溫海燕

（菏澤學(xué)院制藥工程系，山東菏澤 274015）

奶牛布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的一種人畜共患傳染病，主要侵害奶牛的生殖系統(tǒng)，引起流產(chǎn)和睪丸炎，大多數(shù)母牛只流產(chǎn)一次，如牛群不更新，流產(chǎn)過1～2次的母牛可以正常生產(chǎn)，疫情似乎平息，一旦引進新牛群，可再次引起流產(chǎn)[1-2]。奶牛布魯氏菌病不僅影響奶牛的生產(chǎn)性能，而且可以引起人類的多種慢性疾病，嚴(yán)重危害人類的身體健康，因此奶牛布魯氏菌病的檢疫和監(jiān)測至關(guān)重要。

本試驗從菏澤地區(qū)6個奶牛場采集血清進行奶牛布魯菌病的監(jiān)測，有利于了解菏澤地區(qū)奶牛布魯氏菌病的發(fā)生現(xiàn)狀和判斷其發(fā)展趨勢，有助于奶牛布魯氏菌病防控工作的順利開展。

1 材料與方法

1.1 樣品

奶牛血清665份，采自菏澤地區(qū)6個奶牛場，6個奶牛場近3年均未注射過布魯菌疫苗。

1.2 試劑

布魯氏菌病虎紅平板凝集試驗抗原、布魯氏菌病試管凝集試驗抗原、布魯氏菌病試管凝集試驗陰陽性血清均購自青島易邦生物工程有限公司，牛布魯氏桿菌病抗體ELISA試劑盒購自北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司。

1.3 樣品檢測

將采集的665份奶牛血清分別進行虎紅平板凝集試驗、試管凝集試驗和ELISA試劑盒檢測。虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗的操作及結(jié)果判定按照“動物布魯氏菌病診斷技術(shù)（GB/T18646—2002）”進行，ELISA按照牛布魯氏桿菌病抗體ELISA試劑盒說明書進行，抗原抗體反應(yīng)，顯色后在酶標(biāo)儀405nm測吸光值。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)為：P%值=（SNC）× 100/（PC－NC），PC為陽性對照平均吸光度值，NC為陰性對照平均吸光度值，S為樣品吸光度值。P%值>30%為抗體陽性；P%值<30%為抗體陰性；并且需要同時符合陰性對照值NC<0.2；陽性對照值0.80< PC<2.50的條件。

2 結(jié)果與分析

665份奶牛血清經(jīng)虎紅平板凝集試驗、試管凝集試驗和ELISA試劑盒檢測，6個奶牛場普遍存在布病，其感染率高低不同。3種方法用于奶牛布病的檢測，其血清陽性率不同，虎紅平板凝集試驗檢測陽性率最高，為7.4%；ELISA檢測陽性率次之，為5.6%；試管凝集試驗檢測陽性率最低，為4.4%?；⒓t平板凝集試驗檢測陽性的樣品，經(jīng)試管凝集試驗和ELISA檢測大多數(shù)為陽性，少部分為陰性，而經(jīng)虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗檢測為陰性的樣品，ELISA檢測大部分為陰性，小部分為陽性，具體檢測結(jié)果見表1。

表 1 奶牛血清檢測結(jié)果

3 討論

3.1 檢測的6個奶牛場普遍存在布病，經(jīng)調(diào)查分析引起奶牛布病普遍存在的原因主要有三點：第一，奶牛交易量增加，檢疫把關(guān)不嚴(yán)，將隱性帶菌牛引入；第二，虎紅平板凝集試驗、試管凝集試驗用于布病的檢測，一定程度上造成隱性帶菌牛的漏檢，這也是試驗中出現(xiàn)“虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗檢測為陰性的樣品，ELISA檢測小部分為陽性”的原因；第三，對陽性牛的撲殺速度趕不上奶牛的感染速度，奶牛布病的傳播速度很快[3]。

3.2 奶牛布病的防控工作任務(wù)艱巨，在今后的工作中，重點從以下三方面做起：第一，加強宣傳教育，提高人們對奶牛布病危害性的認(rèn)識，引起人們對奶牛布病防控工作的重視；第二，鑒于虎紅平板凝集試驗和試管凝集試驗存在假陽性和敏感性不好[4-5]，ELISA敏感性強的特點，在奶牛布病的檢疫和監(jiān)測過程中，最好將虎紅平板凝集試驗、試管凝集試驗和ELISA三種方法有機結(jié)合起來，防止奶牛布病陽性牛的誤診和漏檢；第三，繼續(xù)做好可疑布病奶牛的隔離、消毒工作，陽性牛的淘汰、無害化處理工作。

[1]陳溥言.獸醫(yī)傳染病學(xué)[M].5版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006：135-141.

[2]蔡一非.奶牛布氏桿菌的分離鑒定、血清學(xué)檢測方法比較與流行病學(xué)調(diào)查[D].烏魯木齊：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

[3]龔德林，歐海敏，曾衍虎，等.奶牛布病流行病學(xué)調(diào)查與防控建議[J].畜禽業(yè)，2012（8）：66-67.

[4]鮑偉華，孫澤祥，朱善德，等.奶牛布氏桿菌病3種檢測方法比較[J].中國獸醫(yī)雜志，2009，45（4）：68-69.

[5]樊三忠，劉金彪，陳冬毅，等.虎紅平板凝集試驗與試管凝集試驗檢測奶牛布魯菌病的比較[J].中國動物檢疫，2009，26（9）：52-53.