蒙振畝，覃 勇，陸春禮，盧少坤，韋顯凱

（1.百色市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣西百色 533000；2.廣西壯族自治區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，廣西南寧 530001）

狂犬病是由狂犬病病毒（Rabies virus，RV）引起的所有溫血?jiǎng)游锖腿说囊环N急性致死性腦脊髓炎[1]?？袢∈橇倚匀诵蠊不疾≈?，在全世界廣泛分布，特別在非洲、東南亞和中國(guó)等發(fā)展中國(guó)家傳播尤為嚴(yán)重。2007—2011年全國(guó)、廣西區(qū)、百色市發(fā)生人間狂犬病死亡病例總數(shù)分別為11697人、1770人、171人，百色市已經(jīng)成為狂犬病疫情重災(zāi)區(qū)。人間狂犬病死亡病例的發(fā)生，90%以上由犬或貓直接咬（抓）傷引起。為探索狂犬病有效防治措施，百色市于2007—2012年開(kāi)展了動(dòng)物狂犬病流行病學(xué)調(diào)查、監(jiān)測(cè)、免疫、宣傳和規(guī)范犬只管理等綜合防治措施防治狂犬病，使百色市狂犬病發(fā)病率明顯下降，達(dá)到了很好的防治效果?，F(xiàn)將我們實(shí)施的防治措施進(jìn)行評(píng)價(jià)，為防治狂犬病提供參考。

1 開(kāi)展犬只飼養(yǎng)、免疫、疫情及管理情況調(diào)查，掌握疫情流行狀況

1.1 調(diào)查方法

制定《百色市動(dòng)物狂犬病流行病學(xué)調(diào)查技術(shù)方案》，明確規(guī)定調(diào)查范圍覆蓋全市所屬轄區(qū)村屯，人間狂犬病疫情以衛(wèi)生部門通報(bào)為準(zhǔn)，動(dòng)物狂犬病疫情以犬（貓）發(fā)病臨床癥狀、咬（抓）致人死亡及廣西區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室診斷認(rèn)定。調(diào)研方式由村級(jí)動(dòng)物疫病防治員結(jié)合日常防疫工作，以行政村或社區(qū)為單位，詳細(xì)調(diào)查清轄區(qū)犬類飼養(yǎng)和管理情況，建立完善犬類飼養(yǎng)材料檔案。建立健全市、縣、鄉(xiāng)、村四級(jí)動(dòng)物狂犬病疫情監(jiān)測(cè)報(bào)告網(wǎng)絡(luò)，與衛(wèi)生部門建立狂犬病疫情信息及時(shí)溝通機(jī)制，鼓勵(lì)任何單位、個(gè)人報(bào)告狂犬病疫情，確保疫情調(diào)查的時(shí)效性和準(zhǔn)確性。

1.2 調(diào)查結(jié)果

1.2.1 犬只飼養(yǎng)、免疫及管理情況

據(jù)調(diào)查統(tǒng)計(jì)，2007—2011年全市共調(diào)查135個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)或街道辦事處1847個(gè)行政村或社區(qū)，犬年飼養(yǎng)量分別為223936只、237028只、255151只、 256694只、259251只；分別免疫家犬26648只、54990只、60804只、89361只、105028只，免疫率分別為11.9%、23.2%、23.8%、34.8%、40.5%；犬栓養(yǎng)率分別為4.5%、5.1%、6.2%、12.5%、24%。

1.2.2 狂犬病疫情流行狀況

2007—2011年調(diào)查發(fā)現(xiàn)動(dòng)物狂犬病分別為52例、35例、20例、19例、9例，2012年1～5月3例，其中犬135例，貓3例。2007—2011年人間狂犬病分別為61例、43例、25例、28例、14例，2012年1～5月5例?？袢∫咔榱餍星闆r見(jiàn)表1，狂犬病疫情與動(dòng)物狂犬病疫苗免疫率關(guān)系見(jiàn)圖1。

圖1 動(dòng)物狂犬病、人間狂犬病、犬免疫率關(guān)系示意圖

從圖表看出，未開(kāi)展綜合防治措施的2007年人間和犬的狂犬病發(fā)病數(shù)為61例、52例；采取綜合防控措施后人間和犬的狂犬病發(fā)病數(shù)呈下降趨勢(shì)，到2011年人間和犬的狂犬病發(fā)病數(shù)下降到14例、9例，與2007年相比分別減少了47例、43例，防治效果顯著。

2 開(kāi)展動(dòng)物狂犬病病原學(xué)檢測(cè)和病毒基因序列及遺傳變異特性分析，弄清本市動(dòng)物狂犬病病原情況

2.1 樣品來(lái)源

2009—2011年連續(xù)三年在本市轄11個(gè)縣（區(qū)）采集人間狂犬病疫點(diǎn)、交易市場(chǎng)、屠宰場(chǎng)撲殺犬的腦組織樣品，所采集的犬腦樣品均為本地飼養(yǎng)犬。同時(shí)還采集犬唾液拭子、蝙蝠等樣品。

2.2 檢測(cè)結(jié)果

2.2.1 病毒核酸檢測(cè)結(jié)果 廣西區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)百色市11個(gè)采樣點(diǎn)犬腦組織樣品470份，RT-PCR法檢測(cè)陽(yáng)性樣品9個(gè)，陽(yáng)性率1.9%[2]；犬唾液拭子178份和蝙蝠樣品32份，均未檢測(cè)出狂犬病病毒。病毒核酸檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。RT-PCR電泳圖見(jiàn)圖2。

表1 狂犬病疫情流行情況表

表2 狂犬病病毒核酸檢測(cè)結(jié)果

圖2 狂犬病陽(yáng)性病料的RT-PCR結(jié)果

2.2.2 病毒分離及基因序列測(cè)定分析結(jié)果 用9個(gè)犬腦組織陽(yáng)性樣品接種4周齡小鼠，接種后10～14d，小鼠出現(xiàn)豎毛，精神萎靡，怕風(fēng)、怕聲，后肢麻痹，共濟(jì)失調(diào)等臨床癥狀。采取發(fā)病瀕臨死亡的小鼠腦組織，進(jìn)行狂犬病的RT-PCR檢測(cè)，有7個(gè)樣品的小鼠接種組檢出陽(yáng)性。上海生物工程公司對(duì)基因序列進(jìn)行測(cè)定，將L 基因聚合酶活性部位的測(cè)序結(jié)果與已發(fā)表的其他毒株的核苷酸序列進(jìn)行同源性比較分析表明：所分離的7株狂犬病病毒均為基因Ⅰ型，Ⅰ亞群，7株病毒間L 基因聚合酶活性部位的同源性達(dá)98.6%～99.8%。

3 開(kāi)展疫苗免疫效果比較試驗(yàn)，掌握疫苗免疫抗體產(chǎn)生時(shí)間，存續(xù)期等數(shù)據(jù)，為選擇合適疫苗免疫、制定免疫程序打下基礎(chǔ)

3.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在田東、德保、隆林、西林縣對(duì)免疫前采樣監(jiān)測(cè)抗體為陰性的散養(yǎng)犬分別使用國(guó)產(chǎn)獸用狂犬病活疫苗（FlurryHEP株）和進(jìn)口獸用狂犬病滅活疫苗（PV株）以不同免疫程序開(kāi)展科學(xué)實(shí)驗(yàn)，第1組：使用國(guó)產(chǎn)狂犬病活疫苗（FlurryHEP株），共免疫16只；第2組：使用進(jìn)口狂犬病滅活疫苗（PV株）免疫，共免疫19只；第3組：一免使用國(guó)產(chǎn)狂犬病活疫苗，間隔6個(gè)月再使用該苗進(jìn)行二免，共免疫15只；第4組：一免使用國(guó)產(chǎn)狂犬病活疫苗，間隔6個(gè)月再使用進(jìn)口狂犬病滅活疫苗二免，共免疫21只。在最后一次免疫后的7～10d、20～30d、150～180d、340～360d分別采集血清，共采集犬血清284份，采用間接酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)抗體水平。

3.2 試驗(yàn)結(jié)果

使用國(guó)產(chǎn)活疫苗免疫一次、進(jìn)口滅活苗免疫一次、國(guó)產(chǎn)活疫苗免疫二次、國(guó)產(chǎn)活疫苗一免再加進(jìn)口滅活疫苗二免，其抗體平均陽(yáng)性率分別為70.3%、89.8%、95%、98.8%[3]（表3）。

表3 不同的疫苗對(duì)農(nóng)村散養(yǎng)犬按不同的免疫程序免疫抗體消長(zhǎng)情況表

4 開(kāi)展狂犬病知識(shí)的宣傳比較試驗(yàn)，探索最佳宣傳效果方式

4.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2011年11月20日，在隆林各族自治縣平班鎮(zhèn)、天生橋鎮(zhèn)開(kāi)展狂犬病防控宣傳教育與調(diào)研專項(xiàng)活動(dòng)，對(duì)2個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)219名村民通過(guò)問(wèn)卷調(diào)查測(cè)試。測(cè)試后隨機(jī)分成4個(gè)試驗(yàn)組：第1組村民53人，2011年11月20—25日期間給予短信刺激，稱短信組；第2組村民51人，2011年11月20日安排專題講座培訓(xùn)，2011年11月20—25日期間再給予短信刺激，稱“短信﹢講座”組；第3組村民55人，2011年11月20日安排專題講座培訓(xùn)，稱講座組；第4組村民60人，未安排專題講座及短信刺激，稱對(duì)照組。2011年12月27日對(duì)219名村民宣傳后使用宣傳前測(cè)試問(wèn)卷再次進(jìn)行測(cè)試（即宣傳前后的測(cè)試問(wèn)卷一樣），運(yùn)用SPSS軟件統(tǒng)計(jì)分析，研究各試驗(yàn)組村民在試驗(yàn)前后對(duì)狂犬病防控知識(shí)、態(tài)度及行為的變化，探索防控狂犬病最佳宣傳方式。

4.2 試驗(yàn)結(jié)果

據(jù)試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)，短信組、“短信＋講座”組、講座組、對(duì)照組在試驗(yàn)前和試驗(yàn)后測(cè)試平均分?jǐn)?shù)（滿分為100分）詳見(jiàn)表4。短信組、“短信＋講座”組、講座組、對(duì)照組在試驗(yàn)前測(cè)試分?jǐn)?shù)差異不顯著（p>0.05）；試驗(yàn)后4個(gè)組之間測(cè)試分?jǐn)?shù)比較均差異顯著（0.01

表4 防控狂犬病不同宣傳方式效果統(tǒng)計(jì)表

5 建立動(dòng)物狂犬病綜合防治示范點(diǎn)，采取“栓養(yǎng)、免疫、監(jiān)測(cè)、宣傳”等綜合防治措施，觀察防治效果

5.1 防治示范點(diǎn)的選定

選擇2007年以來(lái)本市人間狂犬病疫情多發(fā)的田東、平果、德保、隆林、西林等5個(gè)縣和未報(bào)告有動(dòng)物狂犬病疫情的凌云縣作為示范區(qū)，每個(gè)縣選擇2個(gè)行政村作為動(dòng)物狂犬病綜合防治示范點(diǎn)，示范村共12個(gè)，其中曾發(fā)生人間狂犬病疫情10個(gè)，居住人口2531人。示范時(shí)間2010—2011年。

5.2 防治措施及結(jié)果

5.2.1 制定免疫程序，提高抵抗能力。根據(jù)疫苗免疫試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)2個(gè)月齡以上的犬、貓等動(dòng)物按統(tǒng)一免疫程序接種獸用狂犬病疫苗：注射國(guó)產(chǎn)狂犬病活疫苗（FlurryHEP株）免疫期為半年，每年免疫二次；注射進(jìn)口狂犬病滅活疫苗（PV株）免疫有效期為一年；使用其他多聯(lián)疫苗免疫的，按疫苗說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。6個(gè)示范縣12個(gè)示范點(diǎn)飼養(yǎng)犬327只、貓3只，狂犬病免疫率達(dá)100%。采集犬免疫血清樣品364份，檢測(cè)抗體合格318份，免疫合格率87.4%，建立起堅(jiān)強(qiáng)免疫屏障。

5.2.2 建立防疫檔案，加施動(dòng)物標(biāo)識(shí)。對(duì)示范點(diǎn)內(nèi)犬或貓進(jìn)行造冊(cè)登記，每只犬或貓建立一份防疫檔案，詳細(xì)記錄畜主姓名、聯(lián)系電話、犬或貓品種特征及年齡、可追溯標(biāo)識(shí)號(hào)碼、并附有一張犬或貓相片供識(shí)別；同時(shí)還詳細(xì)記錄免疫疫苗種類、生產(chǎn)廠家、生產(chǎn)批號(hào)、免疫時(shí)間、免疫人員等信息。

5.2.3 加強(qiáng)采樣監(jiān)測(cè)，掌握疫情動(dòng)態(tài)。2010—2011年，在示范點(diǎn)采集犬腦組織樣品131份，RTPCR方法檢測(cè)病毒核酸結(jié)果全部陰性。然而，在示范點(diǎn)工作開(kāi)展前的2007—2009年檢測(cè)犬腦樣品55份，陽(yáng)性2份，占3.6%。

5.2.4 強(qiáng)化宣傳報(bào)道，提高防控意識(shí)。在12個(gè)示范村公共場(chǎng)所樹(shù)立狂犬病防治知識(shí)宣傳牌，向社會(huì)公示防治目標(biāo)、防治措施、技術(shù)責(zé)任人員及聯(lián)系電話。給每個(gè)農(nóng)戶發(fā)放狂犬病防治知識(shí)宣傳資料1份及發(fā)送短息宣傳，使群眾知曉狂犬病可防不可治，一旦被犬、貓咬（抓）傷后立即到衛(wèi)生防疫部門規(guī)范處理傷口、全程注射疫苗和抗狂犬病毒血清；及時(shí)報(bào)告突發(fā)疫情，防止疫情蔓延擴(kuò)散。

5.2.5 規(guī)范犬只飼管，防止傷人事件。對(duì)示范點(diǎn)內(nèi)飼養(yǎng)的犬（貓）類栓養(yǎng)率達(dá)100%，同時(shí)定期開(kāi)展環(huán)境消毒，嚴(yán)格控制流浪犬的進(jìn)入，實(shí)現(xiàn)動(dòng)物和人間狂犬病“零疫情”目標(biāo)。

6 防治效果小結(jié)

6.1 本市狂犬病危害嚴(yán)重，嚴(yán)重威脅公共衛(wèi)生安全。2007—2011年，全市人間狂犬病發(fā)病率分別為1.6/10萬(wàn)人、1.1/10萬(wàn)人、0.6/10萬(wàn)人、0.7/10萬(wàn)人、0.4/10萬(wàn)人，疫情發(fā)生雖呈下降趨勢(shì)，但其病死率和死亡人數(shù)仍居人類各種法定報(bào)告?zhèn)魅静≈?。調(diào)查發(fā)現(xiàn)死亡人數(shù)與動(dòng)物發(fā)病數(shù)呈正相關(guān)關(guān)系；人間病例數(shù)、動(dòng)物發(fā)病數(shù)與動(dòng)物狂犬病免疫率呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。調(diào)查掌握狂犬病流行狀況，對(duì)科學(xué)指導(dǎo)狂犬病防控工作具有重要意義。

6.2 監(jiān)測(cè)掌握動(dòng)物狂犬病帶毒率和病毒的遺傳變異特性，提高防控工作的針對(duì)性和有效性。RTPCR方法檢測(cè)采集本市犬腦組織狂犬病毒感染率為1.9%，對(duì)分離出來(lái)的狂犬病毒進(jìn)行基因序列測(cè)定及遺傳進(jìn)化分析，確認(rèn)流行的病毒毒株屬基因Ⅰ型，Ⅰ亞群，掌握了本市動(dòng)物狂犬病病毒毒株的遺傳變異特點(diǎn)，對(duì)選擇使用免疫疫苗提供了依據(jù)，防控工作的針對(duì)性和有效性大大提高。

6.3 開(kāi)展不同疫苗免疫效果試驗(yàn)，制定科學(xué)免疫程序，確保免疫質(zhì)量不斷提高。本市開(kāi)展國(guó)產(chǎn)動(dòng)物狂犬病活疫苗（FlurryHEP株）和進(jìn)口動(dòng)物狂犬病滅活疫苗（PV株）免疫效果研究，發(fā)現(xiàn)使用國(guó)產(chǎn)狂犬病活疫苗在免疫后180d抗體水平開(kāi)始達(dá)不到70%以上的有效保護(hù)率；使用進(jìn)口狂犬病滅活疫苗免疫后360d抗體合格率高達(dá)89.8%，仍起到有效保護(hù)作用。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果，本市制定動(dòng)物狂犬病免疫程序?yàn)椋鹤⑸鋰?guó)產(chǎn)狂犬病活疫苗（FlurryHEP株）免疫期為半年，每年免疫二次；注射進(jìn)口狂犬病滅活疫苗（PV株）免疫有效期為一年。經(jīng)應(yīng)用，全市犬免疫抗體合格率均達(dá)70%以上要求，免疫質(zhì)量大幅度提高。

6.4 “專題講座＋發(fā)送短息”宣傳方式效果好，推廣應(yīng)用潛力大。本市開(kāi)展專題講座、發(fā)送短信、“專題講座＋發(fā)送短息”、 不講座不發(fā)短信（對(duì)照組）等4種狂犬病防控知識(shí)宣傳方式效果研究，發(fā)現(xiàn)宣傳效果排序?yàn)椋骸岸绦牛v座”組>短信組>講座組>不講座不發(fā)短信組（對(duì)照組）。探索出防控狂犬病最佳宣傳方式為“短信＋講座”，為選擇防控工作宣傳方式提供了科學(xué)依據(jù)。本市實(shí)踐證實(shí)切實(shí)可行，應(yīng)推廣應(yīng)用。

6.5 防治效果顯著，對(duì)指導(dǎo)防控工作起到較好參考、借鑒作用。本市開(kāi)展防治示范點(diǎn)建設(shè)，采取“栓養(yǎng)、免疫、監(jiān)測(cè)、宣傳”等綜合防治措施，在示范點(diǎn)內(nèi)實(shí)現(xiàn)動(dòng)物和人間狂犬病“零疫情”防治目標(biāo)，效果顯著。然而，本市現(xiàn)犬放養(yǎng)率高達(dá)76%，犬免疫率僅44.9%，部分群眾被犬（貓）咬抓傷后不知道如何處理傷口和注射狂犬病疫苗及抗狂犬病免疫血清；職能管理部門溝通少，未形成工作合力；犬飼養(yǎng)量多密度大，狂犬病老疫區(qū)且犬帶毒率達(dá)1.9%等諸多因素造成疫情難于根除。但只要認(rèn)真推廣應(yīng)用防治示范點(diǎn)的綜合防控措施，對(duì)犬貓等宿主動(dòng)物進(jìn)行“管、免、監(jiān)、滅”及加強(qiáng)暴露后人群的預(yù)防醫(yī)療處理，狂犬病疫情是可防可控的。

[1]俞永新.狂犬病和狂犬病疫苗[M].2 版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2009：5-7.

[2]蒙振畝，覃勇，韋顯凱，等.百色市2009～2011年狂犬病感染調(diào)查及防治對(duì)策[J].大眾科技，2012（5）：135-136.

[3]覃勇，蒙振畝，胡杰，等.百色市農(nóng)村散養(yǎng)犬狂犬病免疫抗體消長(zhǎng)情況調(diào)查報(bào)告[J].大眾科技，2012（7）：208.