王亞萍 劉玲 于晶功 李廣慧 宋光耀 鄒娜

P53和Ki-67在水泡狀胎塊中的表達(dá)及意義

王亞萍 劉玲 于晶功 李廣慧 宋光耀 鄒娜

目的研究P53及Ki-67在水泡狀胎塊(完全性和部分性水泡狀胎塊，CHM和PHM)中的表達(dá)情況，探討其在水泡狀胎塊診斷及判斷預(yù)后中的作用。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測P53及Ki-67在12例胚亡流產(chǎn)絨毛、18例PHM和24例CHM中的表達(dá)。結(jié)果P53在三組中的陽性表達(dá)率分別為0.00%、33.33%和50.00%；Ki-67的陽性表達(dá)率分別為16.67%、44.44%和83.33%；P53的表達(dá)在各組間的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；Ki-67的表達(dá)在CHM組與正常組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.4444，P=0.0350，P<0.05)，而CHM與PHM之間以及PHM與正常組之間差異不明顯(P>0.05)。結(jié)論檢測水泡狀胎塊中P53及Ki-67的表達(dá)有助于HM的診斷及預(yù)后評估。

水泡狀胎塊；P53；Ki-67

水泡狀胎塊(hydatidiform mole,HM)是常見的妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病，根據(jù)大體所見、顯微鏡下特點(diǎn)、染色體核型分析以及臨床表現(xiàn)不同而分為完全性水泡狀胎塊(complete hydatidiform mole,CHM)和部分性水泡狀胎塊(partial hydatidiform mole,PHM)。本文通過免疫組化方法檢測P53及Ki-67在不同類型的HM中的表達(dá)情況，來探討它們在HM診斷中的作用及預(yù)后價(jià)值的評估。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取大連市婦產(chǎn)醫(yī)院2011年10月至2012年8月期間門診患者首次刮宮標(biāo)本，其中24例為CHM患者，年齡24～40歲，中位年齡為26.12歲；18例為PHM患者，年齡21～45歲，中位年齡為25.57歲。所有病例均由2名高年資病理醫(yī)師再次復(fù)核(診斷標(biāo)準(zhǔn)參照WHO2003乳腺及女性生殖器官病理學(xué)和遺傳學(xué))。另選取2012年8至10月間12例胚亡流產(chǎn)絨毛組織作為對照組。

1.2主要試劑及方法 所用即用型鼠抗人P53及Ki-67單克隆抗體和S-P試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。所有標(biāo)本均由10%福爾馬林固定，石蠟包埋后4 μm連續(xù)切片。采用免疫組化S-P法染色操作。用已知陽性切片做陽性對照，用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗做陰性對照。

1.3結(jié)果判定 P53及Ki-67陽性表達(dá)定位于細(xì)胞核，均為淺黃色或棕黃褐色顆粒。陽性判斷為滋養(yǎng)細(xì)胞陽性數(shù)<5%為(-)，5%～25%為(+)，26%～50%(++)，>50%為(+++)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用 SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn), 以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1P53表達(dá)狀況 CHM組中P53陽性率為50.00%(12/24)；PHM組陽性率為33.33%(6/18)；正常組陽性率為0.00%(0/12)。P53在正常組、PHM及CHM組中的表達(dá)呈上升趨勢，在CHM組中表達(dá)最強(qiáng)，但各組間表達(dá)的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2Ki-67表達(dá)狀況 CHM組中Ki-67陽性率為83.33%(20/24)；PHM組陽性率為44.44%(8/18)；正常組陽性率為16.67%(2/12)。Ki-67在正常組、PHM及CHM組中的表達(dá)逐漸升高，在CHM組中表達(dá)最強(qiáng)，CHM組與正常組之間有明顯差異(χ2=4.4444，P=0.0350，P<0.05)，而CHM與PHM之間以及PHM與正常組之間差異不明顯。見表1。

3 討論

水泡狀胎塊，俗稱葡萄胎，是臨床工作中常見的妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病，主要以絨毛水腫及不同程度滋養(yǎng)細(xì)胞增生為特點(diǎn)。雖然大部分呈現(xiàn)良性病程，但也有某些病例具有潛在惡性經(jīng)過，可能發(fā)展為侵襲性水泡狀胎塊、絨毛膜癌及其他妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤。有報(bào)道稱5%～15%的葡萄胎患者會(huì)發(fā)展為妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤而需要進(jìn)一步化療，而當(dāng)15%的患者發(fā)現(xiàn)發(fā)展為妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤時(shí)，僅有1%～5%的部分性葡萄胎患者由于持續(xù)性滋養(yǎng)細(xì)胞疾病(pGTD)而需要化療[1]。所以，完全性水泡狀胎塊較之部分性而言，其預(yù)后更需要關(guān)注，但在臨床工作中對于CHM和PHM的鑒別在一些病例上存在著一定的困難，而預(yù)測預(yù)后最重要的標(biāo)準(zhǔn)是部分性和完全性胎塊之間的鑒別[2]。

P53作為抑癌基因參與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)而發(fā)揮功能。有研究表明P53在HM中的表達(dá)強(qiáng)于普通絨毛組織；也有報(bào)道P53在CHM中的陽性表達(dá)率為40%，在PHM中的陽性表達(dá)率為30%，非水泡組織為10%；還有作者發(fā)現(xiàn)在那些發(fā)展為pGTD的CHM中P53的表達(dá)更強(qiáng)[3]。但是也有研究表明在妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病中未檢測到P53突變[4]。Petignat P等[5]研究發(fā)現(xiàn)在81%的HM中可觀察到突變型P53，認(rèn)為相比于正常胎盤而言，HM中突變型P53的增加可能是一種不同多肽鏈折疊或錨定蛋白形成，而不是真的基因突變，可能引起不同的生物活性。本實(shí)驗(yàn)中P53在CHM中的表達(dá)率為50%，在PHM中的表達(dá)率為33.33%，CHM組比PHM組稍高，但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，考慮可能是選取的樣本數(shù)偏小所致。

Ki-67是反映細(xì)胞增殖活性的生物學(xué)指標(biāo)，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于檢測腫瘤細(xì)胞的增生程度，在多種腫瘤中的表達(dá)顯著升高。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，Ki-67的表達(dá)從正常組到PHM組再到CHM組是逐漸增強(qiáng)的，而且在CHM組的表達(dá)顯著升高，CHM組及PHM組的表達(dá)明顯強(qiáng)于正常組，這與羅瑩等[6]的研究結(jié)果相似，而CHM組與PHM組之間的表達(dá)，CHM組要高于PHM組，前者陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)多>50%，后者通常在20-30%之間，但是表達(dá)率無明顯差異(P>0.05)。流產(chǎn)的病例中細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖速度變慢，增殖活性下降，因而本實(shí)驗(yàn)中觀測到Ki-67在水腫絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞中的陽性細(xì)胞數(shù)大多<5%。CHM組與正常組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，因而考慮Ki-67可以作為CHM診斷時(shí)的一個(gè)參考指標(biāo)，Ki-67表達(dá)越強(qiáng)，越需要監(jiān)測其預(yù)后，相對于Ki-67低表達(dá)的病例而言其發(fā)展為pGTD的可能性會(huì)大一些。

綜上所述，結(jié)合臨床所見、鏡下形態(tài)特點(diǎn)以及P53和Ki-67的表達(dá)，有助于水泡狀胎塊的診斷及預(yù)后的評估。

表1 水泡狀胎塊中P53及Ki-67的表達(dá)狀況

注：①CHM-PHM②PHM-正常組③CHM-正常組

[1] 陳樂真主編.婦產(chǎn)科診斷病理學(xué).第2版.北京：人民軍醫(yī)出版社，2010:554.

[2] 劉伯寧，范嫏娣主譯.人類胎盤病理學(xué)手冊.天津：天津科技翻譯出版公司，2008:271.

[3] Neil J. Sebire, F.R.C.Path., Michael J. Seckl. Immunohistochemical staining for diagnosis and prognostic assessment of hydatidiform moles. The Journal of Reproductive Medicine, 2010,55:236-246.

[4] Sue Yazaki-Sun, Silvia Daher, Marcia Marcelino de Souza Ishigai, et al. Correlation of c-erbB-2 oncogene and p53 tumor suppressor gene with malignant transformation of hydatidiform.J. Obstet. Gynaecol. Res, 2006,32(3):265-272.

[5] Petignat P, Laurini R, Goffin F, et al. Expression of matrix metalloproteinase-2 and mutant p53 is increased in hydatidiform mole as compared with normal placenta. Int J Gynecol Cancer, 2006,16:1679-1684.

[6] 羅瑩，吳荔香，廖翏，等.水泡狀胎塊中p57、survivin、Ki-67的表達(dá)及意義.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2012,28(2):202-204.

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