郝麗紅

大同市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗測試所，山西大同 037008

提高液相色譜法檢測食品中食品添加劑準確性的對策

郝麗紅

大同市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗測試所，山西大同 037008

本文針對工作中應(yīng)用液相色譜法來檢測食品中食品添加劑時經(jīng)常出現(xiàn)的情況，從三個方面：準備工作、樣品的分析過程以及實驗后處理，分析了可能發(fā)生的情況，并總結(jié)出相應(yīng)的對策，對提高液相色譜法檢測食品中食品添加劑準確性有一定的指導(dǎo)作用。

液相色譜法；食品添加劑；準確性；對策

為了改善食品的品質(zhì)、口感以及防腐和在加工工藝中的需要，食品生產(chǎn)廠家常常會在食品中添加一種或者幾種食品添加劑。目前，食品添加劑的種類很多，主要有23種：抗結(jié)、酸度調(diào)節(jié)、消泡、漂白、增味、抗氧化、膨松、護色、著色、膠基糖果咀嚼和吹泡、乳化、面粉增白和提高焙烤制品質(zhì)量、酶制催化、被膜劑、防腐、水分保持、營養(yǎng)強化、穩(wěn)定和凝固、增甜、增稠、食品加工助劑、食品香料、其他。

近年來，一些商家為了更大限度地延長保質(zhì)期或者使食品的口感更佳，往往會在食品中添加超量的食品添加劑，甚至法律規(guī)定食品中禁止添加的添加劑，這給廣大人民群眾的生命健康造成很大的威脅。目前，檢測食品中添加劑的方法主要是用高效液相色譜［2］。但利用高效液相色譜儀來檢測食品中的添加劑時時常出現(xiàn)一些問題。因此，如何提高液相色譜法對食品添加劑檢測的準確性意義十分重大。

1 準備工作

1.1 流動相的過濾與脫氣

一般樣品溶液和流動相中都會存在一些直徑在0.45μm以上的顆粒。而色譜柱中的填充物很細，色譜柱的內(nèi)腔很小，這樣造成樣品和溶劑中的細小顆粒容易堵塞色譜柱以及毛細管。所以，所有的溶劑在使用之前必須經(jīng)過過濾，去除溶劑中的雜質(zhì)顆粒。

流動相必須預(yù)先經(jīng)過脫氣處理，否則，在系統(tǒng)內(nèi)容易逸出氣泡，影響泵的正常工作。同時也會對HPLC檢測器的基線穩(wěn)定性和靈敏度產(chǎn)生影響，甚至無法檢測。對低沸點溶劑采用煮沸法或者抽氣法時需要注意溶劑揮發(fā)可能造成組成的變化問題。目前最常見的脫氣做法是利用超聲脫氣。超聲脫氣的優(yōu)點是不會對溶劑的組成造成影響。一般超聲脫氣處理流動相只需20min～30min之間。應(yīng)該避免溶劑瓶和超聲槽壁以及超聲槽底部相接觸，以免超聲處理時溶劑瓶破裂。再者，容器內(nèi)的液面不要比水面高出太多。

1.2 檢查HPLC的柱壓與排氣泡

檢查HPLC的柱壓是否是正常的狀態(tài)。柱壓過高或者過低都會對檢測的結(jié)果造成一定的影響。通常情況下，HPLC常常會出現(xiàn)柱壓過高的問題。解決這個問題一般采用以下的步驟：第一步，拆下保護柱，觀察柱壓。如果柱壓下降，則是保護柱出現(xiàn)問題，如果柱壓仍然過高，則進行下一步檢查；第二步，從HPLC上取下色譜柱，觀察柱壓。如果柱壓仍然過高，則是管路出現(xiàn)阻塞，需要進行清洗，如果柱壓下降，則進行下一步檢查；第三步，反接色譜柱的進出口，接著用十倍于柱子體積的流動相清洗色譜柱，觀察柱壓。如果柱壓沒有下降，則進行下一步檢查；第四步，更換色譜柱的入口篩板，觀察柱壓。如果柱壓下降，則是因為樣品或者溶劑中含有雜質(zhì)顆粒，堵塞了入口篩板，如果柱壓仍然很高，則需要聯(lián)系廠商。通常情況下，避免柱壓過高的做法是在HPLC的進樣器和保護柱之間安裝在線過濾器。

另外，輸液管路中氣泡的及時排出也是提高檢測結(jié)果準確性的關(guān)鍵步驟之一。如果管道中有氣泡存在，則分析的時候柱壓會出現(xiàn)不穩(wěn)定，譜圖上表現(xiàn)為基線不穩(wěn)，甚至出現(xiàn)假峰的現(xiàn)象。對樣品的定性與定量造成非常大的影響。

1.3 其它準備工作

為了提高檢測的準確性，試驗前還需做以下工作，如檢查室內(nèi)的溫度變化情況、電壓的波動情況、比例閥、單向閥、泵密封墊、保護柱、流動性過濾頭等。

1.4 色譜柱的清洗與平衡

上述準備工作完成以后，必須對色譜柱進行清洗和平衡。清洗的步驟為：先用含有甲醇或者乙腈約80%的純水沖洗半個小時左右，接著用甲醇或者乙腈沖洗半個小時左右，然后用流動相平衡色譜柱到基線平穩(wěn)。

1.5 樣品處理

樣品處理必須按標準要求。否則，會出現(xiàn)以下兩種情況。一是不能徹底分離與待測組分結(jié)構(gòu)相近的組分而導(dǎo)致檢測的結(jié)果偏高；二是待測組分未能徹底分離而導(dǎo)致檢測的結(jié)果偏低。因此，處理樣品時應(yīng)按照標準要求，比如試劑加入的量，樣品處理所需的時間和溫度等等。平行樣應(yīng)注意處理條件相同。

2 樣品的分析過程

2.1 定性

一般采用加標同類樣品來定性的方法，即向不含待測組分的同類樣品中加入一定濃度的標樣，通過與樣品的保留時間的比較來進行定性。如果兩者的保留時間差不多，則在待測樣品中加入含量與樣品待測組分基本相同的等體積標液進行定性。若加標樣品中待測組分的峰出現(xiàn)叉峰，則可以確定不是待測組分；若加標樣品中待測組分的峰沒有出現(xiàn)叉峰，根據(jù)HPLC測出的待測組分含量、樣品和標樣的混合計算出來的含量基本相同，則可以確定是待測組分，反之，非待測組分。

2.2 定量

在一定的條件下分別加入一系列相同體積的標樣，測得相對應(yīng)的響應(yīng)值，繪制出響應(yīng)值與標樣含量的校準曲線，接著檢測待測樣品，從校準曲線上找出待測組分響應(yīng)值對應(yīng)的組分含量。所以，在實際檢測工作中，若待測組分的濃度低于檢測低限，或者按照標準方法無法濃縮的，結(jié)果為未檢出；若可以濃縮，濃縮后再進行檢測；若可以增加樣品量，應(yīng)增加樣品量后再進行檢測；若待測組分的濃度高于校準曲線的上限，則應(yīng)對待測樣品進行適當(dāng)稀釋后再進行檢測。

在進行山梨酸、糖精鈉、苯甲酸［4］的分析過程中，在苯甲酸前有時會有安賽蜜峰的出現(xiàn)，并在糖精鈉前有時會有脫氫乙酸峰的出現(xiàn)，而且這些峰非常接近，且不能完全分離，形成分叉峰或者饅頭峰，嚴重影響樣品的定性與定量。如果通過樣品標簽的信息能確定添加劑，就可以直接定性。如果待測組分超標，則要降低流動相的極性徹底分開雜質(zhì)峰后再進行定量。如果不能確定樣品中的添加劑，則要通過樣品加標來定性，再定量。如果標準中聲明不允許添加的，但在待測峰的附近出現(xiàn)這些添加劑峰的，則要通過樣品加標來定性，再定量，并注意待測峰應(yīng)與雜質(zhì)峰完全分離開，否則，要降低流動相的極性來使雜質(zhì)峰徹底分離開后才可定量。

3 實驗后處理

完成實驗后，必須徹底清洗HPLC的色譜柱。用含甲醇或乙腈約80%的純水來沖洗，沖洗到柱壓恢復(fù)至實驗前用含甲醇或乙腈約80%的純水沖洗時的柱壓。用甲醇或者乙腈來沖洗，沖洗到柱壓恢復(fù)至實驗前用甲醇或者乙腈沖洗時的柱壓。

一般半個月至一個月要清洗單向閥、泵密封墊、保護柱、流動性過濾頭等易堵塞的部件一次。清洗用純水要現(xiàn)做，現(xiàn)過濾，現(xiàn)用。在過濾好的清洗用純水中加入10%的甲醇或乙腈溶劑，可防止細菌滋生，延長純水的使用時間。

4 結(jié)論

綜上所述，在食品中食品添加劑檢測高標準的環(huán)境下，高效液相色譜儀的分析技術(shù)以其靈敏度、分辨率和定量精度高的優(yōu)點，在食品檢測領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用。為了迎合檢測的高標準，我們必須提高液相色譜法檢測食品中食品添加劑準確性。本文研究表明，準備工作、樣品的分析過程以及實驗后處理相應(yīng)對策的總結(jié)對提高液相色譜法檢測食品中食品添加劑準確性有一定的指導(dǎo)作用。

[1]陳燕茹，夏菁.食品添加劑的檢測技術(shù)研究[J].中國科技博覽，2012(8):277-277.

[2]張立立.淺論食品添加劑的檢測方法[J].科學(xué)之友，2011(9):36-37.

[3]劉英，尹州，鄒曉筱等.高效液相色譜法同時測定蜜餞中的16種食品添加劑[J].分析測試學(xué)報，2011，30(6):651-655.

[4]張麗妮，范勇.高效液相色譜法同時測定月餅中五種食品添加劑[J].商品與質(zhì)量·學(xué)術(shù)觀察，20(9):235.

[5]苗述.高效液相色譜技術(shù)在食品檢測中的應(yīng)用[J].黑龍江科技信息，2013(4):39.

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1674-6708（2013）97-0116-02