李亞楠，孟靜巖

(天津中醫(yī)藥大學，天津 300193)

多藥耐藥(multidrug resistance,MDR)是腫瘤細胞免受化療藥物攻擊的最重要防御機制，也是導致化療失敗的主要原因之一。目前認為了解腫瘤耐藥機制，有助于提高臨床腫瘤化療效果?，F(xiàn)將對中醫(yī)藥逆轉腫瘤多耐藥機制的研究，總結如下。

1 腫瘤多藥耐藥機制

1.1 P-糖蛋白(P-gp) P-gp的過度表達使藥物外排能力增強，降低細胞內藥物濃度,從而引起MDR[1]。Januchowski等[2]發(fā)現(xiàn)卵巢癌的主要耐藥機制是耐藥細胞株P-gp的過度表達和拓撲替康耐藥細胞株BCRP的過度表達。

1.2 多藥耐藥相關蛋白(MRP) MRP屬于ABC轉運蛋白，發(fā)現(xiàn)于小細胞肺癌H69AR中，該基因主要存在于細胞膜上，細胞漿中也有分布[3]?？赊D運親水性分子及有機陰離子，MRP的轉運往往要有GSH的存在，能識別和轉運GSH的耦合底物(如長春新堿、阿霉素等)，從而導致耐藥。

1.3 乳腺癌耐藥蛋白(BCRP) BCRP作為ABC轉運家族成員之一的ABCG2是近年發(fā)現(xiàn)的與腫瘤多藥耐藥有關的新的藥物排出泵。該基因是一種含有655個氨基酸殘基、16個外顯子和15個內顯子，相對分子質量為74.6KD的跨膜轉運蛋白，特異底物為阿霉素、拓撲替康等[4]。

1.4 谷胱甘肽轉移酶 谷胱苷肽硫轉移酶(Glutathione S-tran-sferase,GST)和谷胱甘肽(GSH)與腫瘤耐藥密切相關，GSH在GSTs的催化下能與某些抗腫瘤藥物形成復合物，作為MRP1的底物被轉運出細胞外，從而產(chǎn)生耐藥。

1.5 蛋白激酶C(PKC) PKC是一類Ca2+、磷脂依賴性的蛋白激酶，在跨膜信號傳遞過程中起著重要作用。PKC通過催化多種蛋白質上Ser/Thr磷酸化，調節(jié)多種細胞的代謝、生長、增殖和分化。GST的非特異性結合可協(xié)助藥物通過P-gp泵出細胞外[5]。有研究表明GSTP1可被PKC和PKA磷酸化進而提高催化性，導致耐藥[6]。

1.6 拓撲異構酶Ⅱ(TopoⅡ) TopoⅡ是細胞內的一種重要核酶,是目前抗癌藥物重要的作用靶點，主要與Topo的磷酸化水平提高、Topo酶水平下降及Topo基因位點突變或缺失有關[7]。研究[8]發(fā)現(xiàn)TopoⅡ含量與活性的下降可能與多藥耐藥有關。

1.7 DNA的修復 當腫瘤細胞的DNA受損時，不僅影響其復制和轉錄功能，而且還能引起細胞死亡。DNA是很多抗癌藥物和放療的靶點，如烷化劑和鉑類劑，O6烷基鳥嘌呤DNA烷基轉移酶，能修復烷化劑類抗癌藥物誘導形成的O6烷基鳥嘌呤DNA合成物，使腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥性[9]。

2 中醫(yī)藥逆轉腫瘤耐藥

2.1 中藥單體

2.1.1 青蒿素 余和平等[10]通過流式細胞術測定青蒿素聯(lián)合ADR對MCF-7/ARD細胞P-gp表達的影響，結果顯示青蒿素逆轉MCF-7/ARD細胞耐藥的機制可能是通過影響細胞質和細胞膜之間的P-gp交換，降低細胞膜上P-gp表達水平，從而提高藥物在細胞內的聚集，增強藥物對細胞的殺傷作用。

2.1.2 大黃素 丘禹洪等[11]用蛋白印跡法檢測細胞中ERCC1蛋白的表達，研究結果發(fā)現(xiàn)大黃素可通過下調ERCC1的表達水平而逆轉MCF-7/Adr細胞多藥耐藥，并與大黃素濃度和作用時間有一定相關性。

2.1.3 姜黃素 曹仕瓊等[12]研究發(fā)現(xiàn)姜黃素具有逆轉肝癌細胞多藥耐藥的作用，其機制可能與下調多藥耐藥相關蛋白MRP1、LRP、P-gp以及上調凋亡相關蛋白PDCD5表達有關。

2.1.4 人參皂甙 王艷等[13]通過細胞膜流動性實驗檢測人參皂甙(Rg3)對A549/DDP細胞膜流動性的改變，發(fā)現(xiàn)通過上調caspas-3的表達，降低細胞膜的流動性，從而達到逆轉耐藥的作用。

2.1.5 漢防己甲素 顧建華等[14]用Wstern-blot法檢測漢防己甲素(Tel)應用前后SW1990-GEM細胞P-gp的表達，結果發(fā)現(xiàn)通過增加腫瘤細胞內化療藥物濃度逆轉SW1990-GEM細胞多藥耐藥性從而增強化療藥物抗腫瘤作用，其逆轉機制與抑制P-gp功能有關。

2.1.6 川芎嗪 余緒明等[15]研究表明川芎嗪能顯著降低人肝癌多藥耐藥細胞BEL-7402/ADM細胞表面P-gp表達，增加阿霉素等化療藥物對BEL-7402/ADM細胞毒性作用，從而增加對腫瘤細胞的抑制率。

2.1.7 黃芩苷 王術華[16]用MII法研究黃芩苷對人肝癌多藥耐藥細胞的逆轉作用，結果發(fā)現(xiàn)黃芩苷可能通過抑制MDR1部分基因產(chǎn)物P-gp、MRP、GSH/GST的表達和誘導細胞凋亡逆轉Bel-7402/ADM的多藥耐藥性。

2.1.8 浙貝母堿 唐曉勇等[17]用細胞免疫熒光法檢測細胞中的人肺耐藥蛋白(LRP)，結果浙貝母堿可逆轉肺癌A549/DDP細胞株多藥耐藥，其作用機制可能與促進耐藥細胞凋亡、下調LRP蛋白表達有關。

2.1.9 五味子素 金秀東等[18]用堿性磷酸酶免疫組織化學法和Westert blot檢測復方五味子素B對THC-8307/OXA細胞GST-n蛋白水平的影響，結果顯示,復方五味子素B具有逆轉耐奧沙利鉑人結腸癌細胞的MDR作用，其機制與下調GST-n表達有關。

2.2 中藥復方

2.1.1 腸胃清 鮑文磊等[19]用流式細胞術研究腸胃清方對大腸癌耐藥細胞株HCT-8/V的逆轉作用及抑制P-gp的表達，結果表明，經(jīng)腸胃清血清作用后,P-gp表達顯著降低，可能是逆轉人大腸癌多藥耐藥的作用機制之一。

2.2.2 健脾解毒方 李琪等[20]通過Western Blot檢測健脾解毒方藥物血清對P-糖蛋白(P-gp)以及c-Jun氨基端激酶(JNK)信號通路中c-Jun63/73磷酸化水平，探討健脾解毒方(JPJD)介導JNK/SAPK信號通路對人結腸癌細胞多藥耐藥的調節(jié)機制。結果顯示，健脾解毒方通過降低c-Jun的Ser63/73磷酸化，抑制JUN信號通路的激活，降低P-gp的表達，從而逆轉HCT-8/V細胞的多藥耐藥。

2.2.3 至真方 張旭等[21]用不同濃度至真方含藥血清作用24 h后，發(fā)現(xiàn)HCT-8/VCR細胞NF-κB/p65、MDR1 mRNA及NF-κB/p65、P-gp蛋白表達均降低，呈濃度依賴性，且至真方含藥血清可明顯抑制HCT-8/VCR細胞生長。

2.2.4 益氣養(yǎng)陰解毒方 嚴魯萍等[22]用流式細胞儀檢測移植瘤耐藥細胞P糖蛋白(P-gp)與bcl-2的表達情況，結果表明,益氣養(yǎng)陰解毒方具有部分逆轉白血病K562/A02移植瘤多藥耐藥性的作用，其逆轉機制與降低bcl-2表達、促進耐藥細胞凋亡有關。

3 結語

根據(jù)耐藥譜可分為原藥耐藥(PDR)和多藥耐藥(MDR)。PDR只對誘導的原藥產(chǎn)生耐藥,而對其他藥物不產(chǎn)生交叉耐藥。而MDR是一種藥物誘發(fā),而同時對其他多種結構和作用機制完全不同的抗癌藥物產(chǎn)生交叉耐藥。如何通過逆轉MDR提高腫瘤治療的臨床療效,已成為國內外研究的熱點之一。

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