葉瑞印 曹曙光 陳建勝 羅彤

胃促生長素對大鼠胃排空的影響

葉瑞印 曹曙光 陳建勝 羅彤

目的 觀察不同劑量的胃促生長素（Ghrelin）腹腔注射后大鼠胃排空效應(yīng)，闡明Ghrelin在胃排空調(diào)節(jié)中的作用。方法將50只Wistar大鼠隨機(jī)分為對照組和4個實(shí)驗(yàn)組（A、B、C、D），每組各10只，4個實(shí)驗(yàn)組分別采用不同劑量的Ghrelin（0．5、1．0、1．5、2．0 nmol/kg）腹腔注射，對照組采用0．9%氯化鈉注射液1ml腹腔注射，45min后每只大鼠半固體糊1．0ml灌胃，30min后處死，測定胃排空率，比較5組間胃排空率的差異。結(jié)果腹腔注射Ghrelin后大鼠胃排空率（36．08±5．57）%，與對照組的（27．18±2．37）%相比有明顯加快（P＜0．05），而且該效應(yīng)與腹腔注射Ghrelin的量有一定的關(guān)系，小劑量Ghrelin（0．5nmol/kg）腹腔注射對胃排空無明顯影響（P＞0．05），但中、大劑量Ghrelin腹腔注射能明顯加速大鼠胃排空效應(yīng)（均P＜0．01）。結(jié)論中、大劑量Ghrelin腹腔注射能明顯加快健康大鼠的胃排空效應(yīng)。

胃促生長素 胃排空 胃動力

【 Abstract】 ObjectiveTo investigate the effects of ghrelin on gastric emptying in rats．MethodsFifty rats were randomly divided into five groups (n=10 in each)．Ghrelin was intraperitoneally injected (0．5,1．0,1．5 and 2．0 nmol/kg)in 4 experimental groups;in control group the normal saline was injected instead．Semisolid feed was given by gastric gavage 45 min after injection,30min late the animals were sacrificed and gastric emptying was measured．ResultsThe gastric emptying rate in ghrelin groups was significantly higher than that of controls[(36．08±5．57)%vs(27．18±2．37)%]in a dose-dependent manner．Conclusion Intraperitoneal injection of ghrelin can accelerate gastric emptying in rats in a dose-dependent manner．

胃促生長素（Ghrelin）是一個新發(fā)現(xiàn)的由28個氨基酸組成內(nèi)源性肽，它是生長激素促分泌物質(zhì)受體（GHSR）的內(nèi)源性配體，與GHSR結(jié)合后可產(chǎn)生廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，在具有促生長激素（GH）分泌作用的同時，又具有增強(qiáng)食欲、減少脂肪利用、增加體重、維持能量正平衡和調(diào)節(jié)能量代謝的作用。Ghrelin最先在小鼠和人胃內(nèi)分泌細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，與調(diào)節(jié)消化道運(yùn)動的激素胃動素（Motilin）在結(jié)構(gòu)上具有高度相似性，故其與消化道運(yùn)動的關(guān)系近年來越來越引起人們的關(guān)注。本研究旨在通過動物實(shí)驗(yàn)對照研究，觀察不同劑量的Ghrelin腹腔注射后大鼠胃排空效應(yīng)，闡明Ghrelin在胃排空調(diào)節(jié)中的作用。

1 材料和方法

1.1 材料 健康雄性Wistar大鼠50只，體重200～250g，由溫州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供。大鼠Ghrelin購自Tocris公司規(guī)格：1mg/支。

1.2 半固體糊制備 取5g羥甲基纖維素溶于125ml蒸餾水中，然后分別加入奶粉8g、糖4g、淀粉4g，每次加入時攪拌均勻，配成150ml約150g的半固體糊[1]，置于冰箱冷藏12h，使用前2h取出恢復(fù)至室溫。

1.3 大鼠胃排空測定 Wistar大鼠50只，禁食24h、禁水12h后，采用數(shù)字編號隨機(jī)分組方法分為對照組和4個實(shí)驗(yàn)組（A、B、C、D）共5組，每組各10只，A、B、C、D組大鼠分別腹腔注射0.5、1.0、1.5、2.0 nmol/kg的Ghrelin，對照組大鼠腹腔注射0.9%氯化鈉注射液1ml，45min后每只大鼠半固體糊1.0ml灌胃，30min后處死，打開腹腔，結(jié)扎幽門和賁門，取出胃，用濾紙擦干后稱全重；然后沿胃大彎剪開胃體，洗去胃內(nèi)容物后擦干，稱凈重。以胃全重和胃凈重之差為胃內(nèi)殘留物質(zhì)量，計(jì)算胃內(nèi)殘留物占所灌半固體糊質(zhì)量百分比為胃內(nèi)殘留率，按下式計(jì)算胃排空率：胃排空率=[1-（胃全重-胃凈重）]× 100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件，各組胃排空率以表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析。

2 結(jié)果

2.1 實(shí)驗(yàn)組和對照組大鼠胃排空情況的比較 腹腔注射不同劑量Ghrelin的40只實(shí)驗(yàn)組大鼠胃排空率為（36.08±5.57）%，對照組大鼠胃排空率為（27.18±2.37）%，實(shí)驗(yàn)組明顯大于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。2.2 Ghrelin對大鼠胃排空的量效關(guān)系 腹腔注射小劑量（0.5nmol/kg）Ghrelin后的A組大鼠胃排空率較對照組有所增加，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；腹腔注射中等劑量及大劑量（1.0、1.5、2.0 nmol/kg）Ghrelin后的B、C、D組大鼠胃排空率較對照組均有明顯增加，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01），且隨著Ghrelin劑量的增加，胃排空率有增加趨勢，詳見表2。

表1 Ghrelin對大鼠胃排空影響的量效關(guān)系

3 討論

胃腸道是Ghrelin的主要來源，大鼠全胃腸道黏膜層均有Ghrelin分泌細(xì)胞（Ghrelin細(xì)胞）的分布。胃體Ghrelin細(xì)胞的分布密度是下段小腸的十幾乃至上百倍，并主要位于泌酸腺體的體部至底部，部分位于腺體頸部。Ghrelin主要由胃內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生，并進(jìn)入血液循環(huán)，提示Ghrelin可能對胃腸道功能產(chǎn)生一定的影響。增加對大鼠胃的電生理刺激，能明顯增加大鼠胃內(nèi)分泌細(xì)胞產(chǎn)生Ghrelin[2]。Ghrelin與胃動素的結(jié)構(gòu)十分相似，故近年來有關(guān)Ghrelin與胃腸道動力的關(guān)系成為人們研究的熱點(diǎn)。本研究發(fā)現(xiàn)，腹腔注射Ghrelin能加速大鼠胃排空效應(yīng)，該效應(yīng)與腹腔注射Ghrelin的量有一定的關(guān)系，小劑量Ghrelin（0.5nmol/kg）腹腔注射對胃排空無明顯影響，但中、大劑量Ghrelin腹腔注射能明顯增大大鼠胃排空效應(yīng)；且隨著注射劑量的增加，胃排空率有增加趨勢。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，Ghrelin能加速正常人胃排空效應(yīng)[3]，同樣對特發(fā)性胃輕癱和糖尿病胃輕癱患者有促胃排空作用[4-5]，Ghrelin激動劑TZP-101能明顯緩解胃癱患者的惡心和嘔吐癥狀[6]。健康大鼠口服或腹腔注射左旋多巴后，胃排空效應(yīng)明顯受抑制，但Ghrelin能明顯逆轉(zhuǎn)左旋多巴對大鼠的胃排空抑制作用[7]，Valera Mora等[8]通過對20例肥胖患者和17例非肥胖健康對照者的研究發(fā)現(xiàn)，Ghrelin能加速非肥胖健康者的胃排空，而對肥胖患者的胃排空無促進(jìn)作用。但亦有部分學(xué)者持有不同的看法，Ohno等[9]研究發(fā)現(xiàn)，靜脈給予Ghrelin對狗空腹和餐后狀態(tài)下胃腸道運(yùn)動無明顯影響，但大劑量Ghrelin靜脈注射能明顯減少空腹?fàn)顟B(tài)下胃體部的動力指數(shù)，對胃排空亦無促進(jìn)作用；不同分子形式的Ghrelin對胃排空作用結(jié)果不同，辛?；疓hrelin能促進(jìn)大鼠胃排空作用，而腦室內(nèi)給予去辛?；疓hrelin，呈劑量相關(guān)性抑制大鼠胃對半流質(zhì)的排空作用[10]。另有研究發(fā)現(xiàn)，Ghrelin對胃排空的作用還受到胃內(nèi)容物的形式和物質(zhì)成分的影響，Levin等[11]通過觀察外周靜脈給予Ghrelin對胃排空的影響，發(fā)現(xiàn)Ghrelin有促進(jìn)非營養(yǎng)性流質(zhì)物質(zhì)的胃排空作用，而對營養(yǎng)性流質(zhì)物質(zhì)的胃排空無影響。

本研究結(jié)果顯示，Ghrelin對胃腸道動力的調(diào)節(jié)作用不容忽視，中、大劑量有加強(qiáng)胃體收縮、加速胃排空作用，但Ghrelin對胃排空影響的病理生理學(xué)機(jī)制尚未完全明了，需要進(jìn)一步研究予以證實(shí)。

[1] 孫玉舫,王松坡,蔣振明,等．調(diào)氣活血中藥對大鼠慢性萎縮性胃炎病理改變及胃排空的影響[J]．上海中醫(yī)藥雜志,2009,43(7):65．

[2] Gallas S,Sinno M H,Boukhettala N,et al．Gastric electrical stimulation increases ghrelin production and inhibits catecholaminergic brainstem neurons in rats[J]．Eur J Neurosci,2011,33(2):276-284．

[3] Li J,Ma W,Wang S．Slower gastric emptying in high-fat diet induced obese rats is associated with attenuated plasma ghrelin and elevated plasma leptin and cholecystokinin concentrations[J]．Regul Pept,2011,171(1-3):53-57．

[4] Tack J,Depoortere I,Bisschops R,et al．Influence of ghrelin on gastric emptying and meal-related symptoms in idiopathic gastroparesis[J]．Aliment Pharmacol Ther,2005,22:847-853．

[5] Murray C D,Martin N M,Patterson M,et al．Ghrelin enhances gastric emptying in diabetic gastroparesis:a double blind,placebo controlled,crossover study[J]．Gut,2005,54:1693-1698．

[6] Wo J M,Ejskjaer N,Hellstrom P M,et al．Randomised clinical trial: ghrelin agonist TZP-101 relieves gastroparesis associated with severe nausea and vomiting--randomised clinical study subset data[J]．Aliment Pharmacol Ther,2011,33(6):679-88．

[7] Wang L,Murphy N P,Stengel A,et al．Ghrelin prevents levodopa-induced inhibition of gastric emptying and increases circulating levodopa in fasted rats[J]．Neurogastroenterol Motil, 2012,24(5):e235-245．

[8] Valera Mora M E,Scarfone A,Valenza V,et al．Ghrelin does not influence gastric emptying in obese subjects[J]．Obes Res,2005, 13:739-744．

[9] Ohno T,Kamiyama Y,Aihara R,et al．Ghrelin does not stimulate gastrointestinal motility and gastric emptying:an experimentalstudy of conscious dogs[J]．Neurogastroenterol Motil,2006,18: 129-135．

[10] Chen C Y,Chao Y,Chang F Y,et al．Intracisternal des-acyl ghrelin inhibits food intake and non-nutrient gastric emptying in conscious rats[J]．Int J Mol Med,2005,16:695-699．

[11] Levin F,Edholm T,Ehrstrom M,et al．Effect of peripherally administered ghrelin on gastric emptying and acid secretion in the rat[J]．Regul Pept,2005,131:59-65．

Effects of Ghrelin on gastric emptying in rats

Ghrelin Gastric emptying Gastric motility

2012-09-12）

（本文編輯：沈叔洪）

325200 瑞安市中醫(yī)院內(nèi)科（葉瑞印、陳建勝、羅彤）；溫州醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院消化內(nèi)科（曹曙光）