金貞姬王 菁

（1 吉林省琿春市中醫(yī)醫(yī)院，吉林 延邊 133300；2 廣州中醫(yī)藥大學(xué)2011級七年制中醫(yī)臨床，廣東 廣州 510006）

香菇多糖提取工藝的研究

金貞姬1王 菁2

（1 吉林省琿春市中醫(yī)醫(yī)院，吉林 延邊 133300；2 廣州中醫(yī)藥大學(xué)2011級七年制中醫(yī)臨床，廣東 廣州 510006）

目的研究香菇多糖的最佳提取工藝。方法以多糖含量為考察指標(biāo)，采用水煎煮法提取多糖。以加水量、提取次數(shù)、煎煮時間為考察因素，采用正交試驗法優(yōu)選提取總多糖的最佳工藝。結(jié)果最佳工藝為：因此確定北香菇總多糖的提取條件為A1B1C3，即：加6倍水，回流提取3次，每次提取1h。結(jié)論本工藝簡單可行，適用于工業(yè)大生產(chǎn)。

香菇；多糖；苯酚-硫酸法

香菇（Lentinus edodes （Berk） Song），又稱為有香蕈、冬菇、花菇、香草、香信等。為擔(dān)子菌亞門，擔(dān)子菌綱，傘菌目，口蘑科，香菇屬真菌，因其口味鮮美，營養(yǎng)豐富，香味濃郁，有著顯著的藥用及滋補(bǔ)作用，而被譽(yù)為“抗癌新兵”?，F(xiàn)代研究證明，香菇有防止血管硬化、降低膽固醇、增強(qiáng)人體免疫功能的作用[1,4]。香菇多糖是香菇中的活性成分，具有抗腫瘤、抗感染和調(diào)節(jié)免疫力等作用。本文以香菇多糖的含量為指標(biāo)，系統(tǒng)的研究了香菇中總多糖的提取方法，為進(jìn)一步開發(fā)和利用香菇打下基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

DU800紫外可見分光光度計（美國Beckman公司）；電子天平BS124S （北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；D-無水葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品（編號：110833；中國食品藥品檢定研究院）；苯酚、硫酸乙醇等試劑均為分析純（北京化工廠）；蒸餾水，蒸餾水機(jī)自制。香菇樣品共3批，經(jīng)長春中醫(yī)藥大學(xué)鑒定教研室鑒定。

2 方法與結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備

精密稱取無水葡萄糖對照品適量，加水溶解制成每1mL含無水葡萄糖0.1mg的對照品溶液。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

分別精密量取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL置于試管中，分別加蒸餾水至1.0mL，再分別加入5%苯酚水溶液1.0mL，然后加入濃硫酸溶液5.0mL，充分振搖使其充分反應(yīng)，放置，至室溫，以0管為空白，照分光光度法[2]（附錄VA），在其最大吸收波長490nm處測定其吸收度，以葡萄糖的含量為橫坐標(biāo)，吸收度為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，回歸方程為A=6.8689C+0.0224，r=0.9995。濃度在0.0195～ 0.098 mg/mL范圍內(nèi)，與吸光度呈線性關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好。

2.3 樣品的測定

取待測樣品，精確稱取約1.0g，置10mL量瓶中，加水溶解。精密吸取樣品溶液0.4mL，0.6mL，置于試管中，加水至1mL，再按照2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項下自“再加入5%苯酚溶液1.0mL”起，依法進(jìn)行操作，在490nm處測定其吸收度，計算總多糖含量[3]。

2.4 正交實驗優(yōu)選香菇總多糖提取工藝

多糖的提取方法有水提醇沉法、酶法、稀堿浸提法、稀酸浸提法等，水提醇沉法為最經(jīng)典的提取香菇多糖的方法，本文研究采用水提醇沉法提取香菇中的總多糖。影響香菇總多糖含量的主要因素有A：提取溶劑；B：提取時間；C：提取次數(shù)，每個因素取3個水平，因素水平見表1。

表1 正交實驗因素水平表

根據(jù)以上因素水平，確定按照L9（3）4正交表進(jìn)行試驗，稱取香菇干燥品，共9份，每份10 g，按照表2條件進(jìn)行試驗，采用水煎煮法提取，濾過，合并濾液，濾液干燥，測定其中總多糖的含量，實驗結(jié)果及方差分析見表2，表3。

表2 正交實驗表

表3 方差分析表

由方差分析結(jié)果可知，A、B二個因素對香菇多糖提取沒有顯著影響，C對實驗結(jié)果有顯著影響，因此確定北香菇總多糖的提取條件為A1B1C3，即：加6倍水，回流提取3次，每次提取1h。

3 討 論

多糖的含量測定方法有很多種，有蒽酮-硫酸法，苯酚-硫酸法，本實驗采用葡萄糖為對照品，苯酚硫酸法測定香菇提取物中的總多糖，在490 nm處用紫外可見分光光度計測定吸收度，該方法簡單易行，是測定多糖的常用方法。

參考文獻(xiàn)

[1] 于淑池,林澤平.香菇的營養(yǎng)保健及免疫調(diào)節(jié)作用[J] .承德民族師專學(xué)報,2003,23(2)∶82-83.

[2] 國家藥典委員會.中國藥典(一部)[S].北京∶化學(xué)工業(yè)出版社,2005.

[3] 孫磊,喬善義,趙毅民.黑骨藤多糖含量測定方法研究[J].中國中藥雜志,2009,34(10)∶1241-1244.

[4] 程迪,于潔,董麗.河南產(chǎn)牡丹皮中多糖含量的測定[J].安徽農(nóng)業(yè)學(xué),2008,36(2)∶518.

R284.1

B

1671-8194（2013）13-0071-02