藍玉宏 白力 楊清緒 江曉聰

鼻咽癌表皮生長因子受體表達與腫瘤殘留、療效的關系

藍玉宏 白力 楊清緒 江曉聰

目的探討表皮生長因子受體(EGFR)表達與鼻咽癌患者治療后腫瘤殘留情況的關系及療效預測價值。方法260例鼻咽癌患者應用免疫組織化學技術檢測EGFR在癌組織中的表達，并分析腫瘤殘留及5年生存情況。結(jié)果EGFR在260例鼻咽癌中陽性表達197例(75.8%)，陰性表達63例(24.2%)；EGFR陽性組和陰性組放射治療后腫瘤殘留率分別為24.9%、14.3% (χ2=3.61，P<0.05)；兩組5年總生存率(OS)、無瘤生存率(DFS)、無區(qū)域復發(fā)生存率(LRFS)、無遠處轉(zhuǎn)移生存率(DMFS)分別為68.2%、63.1%，67.2%、64.8%和88.6%、76.4%、87.1%、81.3%(χ2=4.12，χ2=4.01，χ2=3.97，χ2=3.85，P<0.05)；有殘留者遠處轉(zhuǎn)移率67.2%明顯高于無殘留者17.8%(χ2=7.48，P<0.05)；在多因素分析中，EGFR陽性表達與總生存率(OS) 和無病生存率(DFS)顯著相關(r=6.725，P<0.05)；結(jié)論EGFR在鼻咽癌中表達率較高，陽性表達與放療后腫瘤殘留存在相關性，并呈現(xiàn)不良預后的趨勢，有利于預測鼻咽癌患者放療前放射敏感性，有助于選擇合適患者優(yōu)化個體化治療方案。

鼻咽癌；表皮生長因子受體；腫瘤殘留；預后

鼻咽癌是我國南方常見的頭頸部惡性腫瘤，發(fā)病率高達15～25/10萬，放射治療是鼻咽癌的根治性治療手段，可取得較好療效。但部分患者放療后有腫瘤殘留，其預后差。因此，探索可靠的放射敏感性預測指標或預后指標對于指導個體化治療具有重要意義。表皮生長因子受體(Epidermal growth Factor Receptor， EGFR)是原癌基因c-erbB-1(HER-1)的表達產(chǎn)物[1]，為相對分子質(zhì)量為170 KD的單鏈多肽，與許多正常細胞的生長及腫瘤的發(fā)生和增殖有關。近年來在肺癌、乳腺癌、甲狀腺癌等研究中發(fā)現(xiàn)EGFR的表達與腫瘤大小、分化程度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預后有關[2-4]。筆者對260例鼻咽癌(NPC)應用免疫組織化學技術檢測EGFR表達和放射治療結(jié)束時復查鼻咽頸部MRI片加電子鼻咽鏡觀察腫瘤殘留情況，并分析EGFR表達與腫瘤殘留、預后的關系。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集我院2005年8月至2006年12月鼻咽癌(NPC)患者260例(男153例，女107例)，年齡22～68歲，中位年齡44歲。其中低分化鱗癌119例、中分化鱗癌46例、高分化鱗癌31例、未分化癌25例、泡狀核細胞癌23例、腺癌16例。按1992年福州分期，Ⅰ期21例，Ⅱ期53例(T2N0期8例，T1N1期21例，T2N1期24例)，Ⅲ期102例(T3N0期17例，T3N1期19例，T3N2期20例，T1N2期21例，T2N2期25例)，Ⅳ期84例(T4N0期6例，T4N1期7例，T4N2期10例，T4N3期8例，T1N3期6例，T2N3期29例，T3N3期18例)。

1.2治療方法 260例患者均采用同期放化療。放療方案：直線加速器常規(guī)外照射；首先使用面頸聯(lián)合野6 mV-X線照射，后改用小面頸野避開脊髓6 mV-X線照射，頸后淋巴引流區(qū)電子線照射，下頸鎖骨上區(qū)單前野6 mV-X線垂直照射；鼻咽部原發(fā)灶和陽性淋巴結(jié)區(qū)DT 70～74 Gy/35～37次/7～8周，預防區(qū)DT 50～60 Gy/25～30次/5～6周。放療開始一周內(nèi)行第一療程化療，化療方案：順鉑30 mg靜脈滴注，d1-5，5-氟尿嘧啶750 mg靜脈滴注，d1-5，每4周為1個療程。放療每周監(jiān)測血常規(guī)，放療4周后復查肝腎功能及血常規(guī)，若無化療禁忌，則同期進行第2療程化療。腫瘤退縮以放射治療結(jié)束時復查鼻咽頸部MRI片及電子鼻咽鏡觀察為準。

1.3實驗方法主要試劑 兔抗人VEGFR-3多克隆抗體(RAB0522)、即用型免疫組織化學超敏SP試劑盒、DAB顯色液、多聚賴氨酸防脫片劑和PBS緩沖液均購自福建Maxim公司。采用免疫組化SP法染色(SP9002試劑盒和DAB顯色試劑盒均購自北京中山生物技術有限公司)，PBS作為一抗陰性對照。根據(jù)腫瘤細胞膜染色與否判斷為陽性或陰性。

1.4結(jié)果判斷 樣本染色評分參照Form-witz評分方法。0分為陰性(-)， 1～4分弱陽性(+)， 5～8分陽性(++)， 9～12分強陽性(+++)。對每張切片中鼻咽癌組織進行評分。評分<5分病例歸入為EGFR陰性表達組，評分≥5分病例歸入為EGFR陽性表達組。

1.5統(tǒng)計學方法 使用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件，行χ2檢驗， Kaplan-Meier計算生存率，Log-Rank檢驗差異，多變量分析采用COX回歸模型，以α=0.05作為顯著性檢驗水平。生存時間從治療開始計算。

2 結(jié)果

2.1EGFR表達與放射治療后殘留的關系 EGFR在260例鼻咽癌中陽性表達197例(75.8%)，陰性表達63例(24.2%)；放射治療后腫瘤完全退縮202例(Ⅰ期21例，Ⅱ期46例，Ⅲ期74例，Ⅳ期61例)，有殘留者58例(Ⅱ期7例，Ⅲ期28例，Ⅳ期23例)。其中單純鼻咽殘留23例，單純頸部殘留26例，鼻咽及頸部均有殘留9例。EGFR陽性組和陰性組放射治療后殘留率有明顯差異，分別為24.9%、14.3% (χ2=3.61，P<0.05)。腫瘤退縮以放射治療結(jié)束時復查鼻咽頸部MRI片加電子鼻咽鏡觀察為準。見表1。

2.2EGFR表達與生存關系多因素分析 EGFR陽性組和陰性組5年總生存率(OS)、無瘤生存率(DFS)、無區(qū)域復發(fā)生存率(LRFS)、無遠處轉(zhuǎn)移生存率(DMFS)分別為68.2%、63.1%，67.2%、64.8%和88.6%、76.4%、87.1%、81.3%(χ2=4.12，χ2=4.01，χ2=3.97，χ2=3.85，P<0.05)；在多因素分析中，EGFR陽性表達與無病生存率(DFS)和總生存率(OS)顯著相關(r=6.725，P<0.05)。

2.3殘留灶大小與生存關系 結(jié)果表明，殘留病灶越大生存率越低(P<0.01)。見表2。

表1 放射治療后腫瘤殘留情況(例，%)

表2 頸部殘留灶大小對生存率的影響

2.4 腫瘤殘留與遠處轉(zhuǎn)移關系 有殘留者遠處轉(zhuǎn)移67.2%明顯高于無殘留者17.8%(χ2=7.48，P<0.05)， 見表3。

表3 腫瘤殘留與遠處轉(zhuǎn)移比較(例，%)

3 討論

鼻咽癌的有效治療手段是以放射治療為主的綜合治療，但局部失敗仍是治療失敗的主要原因之一。由于腫瘤細胞異質(zhì)性，不同個體對放射線敏感性不同，如何預測腫瘤細胞放射敏感性，指導個體化治療，從而提高腫瘤局控率及生存率是目前研究熱點之一。

表皮生長因子受體(EGFR) 為一種跨膜糖蛋白,屬受體型酪氨酸蛋白激酶(RTK),它是一種具有酪氨酸酶活性的膜表面?zhèn)鞲衅?，廣泛分布于哺乳類動物的細胞膜上[5]。在許多實體腫瘤中存在EGFR 的異常表達或高表達，并與腫瘤細胞的增殖、血管生成、腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及細胞凋亡的抑制有關[6]。細胞實驗證明EGFR可通過增加腫瘤病灶中S期細胞數(shù)量、提高細胞內(nèi)的GSH水平等因素，從而降低放射敏感性[7]。有實驗表明，將EGFR基因植入低表達細胞中會提高細胞對放射線的抗拒性[8]。表皮生長因子受體(EGFR) 會降低許多實體腫瘤細胞的放射敏感性在國內(nèi)外已有較多報道[9，10]。

表皮生長因子受體(EGFR)在鼻咽癌中的表達率在29%～96%之間[11，12], 本文EGFR在260例鼻咽癌中陽性表達197例，表達率75.8%，發(fā)現(xiàn)鼻咽癌中EGFR表達與患者年齡、性別、總分期、T分期和N分期無關，與文獻報道相似[13，14]。放射治療后腫瘤退縮受多種因素影響，對每個患者無法從生物學角度上來正確判斷腫瘤的退縮情況，所以臨床醫(yī)生常常將腫瘤的臨床退縮與否作為判斷放射治療效果的指標。本文結(jié)果顯示，EGFR陽性組和陰性組放射治療后腫瘤殘留率有明顯差異，分別為24.9%、14.3% (χ2=3.61，P<0.05)，提示EGFR陽性表達與鼻咽癌放療后殘留存在相關性，對放療后腫瘤殘留有一定的預測價值。隨訪統(tǒng)計結(jié)果表明腫瘤殘留灶越大則預后越差。本文中260例鼻咽癌進行亞組分析，EGFR陽性組有更差的5年DFS和DMFS。同步放化療可增加放射的敏感性，提高腫瘤局部消退率，減少遠處轉(zhuǎn)移及提高無瘤生存率[15]。但放化療的疊加作用加重了正常組織的放射性損傷[16]，生物治療具有針對性強，療效明顯、副反應小的特點。本研究結(jié)果顯示EGFR陽性表達與鼻咽癌放療后殘留存在相關性、有更差的5年DFS和DMFS，EGFR陽性表達有利于預測鼻咽癌患者放療前放射敏感性，有助于選擇合適患者優(yōu)化個體化治療方案。若經(jīng)濟允許，對于EGFR陽性表達鼻咽癌患者可考慮配合使用針對EGFR的生物靶向藥物治療，以減少腫瘤殘留、提高局控率，改善患者生存。

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Relationshipbetwwenepidermalgrowthfactorexpress、tumorresidualandcurativeeffectinpatientswithnasopharyngealcancer(NPC)

LANYu-hong,BAILi,YANGQing-xu,etal.

DepartmentofcancerradiotherapyCentral,Departmentofpathology，Huizhou516001，China

ObjectiveTo investigate relationship betwwen epidermal growth factor receptor (EGFR) expression、tumor residual and its prognostic value to curative effect in patients with nasopharyngeal cancer(NPC) treated with radiochemotherapy.Methods260 patients with NPC were examined for EGFR expression by immunohisto-chemistry Analysis,tumor residual and survival of patients in 5-year.ResultsIn 260 cases in NPC,expression of EGFR of positive and negative were 197 cases(75.8%) and 63 cases(24.2%);The rate of tumor residual in patients with positive EGFR were 24.9% and negative EGFR were 14.3% (χ2=3.61，P<0.05).The rate of overall survival(OS)、disease-free survival(DFS)、locoregional relapse-free survival(LRFS)and distant metastasis-free survival(DMFS) in patients with positive EGFR were 68.2%、63.1%、67.2%、64.8% and negative EGFR were 88.6%、76.4%、87.1%、81.3%, respectively in 5-year(χ2=4.12,χ2=4.01,χ2=3.97,χ2=3.85,P<0.05). The rate of distant metastasis in residual were 67.2% significantly higher than 17.8% in without residual(χ2=7.48,P<0.05); The high expression of EGFR with OS、DFS were significantly correlated (r=6.725,P<0.05).ConclusionEGFR expression was common in NPC.The high expression of EGFR with tumor residual were correlated and had the tendency of poor prognosis.It would be potentially favored in predicting the radiosensitivity of NPC patients before radiotherapy and be helpful in defining patients who will benefit from therapy.

Nasopharyngeal；Epidermal growth factor receptor；Tumor residual；Pronosis

516001 廣東惠州中心人民醫(yī)院腫瘤放射治療中心(藍玉宏 白力 江曉聰),病理科(楊清緒)