■宋麗軍 片永泰 張 敏

（1.吉林省標(biāo)準(zhǔn)研究所，吉林長春 130022；2.延吉宏大飼料公司，吉林延吉 133000；3.延邊大學(xué)，吉林延吉 133000）

隨著人們生活水平的提高，對畜產(chǎn)品的消費(fèi)理念有了極大的改變。人們更加重視飲食的保健營養(yǎng)功效。各國相繼推出新的飼料法規(guī)，對抗生素的使用也作出了嚴(yán)格的限制。無論何種抗生素長期使用都會(huì)導(dǎo)致病原菌在不同程度上產(chǎn)生抗藥和耐藥性，藥物在畜產(chǎn)品中的殘留和養(yǎng)殖業(yè)對周邊環(huán)境污染更是令人憂心忡忡。新的環(huán)保型飼料添加劑的開發(fā)與應(yīng)用已經(jīng)成為飼料行業(yè)必需研究的問題和熱點(diǎn)。因此集保健與環(huán)保于一體的新型飼料添加劑必然會(huì)成為飼料工業(yè)產(chǎn)品核心原料的新寵。本研究是采用新的負(fù)離子生產(chǎn)技術(shù)所制的負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)添加劑用于肉雞生產(chǎn)試驗(yàn)，并進(jìn)行了與生產(chǎn)及肉雞免疫、肉質(zhì)相關(guān)的系列試驗(yàn)，由于添加劑中含有大量的負(fù)離子，對于清除動(dòng)物體內(nèi)自由基，改善腸道菌群，提高動(dòng)物體內(nèi)抗氧化劑的含量都有一定的促進(jìn)作用。為研究負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)添加劑在肉雞生產(chǎn)中的可應(yīng)用性，本文主要研究內(nèi)容是與肉雞體內(nèi)菌群平恒和血清抗氧化劑相關(guān)的試驗(yàn)，為負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)添加劑在肉雞養(yǎng)殖業(yè)中的推廣奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)用的礦物質(zhì)添加劑組成

負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組成：特殊工藝加工硫磺礦物粉、電氣石粉、鍺礦粉、鐵礦粉、硒礦粉和稀釋劑配制而成，礦物質(zhì)均為負(fù)離子狀態(tài)。

普通礦物質(zhì)組成：以市售的微量礦物元素為主與稀釋劑配制而成。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及供試動(dòng)物的選擇

試驗(yàn)選擇健康的1日齡AA肉公雞366只，按體重隨機(jī)分成兩組，分別為負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組和普通礦物質(zhì)組。分別添加負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)0.2%和普通礦物質(zhì)0.2%，每試驗(yàn)組183只，組內(nèi)設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)組61只。經(jīng)方差分析各組肉雞平均體重差異均不顯著（P＞0.05）。

1.3 供試雞各階段日糧組成及營養(yǎng)水平（見表1）

1.4 腸道和糞樣菌群指標(biāo)的測定

在肉雞生長到42日齡時(shí)，各重復(fù)組取5只肉雞采用頸部放血法屠宰后，立即取10 cm左右空腸腸段，用棉線將其兩端結(jié)扎，置于常溫冰箱中保存，并快速測定空腸中食糜的活菌數(shù)。活菌數(shù)采用平板計(jì)數(shù)法測得，所有步驟按微生物學(xué)操作規(guī)程進(jìn)行。

培養(yǎng)基選擇：乳酸桿菌和雙歧桿菌選用MRS培養(yǎng)基；大腸桿菌選用EMB培養(yǎng)基；好氧菌選用肉湯培養(yǎng)基。

表1 AA肉雞日糧組成及營養(yǎng)水平

1.5 抗氧化劑測定

采用試劑盒測定血清中的超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）的含量及總抗氧化能力（T-AOC）。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)采用SPSS12.0軟件處理，差異顯著性檢驗(yàn)采用單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 腸道菌群情況（見表2）

表2 腸道菌群

由表2可知，普通礦物質(zhì)組的大腸桿菌和好氧菌量分別為7.21、7.87 lgCFU，負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組的大腸桿菌和好氧菌量分別為4.56、5.11 lgCFU，大腸桿菌和好氧菌量的相對降低率分別為36.75%、35.07%，且差異極顯著（P＜0.01）。負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組的腸道有益菌乳酸桿菌和雙歧桿菌分別為9.29、9.54 lgCFU，普通礦物質(zhì)組的乳酸桿菌和雙歧桿菌分別為7.52、7.18 lgCFU，有益菌乳酸桿菌和雙岐桿菌分別相對提高了23.54%、32.87%，且差異極顯著（P＜0.01）。大腸桿菌（Escherichia coli）是肉雞腸道中能發(fā)酵多種糖類產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的腸道菌，在環(huán)境衛(wèi)生不良時(shí)，常隨糞便排出而污染周邊環(huán)境。好氧菌是在有氧環(huán)境中增殖，會(huì)破壞肉雞腸道菌群平衡，當(dāng)好氧菌降低時(shí)，利于厭氧菌的增殖。乳酸桿菌是肉雞腸道中非常重要的厭氧菌，主要作用是可發(fā)酵碳水化合物產(chǎn)生大量乳酸，促進(jìn)腸道中營養(yǎng)素的消化吸收；可阻止病原菌入侵和定植，抑制病原菌抗感染；可維持腸道菌群平衡增強(qiáng)機(jī)體免疫力，只要腸道中乳酸桿菌的數(shù)量增加，就可明顯促進(jìn)機(jī)體健康。雙歧桿菌是肉雞腸道中原有菌，具有拮抗致病菌和條件致病菌定植的作用，當(dāng)雙歧桿菌數(shù)量增多時(shí)可明顯提高肉雞的免疫力。據(jù)姚志通等（2007）、王光華等（2007）報(bào)道電氣石粉對水質(zhì)具有凈化作用，并能抑制環(huán)境中有害菌的繁殖。這與本試驗(yàn)的結(jié)果完全一致。

2.2 糞樣菌群情況（見表3）

由表3可知，糞樣中的普通礦物質(zhì)組的大腸桿菌和好氧菌量分別為8.34 lgCFU和7.44 lgCFU，負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組的大腸桿菌和好氧菌量分別為5.48 lgCFU和5.94 lgCFU，負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組的大腸桿菌和好氧菌量與普通礦物質(zhì)組相比分別降低了34.29%和20.16%，且差異極顯著（P＜0.01）。糞樣中的普通礦物質(zhì)組的乳酸桿菌為7.12 lgCFU，負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組的乳酸桿菌為7.98 lgCFU，負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組的乳酸桿菌量與普通礦物質(zhì)組相比提高了12.08%，且差異顯著（P＜0.05）。

表3 糞樣菌群

2.3 肉雞血清抗氧化劑（見表4、表5）

由表4可見，肉雞（1～21日齡）血清中，負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組超氧化物歧化酶為170.74 U/mg，普通礦物質(zhì)組為161.22 U/mg，相對提高了5.90%，差異顯著（P＜0.05）。負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組谷胱甘肽過氧化物酶為599.99 U/mg，普通礦物質(zhì)組為535.31 U/mg，相對提高了12.08%，差異顯著（P＜0.05）。負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組丙二醛含量為4.81 nmol/mg，普通礦物質(zhì)組為5.78 nmol/mg，相對降低了16.78%，差異顯著（P＜0.05）。負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組總抗氧化能力為12.89 U/mg，普通礦物質(zhì)組為10.75 U/mg，相對提高了19.91%，差異顯著（P＜0.05）。

表4 肉雞血清中抗氧化作用（1～21日齡）

表5 肉雞血清中抗氧化作用（22～42日齡）

由表5可見，肉雞(22～42日齡)血清中，負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組超氧化物歧化酶為179.19 U/mg，普通礦物質(zhì)組為155.92 U/mg，相對提高了14.92%，差異顯著(P＜0.05)。負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組谷胱甘肽過氧化酶為717.32 U/mg，普通礦物質(zhì)組為561.72 U/mg，相對提高了27.70%，差異極顯著（P＜0.01）。負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組丙二醛含量為5.27 nmol/mg，普通礦物質(zhì)組為9.81 nmol/mg，相對降低了46.27%，差異極顯著（P＜0.01）。負(fù)離子復(fù)合礦物質(zhì)組總抗氧化能力為23.01 U/mg，普通礦物質(zhì)組為18.81 U/mg，相對提高了23.33%，差異顯著（P＜0.05）。SOD是肉雞體內(nèi)的抗氧化劑，可清除肉雞體內(nèi)過多的有害的氧自由基，可降低脂質(zhì)過氧化物在肉中的含量。當(dāng)SOD在肉雞血清中升高時(shí)可提高肉雞自身的免疫力。有效降低血脂、膽固醇而增強(qiáng)肝腎功能。血清中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）是肉雞體內(nèi)廣泛存在的一種重要的過氧化物分解酶。GSH-Px能使肉雞體內(nèi)有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物，從而有利地保護(hù)了細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及功能不受過氧化物的干擾和損害。丙二醛是肉雞體內(nèi)自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)，氧化降解的終產(chǎn)物，會(huì)引起肉雞體細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、核酸等生命大分子的交聯(lián)聚合，并具有細(xì)胞毒性。總抗氧化能力是肉雞體內(nèi)抵御清除自由基的能力。據(jù)朱立賢（2000）報(bào)道，鍺有提高人和動(dòng)物體內(nèi)GSH-Px、SOD和總抗氧化力作用，并可降低體內(nèi)MDA。據(jù)莫尊理等（2011）報(bào)道，電氣石可清除人和動(dòng)物體內(nèi)自由基，提高動(dòng)物免疫力。上述報(bào)道與本試驗(yàn)的結(jié)果一致。

3 結(jié)論

負(fù)離子礦物質(zhì)添加劑可明顯改善肉雞腸道菌群，提高有益菌數(shù)量，降低好氧菌數(shù)量，同時(shí)可以明顯提高肉雞體內(nèi)抗氧化劑的含量，提高肉雞血清中的抗氧化能力。