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        銀杏胞質(zhì)抗壞血酸過(guò)氧化物酶基因(APX)克隆及表達(dá)特性分析

        2013-05-07 03:14:06程華李琳玲等
        果樹(shù)學(xué)報(bào) 2013年2期
        關(guān)鍵詞:銀杏調(diào)控

        程華 李琳玲等

        摘 要: 【目的】分離和克隆銀杏細(xì)胞質(zhì)抗壞血酸過(guò)氧化物酶基因GbAPX1 (GenBank 登錄號(hào)為 FJ555021),了解其在銀杏正常組織發(fā)育以及響應(yīng)環(huán)境脅迫和逆境相關(guān)激素誘導(dǎo)的表達(dá)情況?!痉椒ā坷猛纯寺〖癛ACE技術(shù)從銀杏葉片細(xì)胞質(zhì)中分離得到GbAPX1全長(zhǎng)cDNA序列,用生物信息學(xué)方法對(duì)獲得的cDNA序列及推測(cè)的氨基酸序列進(jìn)行分析,并用實(shí)時(shí)定量PCR方法研究GbAPX1在不同組織、不同激素和脅迫處理下的表達(dá)模式?!窘Y(jié)果】克隆GbAPX1基因全長(zhǎng)cDNA序列為965 bp,包含一個(gè)759 bp的最大讀碼框,編碼252個(gè)氨基酸;預(yù)測(cè)該基因編碼蛋白質(zhì)分子量為27.6 kDa,其等電點(diǎn)為5.81。系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析表明, GbAPX1和其他裸子植物同源性較高并聚為一類。qRT-PCR分析結(jié)果顯示,GbAPX1表達(dá)具有組織和發(fā)育時(shí)期差異性,在成熟葉片和雄蕊中具有最高表達(dá)水平,在莖和嫩葉中表達(dá)水平較低。誘導(dǎo)表達(dá)分析表明,GbAPX1受到激素和環(huán)境壓力誘導(dǎo)。其中,脫落酸、水楊酸、茉莉酸甲酯和紫外輻射均能誘導(dǎo)其轉(zhuǎn)錄上升,而乙烯利和傷害處理對(duì)GbAPX1轉(zhuǎn)錄水平無(wú)顯著影響。【結(jié)論】確認(rèn)獲得序列為GbAPX1基因cDNA序列;GbAPX1不僅參與了銀杏正常的組織生長(zhǎng)發(fā)育,還與一些環(huán)境脅迫和逆境相關(guān)激素誘導(dǎo)表達(dá)有關(guān)。

        關(guān)鍵詞: 銀杏; 胞質(zhì)APX1; 脅迫和激素; 調(diào)控

        中圖分類號(hào):S664.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1009-9980

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