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(1.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，浙江杭州 310000； 2.溫州出入境檢驗(yàn)檢疫局；3.長(zhǎng)興縣畜牧獸醫(yī)局； 4.浙江省出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心)

高致病性禽流感是危害養(yǎng)禽業(yè)的主要傳染病之一，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A類動(dòng)物傳染病，我國(guó)列為一類動(dòng)物疫病。2010年初，浙江省禽流感疫苗從H5N1(re-5株)轉(zhuǎn)變?yōu)镠5N1(re-5+re-4株)，為準(zhǔn)確評(píng)估H5N1(re-5+re-4株)疫苗在長(zhǎng)興縣的免疫效果，為當(dāng)?shù)氐膹?qiáng)制性免疫工作和禽流感防控提供可靠依據(jù)，筆者自2010年開始，連續(xù)三年對(duì)轄區(qū)內(nèi)40余家養(yǎng)雞場(chǎng)進(jìn)行隨機(jī)抽樣，共抽樣2308份，檢測(cè)H5N1(re-4株)和H5N1(re-5株)抗體效價(jià)，并對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析。

1 材料與方法

1.1樣品來源 采自長(zhǎng)興縣40余家養(yǎng)雞場(chǎng)，每場(chǎng)采樣不少于10份，每個(gè)樣品采血量2～3 mL。抽樣禽場(chǎng)均已按照農(nóng)業(yè)部《高致病性禽流感免疫技術(shù)規(guī)范》(NY/T769-2004)進(jìn)行H5N1(re-5+re-4株)疫苗免疫。

禽流感H5亞型HI抗原均由哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)，并由浙江省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心統(tǒng)一訂購(gòu)提供。

1.2檢測(cè)方法 采用血凝試驗(yàn)(HA)檢測(cè)。購(gòu)買禽流感標(biāo)準(zhǔn)抗原的血凝價(jià),然后制備4單位血凝價(jià)的抗原液，采用血凝抑制試驗(yàn)(HI)分別檢測(cè)血清樣品中H5亞型對(duì)應(yīng)于re-4株和re-5株兩種抗體的效價(jià)。

操作方法按《高致病性禽流感診斷技術(shù)》(GB /T18936-2003)。

1.3判定標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)，HI抗體效價(jià)≥4log2判為合格。

存欄禽群免疫抗體合格率≥70%判定為合格。

2 檢測(cè)結(jié)果

2.12010-2012年禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果 詳見表1。

表1 2010-2012年禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

由表1可見，2010年、2011年和2012年，分別從該縣40余家養(yǎng)雞場(chǎng)(戶)分別采集、檢測(cè)血清樣品488份、1000份和820份。H5亞型(re-4株)和(re-5株)的抗體效價(jià)均值和合格率分別為6.01～6.39log2，91.4%～94.3%;5.74～5.97log2,92.8%～95.1%;5.29～5.46log2,89.8%～90.2%。達(dá)到國(guó)家規(guī)定的抗體效價(jià)≥4log2和免疫抗體合格率≥70%的標(biāo)準(zhǔn)。

2.2散養(yǎng)戶和規(guī)模場(chǎng)禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果 詳見表2。

由表2可見，2308份樣品中，1343份采自散養(yǎng)戶，965份采自規(guī)模場(chǎng)，H5亞型(re-4株)和H5亞型(re-5株)的抗體效價(jià)均值和合格率分別為5.87～6.06log2,92.7%～94.8%和5.46～5.47log2,90.1%～90.2%。達(dá)到國(guó)家規(guī)定的抗體效價(jià)≥4log2和免疫抗體合格率≥70%的標(biāo)準(zhǔn)。

表2 2010～2012年散養(yǎng)戶和規(guī)模場(chǎng)禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

3 小結(jié)與討論

由表1可見，2010-2012年該縣存欄雞群H5亞型(re-4株)免疫抗體合格率分別達(dá)到94.3%、95.1%和89.8%；H5亞型(re-5株)免疫抗體合格率分別達(dá)到91.4%、92.8%和90.2%，高于國(guó)家規(guī)定70%的標(biāo)準(zhǔn)。H5亞型禽流感免疫抗體整體水平較高，說明當(dāng)?shù)貏?dòng)物防疫部門的監(jiān)督和管理力度較大，免疫效果較好。

通過分析比較近三年抗體檢測(cè)數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，雖然總體免疫水平較高，但免疫水平卻有下降趨勢(shì)。2012年H5亞型(re-4株)和(re-5株)的免疫抗體合格率相比2010年和2011年均有所下降，其中H5亞型(re-4株)的免疫抗體合格率為89.8%，相比2010年的94.3%和2011年的95.1%，分別下降4.9個(gè)百分點(diǎn)和5.3個(gè)百分點(diǎn)，下降比較明顯。免疫抗體均值從2011年開始連續(xù)兩年均呈下降趨勢(shì)，其中H5亞型(re-4株)的免疫抗體均值從2010年的6.39log2，下降到2011年的5.97log2和2012年的5.29log2；H5亞型(re-5株)免疫抗體均值從2010年的6.01log2，下降到2011年的5.74log2和2012年的5.46log2。通過調(diào)查分析，主要是2009-2010年因毒株變異，疫情形勢(shì)嚴(yán)峻，養(yǎng)殖戶防疫意識(shí)普遍較高，能按程序規(guī)范免疫。2010年后，該縣及周邊地區(qū)疫情形勢(shì)平穩(wěn)，抗體監(jiān)測(cè)情況良好，導(dǎo)致各養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)防疫意識(shí)有所松懈，免疫工作有所懈怠，最終體現(xiàn)在2012年免疫水平整體有所下降。因此，在基層疫情防控工作中，除了做好防疫工作的監(jiān)督和技術(shù)指導(dǎo)外，要加大對(duì)各養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)的防疫意識(shí)教育，緊繃疫情防控這根弦，嚴(yán)防因思想松懈出現(xiàn)免疫不到位的情況發(fā)生。

由表2可見，散養(yǎng)戶H5亞型(re-4株)和H5亞型(re-5株)的免疫抗體平均合格率分別為94.8%和92.7%，高于規(guī)模場(chǎng)的90.6%和90.1%；散養(yǎng)戶H5亞型(re-4株)和H5亞型(re-5株)的免疫抗體均值分別為6.06log2和5.87log2，高于規(guī)模場(chǎng)的5.47log2和5.46log2。通過調(diào)查分析，發(fā)現(xiàn)當(dāng)?shù)氐酿B(yǎng)殖場(chǎng)(戶)主要大多以家庭養(yǎng)殖方式為主，即使是規(guī)模場(chǎng)，也多數(shù)是家庭為單位的飼養(yǎng)方式。部分規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)只追求養(yǎng)殖數(shù)量的增加，養(yǎng)殖方式和管理水平卻沒有相應(yīng)提高，導(dǎo)致飼養(yǎng)管理?xiàng)l件和免疫強(qiáng)度下降，最終影響到了免疫抗體檢測(cè)水平。因此，在鼓勵(lì)規(guī)?；B(yǎng)殖的同時(shí)，要加大對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)飼養(yǎng)管理水平和防疫意識(shí)的培訓(xùn)，避免出現(xiàn)養(yǎng)殖規(guī)模上升，管理和免疫強(qiáng)度下降，養(yǎng)殖效益滑坡的情況。