吳虹玥，張靜恒，方曉燕

(四川省成都市食品藥品檢測(cè)中心，四川 成都 610045)

氧化樂(lè)果屬于高毒禁用有機(jī)磷類農(nóng)藥，其極性較強(qiáng)［1］。已報(bào)道的檢測(cè)方法有毛細(xì)管電泳法，氣相色譜法，高效液相色譜法，TLCS 法和酶聯(lián)免疫法等［2］。在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)中，推薦的是氣相色譜法。在氣相色譜法里，如果在前處理過(guò)程中不增加凈化步驟，則會(huì)由于色素等雜質(zhì)造成進(jìn)樣口、色譜柱，甚至檢測(cè)器的污染;但增加凈化步驟，則回收率較低，檢出限較高，難以滿足痕量分析的需要。另外，它容易在檢測(cè)過(guò)程中產(chǎn)生基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)［3］，嚴(yán)重影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此其測(cè)定是長(zhǎng)期困擾檢測(cè)工作者的問(wèn)題。

三重四級(jí)桿質(zhì)譜，通過(guò)在四級(jí)桿中選擇性地對(duì)母離子碰撞碎裂產(chǎn)生子離子，可大幅度減少或消除基體干擾。其主要優(yōu)點(diǎn)是即使在最復(fù)雜基質(zhì)中，在超低水平濃度的檢測(cè)范圍內(nèi)改善目標(biāo)化合物的信噪比，使農(nóng)藥篩查達(dá)到更低檢測(cè)限［4］。

本文使用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定食用菌中氧化樂(lè)果殘留，顯著去除基質(zhì)對(duì)氧化樂(lè)果的干擾，使?jié)舛葮O低時(shí)峰面積有良好的重現(xiàn)性，使數(shù)據(jù)更為可靠。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

美國(guó)Agilent 7890A 氣相色譜儀，7000 三重四級(jí)桿質(zhì)譜檢測(cè)器，配化學(xué)工作站和自動(dòng)進(jìn)樣器，高速勻漿機(jī)，氮吹儀，乙腈，丙酮，氯化鈉，氧化樂(lè)果標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 (濃度為100 mg·L-1，丙酮為溶劑，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所研制)，使用時(shí)，根據(jù)檢測(cè)要求用丙酮稀釋成相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

1.2 色譜分析條件

色譜柱為HP-5MS 石英毛細(xì)管柱 (30 m×0.25 mm×0.25 μm)，載氣為高純氮?dú)?(純度≥99.999%);進(jìn)樣方式:不分流;恒壓模式(15 psi)，程序升溫:從155℃開始，以每分鐘10℃升溫到250℃，保持1 min，進(jìn)樣量1 μL。安捷倫7000 QQQ 系統(tǒng)配置EI 離子源70 eV，使用MRM 操作模式，離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度150℃。碰撞氣體流量He 2.25 mL·min-1，N21.5 mL·min-1。

1.3 樣品的制備

稱取食用菌25 g (準(zhǔn)確至0.01 g)，放入勻漿機(jī)中，加入50.0 mL 乙腈，高速勻漿2 min，布氏漏斗抽濾，濾液收集到裝有5 g 左右氯化鈉的50 mL 具塞比色管中，收集濾液，然后蓋上塞子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置1 h，使乙腈和水相分層。吸取10.0 mL 乙腈溶液放入試管中，氮吹至近干，用丙酮定容到2.50 mL，供色譜測(cè)定使用。

2 結(jié)果與討論

2.1 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜條件優(yōu)化

2.1.1 前級(jí)離子的選擇

將標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行全掃描 (Full Scan)，確定氧化樂(lè)果的保留時(shí)間，然后找出了156，141，126 和110 m/z 這4個(gè)豐度較大、質(zhì)荷比較大的碎片離子。接著再用SIM 方式掃描 (圖1)，選擇其中響應(yīng)值最高，豐度最大，無(wú)干擾，質(zhì)荷比盡可能大的碎片156 m/z 作為產(chǎn)物離子的前級(jí)離子。

圖1 SIM 方式掃描確定156 m/z 為前級(jí)離子

2.1.2 產(chǎn)物離子的選擇

根據(jù)前級(jí)離子156 m/z，選擇當(dāng)碰撞能量分別為0，15，30，45 V 時(shí)，產(chǎn)生產(chǎn)物離子豐度和質(zhì)荷比最佳的碰撞能量區(qū)間為0～15 V (圖2)。然后再?gòu)呐鲎材芰繛?，2，4，5 V 時(shí)，選擇了最佳碰撞能量2 V (圖3)，并確定了前級(jí)離子產(chǎn)生的豐度大，質(zhì)荷比大的兩個(gè)產(chǎn)物離子141 和110 m/z (圖4)。

圖2 使用碰撞能量為0，15，30，45 V 時(shí)，前級(jí)離子產(chǎn)生的產(chǎn)物離子譜圖

圖3 使用碰撞能量為1.0，2.0，4.0，5.0 V時(shí)，前級(jí)離子產(chǎn)生的產(chǎn)物離子譜圖

圖4 最后確定的前級(jí)離子156 m/z 碰撞后產(chǎn)生92個(gè)產(chǎn)物離子141 和110 m/z

2.2 線性與檢出限

取適量氧化樂(lè)果標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，分別用丙酮稀釋成濃度為0.01，0.10，1.00，2.00，4.00 mg·L-1的使用液進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明，在濃度為0.01～4.00 mg·L-1時(shí)，定量離子的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度呈良好的線性關(guān)系，y=21 773.643 959 x+563.273 568，r=0.9 907，檢出限為0.000 3 mg·kg-1。

2.3 精密度與回收率

對(duì)食用菌中的氧化樂(lè)果殘留采取3種添加水平做回收率和精密度實(shí)驗(yàn) (n=5) (表1)。由表可以看出，氧化樂(lè)果的回收率在79.3～105.4%，RSD≤5%。

表1 回收率和精密度 (n=5)

3 小結(jié)

氣相色譜-質(zhì)譜串聯(lián)法能夠顯著除去食用菌中的基質(zhì)干擾，在樣品濃度極低的情況下也能有良好的重現(xiàn)性，避免了增加凈化步驟而導(dǎo)致結(jié)果不可靠的現(xiàn)象，滿足食用菌中氧化樂(lè)果殘留痕量分析的要求。

［1］韓梅，易盛國(guó)，侯雪，等.結(jié)球甘藍(lán)中氧化樂(lè)果殘留量的測(cè)定［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2010 (5):147-148.

［2］鞠芳芳，張喜軒，孫體健，等.氣相色譜和氣相色譜/質(zhì)譜法檢測(cè)生物樣品中氧化樂(lè)果［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2009，19 (12):2729-2730，2785.

［3］施家威，李繼革，王玉飛，等，固相萃取-氣相色譜/三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜分析蔬菜中42種農(nóng)藥殘留［J］.色譜，2010，28 (12):1137-1143.

［4］孫雷麗，李曉玉，隋濤.氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定菠菜中有機(jī)氯殘留量 ［J］.廣州化工，2010，38 (11):155-157.