譚 珊 陳應紅

貴州省黔西南州中醫(yī)院檢驗科，貴州 黔西南州 562400

ELISA、RPR、Trust三種方法檢測梅毒螺旋體抗體的觀察

譚 珊 陳應紅

貴州省黔西南州中醫(yī)院檢驗科，貴州 黔西南州 562400

目的：觀察探討ELISA、RPR、Trust三種方法檢測梅毒螺旋體抗體的效果。方法：分析1711例梅毒檢測標本資料，其中陽性標本例數(shù)30例，陽性率為1.8%。結果：ELISA兩種方法檢測梅毒螺旋體抗體陽性率明顯高于RPR、TRUST兩種方法檢測的陽性率，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論：ELISA對疑似梅毒患者有確證作用，但是其最終確診應結合臨床綜合判斷，TRUST試驗則可作為梅毒患者療效觀察及復發(fā)監(jiān)測試驗進行臨床應用。

ELISA；RPR；Trust；梅毒螺旋體抗體

梅毒是臨床常見的性傳播疾病，其由蒼白密螺旋體感染引起，傳染性較強，因螺旋體對于人體的皮膚和黏膜的親和性較強，會繼發(fā)性引起機體各個組織和臟器損傷［1］。因近年來梅毒發(fā)生率明顯增高，對于梅毒臨床診斷方法逐漸增多，探討不同檢測梅毒的分析也廣泛開展。筆者對我院收取的1711例檢測梅毒標本資料進行分析匯總如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2012年1月至2012年12月收取的1711例檢測梅毒標本資料進行分析，其中男性911例，女性800例，年齡3天～85歲，平均年齡（38.4±10.1）歲，陽性標本例數(shù)30例，陽性率為1.8%。1711例檢測梅毒標本分別通過酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、快速血漿反應素環(huán)狀卡試驗（RPR）、甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗（TRUST）進行檢測。

1.2 試劑與方法

1.2.1 TRUST試劑 上海榮盛；ELISA試劑：上?？迫A；TP試劑：艾博生物。

1.2.2 ELISA 在每一個孔內(nèi)加入50μL待測樣本和50μL酶標試劑，將其輕輕的振蕩混勻，進行封板，37℃水浴30min，洗板5遍后，進行扣干，每個孔內(nèi)加入顯色劑A和B，各50μL，混合均勻，進行封板37℃，15min加入50μL終止液，在450nm波長下測定吸光度值，空白孔調零后讀取待測樣品的吸光度值，大于或等于臨界值為陽性。

RPR：參照試劑盒上的說明書進行操作。

TRUST：加入50μL待測樣本放在紙卡的圓圈之內(nèi)，通過專用針頭將TRUST試劑滴入到圓圈內(nèi)，通過100轉／分鐘，離心8min之后通過顯微鏡觀察其凝集情況，如果凝集則為陽性。

1.3 觀察指標 觀察ELISA、RPR、Trust三種方法檢測梅毒螺旋體抗體的結果。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用統(tǒng)計學軟件SPSS17.0建立數(shù)據(jù)庫，通過卡方檢驗進行分析計數(shù)資料，P＜0.05表示研究結果的差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

ELISA、RPR、Trust三種方法檢測梅毒螺旋體抗體的結果（如表1）。

表1 ELISA、RPR、Trust三種方法檢測梅毒螺旋體抗體的結果

3 討論

近年來我國的梅毒報告病例明顯增多，呈現(xiàn)快速增多的趨勢，梅毒流行趨勢逐漸嚴重，有效診斷和控制顯得尤為重要［2］。目前我院常用的梅毒檢測方法主要有三種。酶聯(lián)免疫吸附試驗是應用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附原理進行的血清學檢測方法，其在微孔板上預包被TP基因重組的抗原，向其加入辣根過氧化物酶標記的TP基因重組抗原，對血清中的抗TP－IgM和抗TP－IgG抗體進行檢測，利用酶的放大性效應，對檢測的靈敏度有所提高。同時抗原是采用了純化的基因重組抗原，這樣可以提高檢測的特異性［3］。RPR屬于非密螺旋體抗原試驗，其主要是以牛心肌心脂質作為檢測的抗原，對于患者血清中的抗脂質抗體進行測定，其所檢測的抗體主要是針對梅毒感染后宿主細胞釋放的類脂質和螺旋體表面的脂質，當梅毒螺旋體感染人體之后，對機體組織破壞進而產(chǎn)生抗原性心磷脂，但對于其他的對機體破壞過程中也可能產(chǎn)生相應的螺旋體表面脂質，進而引起RPR出現(xiàn)假陽性。尤其是妊娠產(chǎn)婦、SLT、風疹、水痘、乙肝都可以產(chǎn)生假陽性結果。甲苯胺紅不加熱血清反應素試驗是利用牛心磷脂作為抗原，對產(chǎn)生的非特異性抗類脂質類物質的非特異性進行檢測，當人體感染梅毒螺旋體后，血清中會產(chǎn)生一定量的抗類脂質非特異性IgG抗體，其可以和類脂質抗原共同作用形成凝集顆粒。其操作方法較簡單，靈敏度特異性較低，價格便宜，檢測時間較短，不需要特殊儀器可以進行抗體滴度，其不適宜對早期梅毒和晚期梅毒進行診斷，適合用于治療過程中的梅毒患者，其滴度的變化可以反映患者臨床治療效果，還可以判定梅毒的復發(fā)和再感染，其在一些傳染性疾病和膠原病患者中也可能出現(xiàn)假陽性反應。綜上所述，ELISA對疑似梅毒患者有確證作用，但是其最終確診應結合臨床綜合判斷，TRUST試驗則可作為梅毒患者療效觀察及復發(fā)監(jiān)測試驗進行臨床應用。

［1］鄭玉平，張杰，嚴佳斌.梅毒螺旋體抗體篩查及其臨床意義［J］.臨床和實驗醫(yī)學雜志，2012，11（23）：1878－1879.

［2］馬榮，李曉蘭，趙成艷.RPR、ELISA、TP—HA三種方法檢測梅毒抗體的臨床應用評估［J］.放射免疫學雜志，2011，24（4）：454－455.

［3］繆亞梅，王文鼎.常用梅毒抗體檢測方法的比較［J］.海南醫(yī)學，2013，24（8）：1168－1170.

R446.11

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1007－8517（2013）21－0052－01

2013.09.16）