shù)后發(fā)生急性缺血事件的危險(xiǎn)性。

（2）血小板缺陷性疾病。血小板缺陷性疾病如巨大血小板綜合征，它是由于GPlb—IX復(fù)合物先天缺陷所致的血小板形態(tài)巨大，功能異常的出血性疾病。巨大血小板從全血中分離很困難。FCM檢測(cè)能特異性地識(shí)別血小板，省去了分離巨大血小板的步驟，使檢測(cè)更簡便、精確。

（3）血小板減少性疾病。破壞過多或生成減少均能導(dǎo)致血小板減少。血小板相關(guān)抗體(PAIg)是反映血小板的破壞的指標(biāo)，雖然其臨床意義仍有爭議。流式細(xì)胞儀用較少血量(1ml)的血液制備的血小板就能測(cè)定血小板上的PAIg平均水平。FCM還能測(cè)定其它一些反映血小板破壞的指標(biāo)，如PAIgG、PAIgM、C3等。同時(shí)FCM能像檢測(cè)網(wǎng)織紅細(xì)胞那樣，檢測(cè)到循環(huán)中的“網(wǎng)織”血小板，來判斷血小板的生成。

2.5 流式細(xì)胞儀在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用

FCM已成為腫瘤學(xué)的主要研究手段之一，近年來已應(yīng)用DNA倍體測(cè)定技術(shù)對(duì)多種實(shí)體瘤細(xì)胞進(jìn)行研究。DNA含量直接代表細(xì)胞的倍體狀態(tài)，非倍體細(xì)胞與腫瘤惡性程度有關(guān)。

（1）發(fā)現(xiàn)癌前病變，協(xié)助腫瘤早期診斷。人體正常的體細(xì)胞均具有比較穩(wěn)定的DNA二倍體含量。當(dāng)人體發(fā)生癌變或具有惡性潛能的癌前病變時(shí)，細(xì)胞DNA含量可發(fā)生異常改變，DNA非整倍體出現(xiàn)率增高。FCM可精確定量DNA含量的改變。作為診斷癌前病變發(fā)展至癌變中的一個(gè)有價(jià)值的標(biāo)志，F(xiàn)CM能對(duì)癌前病變的性質(zhì)及發(fā)展趨勢(shì)作出估價(jià)，有助于癌變的早期診斷。

（2）腫瘤的診斷、預(yù)后判斷和治療中的作用。DNA非整倍體細(xì)胞峰的存在可為腫瘤診斷提供有力的依據(jù)。腫瘤細(xì)胞DNA倍體分析對(duì)病人預(yù)后的判斷有重要作用，異倍體腫瘤惡性病變的復(fù)發(fā)率高、轉(zhuǎn)移率高、死亡率也高，而二倍體及近二倍體腫瘤的預(yù)后則較好。FCM還可根據(jù)化療過程中腫瘤DNA分布直方圖的變化了解細(xì)胞周期細(xì)胞動(dòng)力學(xué)變化，評(píng)估療效。

2.6 流式細(xì)胞儀在藥物學(xué)方面的應(yīng)用

流式細(xì)胞儀在檢測(cè)藥物在細(xì)胞中的分布，研究藥物的作用機(jī)制方面應(yīng)用廣泛。亦可用于篩選新藥，如化療藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的凋亡機(jī)制，可通過測(cè)DNA凋亡峰，Bcl-2凋亡調(diào)節(jié)蛋白等進(jìn)行觀察。

綜上所述，F(xiàn)CM具有快速，靈敏及能同時(shí)進(jìn)行多參數(shù)分析的優(yōu)點(diǎn)，可以廣泛運(yùn)用于從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的各個(gè)方面，涵蓋細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)及臨床檢驗(yàn)等多個(gè)領(lǐng)域。

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