蘇新娣

室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)是進(jìn)行臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制的兩個(gè)大關(guān)鍵環(huán)節(jié)，室間質(zhì)評(píng)需要在室內(nèi)質(zhì)控的基礎(chǔ)進(jìn)行，其水平的高低不僅反映實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本鑒定能力高低的一種重要指標(biāo)，更是提高檢驗(yàn)人員工作能力、提高室內(nèi)質(zhì)控工作的重要保證[1]。為進(jìn)一步提高實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本鑒定檢測質(zhì)量，同時(shí)為其他相關(guān)單位提供有益借鑒，本研究總結(jié)并分析了本實(shí)驗(yàn)室的微生物實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)評(píng)結(jié)果?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 室間質(zhì)評(píng)標(biāo)本來源于X省臨床檢驗(yàn)中心，時(shí)間跨度為 2007～2011 年，共 125 株質(zhì)控菌株，其中 5 株轉(zhuǎn)種失敗。本實(shí)驗(yàn)室的儀器和試劑主要包括API微生物臨定系統(tǒng)、全自動(dòng)微生物分析儀、藥敏試紙、微量生化管以及成品干粉培養(yǎng)基，儀器和試劑均完全符合相關(guān)規(guī)定，滿足實(shí)驗(yàn)操作要求。

1.2 方法 所有菌株的鑒定依照臨床標(biāo)本的鑒定要求。依照不同標(biāo)本轉(zhuǎn)種不同培養(yǎng)基，依照國家標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)溫度，將鑒定標(biāo)本分別放置于（36±1）℃環(huán)境當(dāng)中[2]，標(biāo)本放置 24 h，對(duì)菌落形態(tài)進(jìn)行認(rèn)真觀察并記錄，如果某些細(xì)菌生長不良，則可以根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)延長培養(yǎng)時(shí)間。革蘭染色之后對(duì)菌體形態(tài)進(jìn)行認(rèn)真觀察，通過菌落形態(tài)以及染色性來對(duì)其進(jìn)行初步鑒定，利用API微生物臨定系統(tǒng)或者是全自動(dòng)微生物分析儀對(duì)分純之后的細(xì)菌進(jìn)行全面鑒定；需要進(jìn)行手工鑒定的個(gè)別菌株參照（《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第 3 版）》，中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編著）當(dāng)中的相關(guān)規(guī)定執(zhí)行[3]?？股孛舾性囼?yàn)的參照標(biāo)準(zhǔn)為美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（CLSI）標(biāo)準(zhǔn)[4]，采用全自動(dòng)微生物分析儀、ATB試條或者是藥敏試紙擴(kuò)散法進(jìn)行檢測。

2 結(jié)果

2007～2011 年共接受 125 株質(zhì)控菌株（5 株轉(zhuǎn)種失?。?；其中 120 株菌株當(dāng)中鑒定失誤 12 株（12/120，10.0%），鑒定正確 108 株（90.0%，108/120），其中革蘭陰性球菌鑒定符合率 100%（11/11），革蘭陰性桿菌符合率 92.2%（59/64），革蘭陽性桿菌符合率 76.0%（38/50）；108 株菌株進(jìn)行抗菌素敏感試驗(yàn)，總符合率為 94.4%（102/108），革蘭陽性球菌的藥敏符合率 94.1%（48/51），革蘭陰性桿菌的藥敏符合率為 94.7%（54/57）；其中 6 株鑒定失誤，失誤率為 5.6%（6/108），青霉素為失誤率最高的抗菌素，失誤率為 50.0%（3/6）。細(xì)菌鑒定失誤原因分析見表 1。

表1 細(xì)菌鑒定失誤結(jié)果及其原因分析（n=12）

3 討論

微生物實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)評(píng)鑒定失誤原因如下。首先，鑒定手段不完善。診斷血清不全，導(dǎo)致病牛沙門菌等鑒定錯(cuò)誤。流感嗜血桿菌的鑒定用手工法是比較容易的，由于當(dāng)時(shí)無X因子和V因子，加上過于依賴儀器，最后得出錯(cuò)誤結(jié)論[5]。其次，認(rèn)知不足。如有些芽孢桿菌需培養(yǎng) 72 h以上才可見芽孢，若取培養(yǎng) 24 h的菌落做革蘭染色必然產(chǎn)生鑒定的方向性錯(cuò)誤；革蘭染色是細(xì)菌鑒定中最基本最簡單的試驗(yàn)之一，也是最重要的鑒定步驟，如將C群鏈球菌錯(cuò)檢為溶血隱秘桿菌就屬此。最后，室內(nèi)質(zhì)控不到位。靛基質(zhì)試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)、血漿凝固酶試驗(yàn)是細(xì)菌鑒定最基本也是最重要的幾個(gè)試驗(yàn)，應(yīng)每周用標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行監(jiān)測，防此試劑失控，本室早期對(duì)此重視不足，致使出現(xiàn)新型隱球菌錯(cuò)誤鑒定為白色隱球菌等錯(cuò)誤鑒定。在藥敏試驗(yàn)方面，青霉素屬于不穩(wěn)定的藥物，本室對(duì)其監(jiān)測不嚴(yán)，加之無低溫冰箱導(dǎo)致保存不當(dāng)，故錯(cuò)誤率較高；其次藥敏紙片質(zhì)控不嚴(yán)導(dǎo)致其余藥敏試驗(yàn)失誤的原因，所以，日常工作中嚴(yán)格規(guī)范的操作，做好藥敏紙片室內(nèi)質(zhì)量控制，不合格的紙片及時(shí)報(bào)廢處理[6]，并做好記錄，購買時(shí)要做好計(jì)劃，不宜購買過多，另購買藥敏紙片時(shí)不要選擇在炎熱的夏天購買，否則會(huì)造成一些藥敏紙片失效，并且建議選擇一些藥敏紙片種類齊全的有資質(zhì)的廠家，便于監(jiān)控。

要解決以上問題，首先，微生物室的專業(yè)技術(shù)人員要不斷進(jìn)行知識(shí)更新，人員要相對(duì)穩(wěn)定，穩(wěn)定便于經(jīng)驗(yàn)的積累，只有及時(shí)地了解和掌握新的理論知識(shí)與先進(jìn)的檢測技術(shù)，才能夠不斷提高檢測水平。其次，微生物室要不斷完善檢測手段。要加強(qiáng)與臨床的聯(lián)系，了解其需求，開設(shè)更多的新檢測項(xiàng)目，以提供更準(zhǔn)確、更快捷、更完善的報(bào)告服務(wù)于臨床。最后，室內(nèi)質(zhì)量控制制度和SOP文件建立后必須嚴(yán)格執(zhí)行，在執(zhí)行的過程中要不斷的對(duì)其進(jìn)行修訂和完善。

總之，實(shí)驗(yàn)室菌株鑒定、藥敏試驗(yàn)均會(huì)出現(xiàn)一定的失誤，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌鑒失誤的原因較多，為了提高微生物實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)工作水平、細(xì)菌學(xué)診斷水平、質(zhì)量控制水平以及工作人員專業(yè)能力水平，非常有必要開展微生物室間質(zhì)量評(píng)價(jià)工作。

[1]牛華，王天朝，謝穎夫，等.室內(nèi)質(zhì)控實(shí)時(shí)在線監(jiān)控方案的設(shè)計(jì)和實(shí)施[J].臨床檢驗(yàn)雜志，2011，29（7）：490-491.

[2]萬臘根，張世錕，胡意，等.兩種方法設(shè)置室內(nèi)質(zhì)控限值時(shí)室內(nèi)質(zhì)控的結(jié)果分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（6）：692-693，695.

[3]衛(wèi)生部醫(yī)政司.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].南京：東南大學(xué)出版社，2006：30.

[4]Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) Performance goals for the internal quality control of multichannel hematology analyzers;Approved Standard H26-A.940 1996

[5]虎淑妍.微生物實(shí)驗(yàn)室 5 年室間質(zhì)評(píng)結(jié)果總結(jié)分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（15）：1869-1870.

[6]閻金香，徐超，周曉滬，等.臨床生化檢驗(yàn)室間質(zhì)控三年結(jié)果的評(píng)價(jià)[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，32（6）：739-740，743.