鄧厚波 隋曉丹 劉鐵軍

·實驗研究·

肝脂溶顆粒治療非酒精性脂肪肝模型大鼠的實驗研究

鄧厚波 隋曉丹 劉鐵軍

目的 通過實驗研究驗證肝脂溶顆粒對非酒精性脂肪肝的治療作用，探討作用機制，為臨床擴大應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。方法 觀察肝脂溶顆粒對非酒精性脂肪肝模型大鼠TG(血清甘油三酯)、CHOL(血清總膽固醇)；ALT(谷丙轉(zhuǎn)氨酶)、AST(谷草轉(zhuǎn)氨酶)；FFA(游離脂肪酸)的影響。結(jié)果 肝脂溶顆粒高劑量組降低血清TG、CHOL、FFA療效優(yōu)于對照組，降低血清ALT、AST療效則與對照組相似。結(jié)論 肝脂溶顆粒能有效治療非酒精性脂肪肝。

非酒精性脂肪肝；肝脂溶顆粒；實驗研究

非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是一種無過量飲酒史，或每日酒精攝入量<20 g，以肝實質(zhì)細(xì)胞脂肪變性及脂肪蓄積為主要特征的臨床病理綜合征。本實驗通過觀察肝脂溶顆粒對NAFLD大鼠的治療作用，以期為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 一般資料

1.1 實驗動物 Wistar雄性大鼠60只，體質(zhì)量(200±20)g。

1.2 藥物 肝脂溶顆粒：長春中醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院制劑室；多烯磷脂酰膽堿膠囊：賽諾非安萬特制藥有限公司。

1.3 試劑 甘油三酯、膽固醇測試試劑盒：南京建成生物工程公司；丙氨酸氨基、天門冬氨酸轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒、游離脂肪酸測試盒：南京建成生物工程公司；125I-胰島素放免分析試劑盒：北京北方生物技術(shù)研究所。

2 實驗方法

2.1 非酒精性脂肪肝模型復(fù)制方法 大鼠適應(yīng)環(huán)境7 d后隨機分正常組9只和高脂組51只。分別予普通和高脂飼料(88%基礎(chǔ)飼料、10%豬油、2%膽固醇)喂養(yǎng)，自由飲水。12周后隨機選出正常組1只、高脂組6只大鼠，取肝組織進行HE染色，驗證造模情況。

2.2 實驗動物分組及給藥方法 12周后正常組大鼠繼續(xù)予普通飼料，每日給予生理鹽水灌胃。高脂組隨機分：模型組、多烯磷脂酰膽堿膠囊對照組(簡稱：對照組)、肝脂溶顆粒高、中、低劑量組(簡稱：高、中、低劑量組)。繼續(xù)高脂喂養(yǎng)同時每日給予不同藥物灌胃，(模型組：生理鹽水lml/100 g；對照組：多烯磷脂酰膽堿膠囊水溶液，按0.14 g/kg體質(zhì)量給藥；高劑量組：100%濃度肝脂溶顆粒水溶液，按3 g/kg體質(zhì)量給藥；中劑量組：70%濃度肝脂溶顆粒水溶液，按2.1 g/kg體質(zhì)量給藥；低劑量組：30%濃度肝脂溶顆粒水溶液，按0.9 g/kg體質(zhì)量給藥。)灌胃4周后取材。2.3 血標(biāo)本采集及指標(biāo)觀察 以2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，腹主動脈采血4～5 ml，全自動生化分析儀檢測血清TG、CHOL、ALT、AST、FFA。采用 SPSS 16.0 統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。

表1 各組大鼠16周末血清TG、CHOL、FFA比較

注：與正常組相比*：P<0.01，**：P<0.05；與模型組相比Δ：P<0.01，ΔΔ：P<0.05；與對照組相比﹟：P<0.05，##P>0.05

3 實驗結(jié)果

3.1 血清TG、CHOL、FFA 正常組大鼠血清TG、CHOL、FFA明顯低于其他組(P<0.01)；以模型組最高，與其他藥物干預(yù)組相比(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；高劑量組明顯低于對照組(P<0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；中劑量組與對照組相比(P>0.05)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；低劑量組高于高、中劑量組及對照組(P<0.05)，有統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

3.2 肝功能(ALT、AST) 各組NAFLD大鼠血清ALT、AST較正常組均有顯著的升高(P<0.01)；模型組水平最高，與藥物干預(yù)組相比(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；高劑量組與對照組相比(P>0.05)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；中劑量組高于對照組(P<0.05)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；低劑量組明顯高于高、中劑量組及對照組(P<0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。見表2。

表2 各組大鼠16周末血清ALT、AST結(jié)果比較

注：與正常組相比*：P<0.01，**：P<0.05； 與模型組相比Δ：P<0.01，ΔΔ：P<0.05；與對照組相比&：P<0.01，#：P<0.05，##P>0.05

4 討論

脂質(zhì)代謝異常被公認(rèn)為是脂肪性肝病的一個最基礎(chǔ)和關(guān)鍵環(huán)節(jié)[1]。臨床上，血脂水平的變化是評價脂肪肝藥物療效的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。目前FFA的增加被廣泛認(rèn)為是 NAFLD 重要起始因子。無論肝組織或血清FFA[2]升高均能引起一系列連鎖式反應(yīng)，使肝內(nèi)脂肪過度儲積，促進肝細(xì)胞脂肪變性、炎性浸潤、壞死及纖維化的發(fā)生；并引起或加重胰島素抵抗，最終形成脂質(zhì)代謝紊亂的惡性循環(huán)。血清ALT、AST水平一直被作為反映肝細(xì)胞損傷的生化檢測指標(biāo)。血清ALT、AST的升高可能是從功能性損傷到器質(zhì)性病變的變化，從初次打擊到二次打擊發(fā)展的中間環(huán)節(jié)。

劉鐵軍教授總結(jié)多年臨床經(jīng)驗，依據(jù)《丹溪心法·中濕》：“凡肥人沉困怠惰，是濕熱”，認(rèn)為肥甘是本病重要病因，病位主要責(zé)之肝脾，與濕、熱、瘀、積密切相關(guān)。自研肝脂溶顆粒，方中決明子清肝熱，散郁結(jié)。枳椇子疏肝利膽，清利濕熱，配合澤瀉、茯苓健脾利濕，清利濕熱，引濕熱從小便而出。郁金行氣疏肝解郁，丹參活血化瘀止痛，海藻清熱散結(jié)，三藥行氣化瘀散結(jié)。山楂化痰消食散瘀，大黃通腑瀉熱、涼血解毒，二藥瀉下清腸，消瘀散結(jié)，開瘀熱下行之路。何首烏補益肝腎，通便解毒，黃芪益氣健脾，生陽益胃，二藥補益氣血，固其中氣，以求氣旺而血行暢，瘀化則脈得通，邪去而正氣留守?zé)o傷。木香宣暢三焦，使邪有出路，達(dá)保肝護肝之目的。實驗結(jié)果表明肝脂溶顆粒具有降血脂，改善脂質(zhì)代謝的作用，療效優(yōu)于多烯磷脂酰膽堿膠囊；并對肝細(xì)胞質(zhì)膜、線粒體膜有保護、修復(fù)及穩(wěn)定作用，從而達(dá)到良好保護肝功能、降低轉(zhuǎn)氨酶的療效，其保肝降酶效果與多烯磷脂酰膽堿膠囊相似。

[1] Moreno Sanehez D.Pathogenesis of Primary nonaleoholic fatty liver disease. MedClin (Barc),2005,124(17):668-771

[2] Day CP, James OF.Hepatic steatosis: Innocent bystander or guilty party?. Hepatology,1998, 27:1463-1466

Experimental study on liver lipid granule in the treatment of on-alcoholic fatty liver in rats

DENGHou-bo,SUIXiao-dan,LIUTie-jun.

AffiliatedHospitalofChangchunUniversityofChineseMedicineChangchun130021,China

Objective Liver lipid soluble granules are verified through the experimental study on treatment of nonalcoholic fatty liver disease, and to explore mechanism, provide scientific basis for clinical expansion application.Methods To observe the hepatic lipid soluble granules on nonalcoholic fatty liver model rat TG, CHOL,; ALT and AST; The influence of FFA. Results Reduce liver lipid soluble particles high-dose group, serum TG, CHOL, FFA, curative effect is better than that of control group, lower serum levels of ALT, AST, curative effect is similar to the control group. Conclusion Hepatic lipid soluble granules is effective treatment of nonalcoholic fatty liver disease.

nonalcoholic fatty liver disease; Liver lipid particles; The experimental study

130000長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院肝脾胃病科(鄧厚波);長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院2010級博士研究生(隋曉丹);長春中醫(yī)大學(xué)附屬醫(yī)院肝脾胃病科(劉鐵軍)

劉鐵軍