黃際薇 麥海燕 江先合

·論著·

崗梅感冒靈顆粒薄層色譜鑒別方法的研究

黃際薇 麥海燕 江先合

目的 建立崗梅感冒靈顆粒的薄層色譜鑒別方法。方法 采用薄層色譜法對(duì)崗梅感冒靈顆粒中崗梅、野菊花、板藍(lán)根進(jìn)行了鑒別。結(jié)果 圖譜斑點(diǎn)清晰、分離度好，陰性對(duì)照無(wú)干擾。結(jié)論 該方法簡(jiǎn)便、快速、重現(xiàn)性好，為制訂崗梅感冒靈顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了參考。

崗梅感冒靈顆粒；薄層色譜法；崗梅；野菊花；板藍(lán)根

崗梅感冒靈顆粒是由崗梅、野菊花、板藍(lán)根等六味藥材經(jīng)水提醇沉而制成的復(fù)方中藥制劑，具有清熱解毒、疏風(fēng)降火的功效，臨床上主要用于感冒及上呼吸道感染。崗梅根含三萜皂苷、內(nèi)酯(或香豆精)、少量生物堿[1-4]。野菊花含有野菊花內(nèi)酯、矢車菊苷、野菊花三醇、野菊花酮、蘇格蘭蒿素A、艾尼羅依萊肩定素、野菊花醇等，尚含刺槐素、木犀草素、木犀草素-7-葡萄糖苷、刺槐素-7-O-β-D-吡喃半乳糖苷、刺槐素-7-鼠李糖-葡萄糖苷、蒙花苷等[5]。板藍(lán)根含靛苷、β-谷甾醇、靛紅、板藍(lán)根結(jié)晶乙、板藍(lán)根結(jié)晶丙、板藍(lán)根結(jié)晶丁、氨基酸有精氨酸、脯氨酸、谷氨酸、酪氨酸、γ-氨基丁酸、纈氨酸和亮氨酸、芥子苷[6,7]。游離氨基酸的總量為生藥量的8.749%，水解氨基酸的總量為13.292%，精氨酸的含量高達(dá)5.5%以上，從整體上看，氨基酸可能是板藍(lán)根中的一個(gè)主要有效成分[5]。本研究采用薄層色譜鑒別方法對(duì)崗梅感冒靈顆粒中崗梅、野菊花、板藍(lán)根進(jìn)行定性鑒別，為制訂崗梅感冒靈顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 電子分析天平(瑞士Precisa)；CQ-10超聲波清洗器(功率：150W，廣州經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)明珠電器有限公司)；三用紫外儀(ZF-2型，上海市安亭電子儀器廠)；電熱恒溫水浴鍋(H·S·G·IB2，寧波自動(dòng)化儀表廠)；理化干燥箱(LG050B，上海市實(shí)驗(yàn)儀器總廠)；2 μl、3 μl、5 μl定量毛細(xì)管(廣州市藥品檢驗(yàn)所提供)；硅膠G板(青島譜科分離材料有限公司)；聚酰胺薄膜(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；95%乙醇、正丁醇、冰醋酸、茚三酮、甲醇、乙酸乙酯、丁酮、三氯甲烷、甲酸、三氯化鋁、無(wú)水乙醇、甲苯為分析純，水為純凈水。

1.2 材料 崗梅對(duì)照藥材(批號(hào)：121152-201103)、野菊花對(duì)照藥材(批號(hào)：120995-201105)、板藍(lán)根對(duì)照藥材(批號(hào)：121177-201105)，蒙花苷對(duì)照品(批號(hào)：111528-201107)、精氨酸對(duì)照品(批號(hào)：872-200204)，均購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所；崗梅藥材(廣西，批號(hào)：20121120)、崗梅藥材(廣東，批號(hào)：20121103)野菊花藥材(批號(hào)：20121125)、板藍(lán)根藥材(批號(hào)：20121105)，為巿售藥品，均購(gòu)自廣州市藥材公司，是用于制備崗梅感冒靈顆粒的原料，崗梅感冒靈顆粒樣品由本院制劑室提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 崗梅的薄層色譜鑒別[8]

2.1.1 崗梅感冒靈顆粒供試品溶液的制備 稱取崗梅感冒靈顆粒7.5 g，加水30 ml水浴加熱回流提取2 h，過(guò)濾，濾液加乙酸乙酯萃取2次，25 ml/次，合并乙酸乙酯液，置水浴上濃縮至1 ml，作為崗梅感冒靈顆粒供試品溶液。

2.1.2 崗梅對(duì)照藥材溶液的制備 稱取崗梅對(duì)照藥材5 g，加水30 ml水浴加熱回流提取2 h，過(guò)濾，濾液加乙酸乙酯萃取2次，每次25 ml，合并乙酸乙酯液，置水浴上濃縮至1 ml，作為崗梅對(duì)照藥材溶液。

2.1.3 缺崗梅陰性對(duì)照溶液的制備 按處方工藝制備缺崗梅的陰性制劑，按2.1.1項(xiàng)下供試品溶液制備方法制得缺崗梅陰性對(duì)照溶液。

2.1.4 薄層鑒別 用5 μl定量毛細(xì)管分別吸取崗梅感冒靈顆粒供試品溶液、崗梅對(duì)照藥材溶液、崗梅陰性對(duì)照溶液各10 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸(10 ∶ 3 ∶ 1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，濃氨溶液熏蒸后置紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果，色譜圖中，供試品在與崗梅對(duì)照藥材相應(yīng)位置上顯示出相同藍(lán)色的斑點(diǎn)，缺崗梅的陰性對(duì)照溶液無(wú)干擾，崗梅藥材(廣西)為制劑原藥材。色譜圖見(jiàn)圖1所示。

圖1 崗梅薄層色譜鑒別圖譜

1.崗梅感冒靈顆粒；2.崗梅對(duì)照藥材；3.崗梅藥材(廣西)；4.崗梅藥材(廣東)；5.崗梅陰性對(duì)照

2.2 野菊花的薄層色譜鑒別[9]

2.2.1 崗梅感冒靈顆粒供試品溶液的制備 取崗梅感冒靈顆粒研缽研細(xì)，稱取粉末1.2 g，加甲醇20 ml，超聲處理30 min，放冷，濾紙過(guò)濾，取濾液作為供試品溶液。

2.2.2 野菊花對(duì)照藥材溶液的制備 稱取野菊花對(duì)照藥材0.3 g，加甲醇20 ml，超聲處理30 min，放冷，濾紙過(guò)濾，取濾液作為野菊花對(duì)照材溶液。

2.2.3 蒙花苷對(duì)照品溶液的制備 稱取蒙花苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 ml含0.2 mg的溶液，作為蒙花苷對(duì)照品溶液。

2.2.4 缺野菊花陰性對(duì)照溶液的制備 按處方工藝制備缺野菊花的陰性制劑，按2.1.1項(xiàng)下供試品溶液制備方法制得缺野菊花陰性對(duì)照溶液。

2.2.5 薄層鑒別 用3 μl定量毛細(xì)管吸取崗梅感冒靈顆粒供試品溶液、野菊花對(duì)照藥材溶液、蒙花苷對(duì)照品溶液、缺野菊花陰性對(duì)照溶液各3 μl，分別點(diǎn)于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯-丁酮-三氯甲烷-甲酸-水(15 ∶ 15 ∶ 6 ∶ 4 ∶ 1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以2%三氯化鋁溶液，熱風(fēng)吹干，置紫外光燈(365nm)下檢視。結(jié)果，色譜圖中，供試品與野菊花對(duì)照藥材和蒙花苷對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯示出相同黃色的熒光斑點(diǎn)，缺野菊花的陰性對(duì)照無(wú)干擾。色譜圖見(jiàn)圖2所示。

圖2 野菊花薄層鑒別圖譜1.蒙花苷對(duì)照品；2.野菊花對(duì)照藥材；3.野菊花藥材；4.野菊花陰性對(duì)照；5-7崗梅感冒靈顆粒

2.3 板藍(lán)根的薄層色譜鑒別[9]

2.3.1 崗梅感冒靈顆粒供試品溶液的制備 取崗梅感冒靈顆粒研缽研細(xì)，稱取粉末3 g，加稀乙醇20 ml，超聲處理20 min，濾紙過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)酉∫掖? ml使溶解，即得供試品溶液。

2.3.2 板藍(lán)根對(duì)照藥材溶液的制備 稱取板藍(lán)根對(duì)照藥材1 g，加稀乙醇20 ml，超聲處理20 min，濾紙過(guò)濾，濾液蒸干，殘?jiān)酉∫掖? ml使溶解，即得板藍(lán)根對(duì)照藥材溶液。

2.3.3 精氨酸對(duì)照品溶液的制備 稱取精氨酸對(duì)照品，加稀乙醇制成每1 ml含0.5 mg的溶液，即得精氨酸對(duì)照品溶液。

2.3.4 缺板藍(lán)根陰性樣品溶液的制備 按處方工藝制備缺板藍(lán)根供試品，按2.3.1項(xiàng)下供試品溶液制備方法制得缺板藍(lán)根陰性樣品溶液。

2.3.5 薄層鑒別 用2 μl定量毛細(xì)管吸取崗梅感冒靈顆粒供試品溶液、板藍(lán)根對(duì)照藥材溶液、精氨酸對(duì)照品溶液、缺板藍(lán)根陰性樣品溶液各2 μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(19 ∶ 5 ∶ 5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，熱風(fēng)吹干，噴以2%茚三酮試液，105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果，色譜圖中，供試品在與板藍(lán)根對(duì)照藥材和精氨酸對(duì)照品相應(yīng)的位置上，顯示出相同紫色的斑點(diǎn)，缺板藍(lán)根的陰性對(duì)照無(wú)干擾。色譜圖見(jiàn)圖3所示。

圖3 板藍(lán)根薄層色譜鑒別圖譜

1.精氨酸對(duì)照品；2.板藍(lán)根對(duì)照藥材；3.板藍(lán)根藥材；4.板藍(lán)根陰性對(duì)照；5-8崗梅感冒靈顆粒

3 討論

3.1 本實(shí)驗(yàn)嘗試對(duì)崗梅感冒靈顆粒中野菊花、板藍(lán)根和崗梅三味藥進(jìn)行薄層色譜法定性鑒別研究，結(jié)果顯示圖譜中主斑點(diǎn)清晰、陰性對(duì)照無(wú)干擾，方法簡(jiǎn)單易行，重現(xiàn)性高，能夠達(dá)到鑒別目的，可用于崗梅感冒靈顆粒的質(zhì)量控制。

3.2 在野菊花TLC鑒別實(shí)驗(yàn)中，曾嘗試采用硅膠G薄層板，分別以氯仿-甲醇(5 ∶ 2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈(365nm)下檢視，結(jié)果蒙花苷對(duì)照品斑點(diǎn)無(wú)法顯現(xiàn)。

3.3 中藥復(fù)方中，每種生藥都含有多種化學(xué)成分，臨床共煎過(guò)程中，可能產(chǎn)生揮發(fā)、分解、助溶、吸附、水解、取代、中和、沉淀等一系列十分復(fù)雜的化學(xué)物理變化，這些變化直接影響到制劑的療效和毒副作用[10]。本實(shí)驗(yàn)僅對(duì)崗梅感冒靈顆粒中的崗梅、野菊花和板藍(lán)根進(jìn)行薄層色譜法定性鑒別，各斑點(diǎn)具體代表什么成分有待進(jìn)一步深入研究。

[1] 謝宗萬(wàn).全國(guó)中草藥匯編.第二版(上冊(cè)).北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：449.

[2] 蔡艷，張慶文，李旨君，等.崗梅根化學(xué)成分的研究.中草藥，2010，41(9)：1426-1429.

[3] 溫金蓮，陳曉麗，莫瑞意，等.崗梅根化學(xué)成分研究.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，27(5)：468-470.

[4] 李敏華，俞世杰，杜上鑑，等.崗梅根化學(xué)成分的研究.中草藥，1997，28(8)：454-456.

[5] 肖培根.新編中藥志. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2002：145，562-563.

[6] 江蘇新醫(yī)學(xué)院. 中藥大辭典. 上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1996：1251.

[7] 冉先德. 中華藥海.第一冊(cè)(上卷). 黑龍江：哈爾濱出版社，1998：322.

[8] 郭衛(wèi)，張?zhí)祈?崗梅合劑中崗梅及三丫苦薄層色譜鑒別方法研究.中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2009，3(20)：157.

[9] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(第一部).北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：191，295，附錄34.

[10] 胡娟，吳志生，黃美霞，等.中藥復(fù)方制劑質(zhì)量控制中含量測(cè)定指標(biāo)的選擇思路.福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，18(3)：71-72.

Study on the thin layer chromatography of gangmei ganmaoling granules

HUANGJi-wei，MAIHaiyan，JIANGXian-he.

TheThirdAffiliatedHospitalofSunYat-senUniversity，Guangzhou510630，China

Objective To establish a method for the thin layer chromatography(TLC) of Gangmei Ganmaoling granules. Methods The thin layer chromatography(TLC) was used to identify Radix Et Caulis Ilicis Asprellae,Flos Chrysanthemi Indici,Radix Isatidis in Gangmei Ganmaoling granules. Results The TLC figures of Radix Et Caulis Ilicis Asprellae,Flos Chrysanthemi Indici,Radix Isatidis were distinct with good resolution and no disturbance negative group. Conclusion The method is simple,rapid,reproducible, and provides reference for the formulation of gangmeiganmailing quality standard.

Gangmei Ganmaoling granule；Thin layer chromatography(TLC)；Radix Et Caulis Ilicis Asprellae；Flos Chrysanthemi Indici；Radix Isatidis

廣州巿計(jì)劃項(xiàng)目科技攻關(guān)專項(xiàng)(項(xiàng)目編號(hào)：2012J4300071)

510630廣州，中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院