高小新 陳燦

·綜述·

C-反應(yīng)蛋白和microRNA應(yīng)用于冠心病早期診斷的研究進(jìn)展

高小新 陳燦

冠心病主要由血管壁炎癥反應(yīng)所導(dǎo)致，容易引發(fā)心肌梗死、室顫等惡性癥狀，其發(fā)病率和死亡率在全球占據(jù)首位。CRP和microRNA近年發(fā)現(xiàn)的冠心病相關(guān)因子，本文就這兩個(gè)因子的生化功能及其在冠心病發(fā)病中的作用機(jī)制作一綜述，并闡明其應(yīng)用于冠心病早期診斷技術(shù)的重要價(jià)值。

冠心病； CRP； microRNA

雖然冠心病的一、二級預(yù)防措施、抗血栓降血脂藥物以及急診PCI術(shù)等防治手段已經(jīng)獲得廣泛應(yīng)用，但是在全球范圍內(nèi)，冠心病的發(fā)病率和死亡率仍占據(jù)首位。此外還有80%的心源性猝死是由冠心病引起，不穩(wěn)定的粥樣斑塊會(huì)脫落形成血栓并阻塞相應(yīng)的冠狀血管，引起相應(yīng)區(qū)域心肌細(xì)胞的缺血壞死，影響心臟的泵血功能，從而易于引發(fā)心力衰竭甚至致死性心律失常。因此，對冠心病的早預(yù)防早診斷早治療顯得尤為重要。然而，冠心病的發(fā)生發(fā)展往往會(huì)經(jīng)歷一段較漫長的潛伏期，直至血管嚴(yán)重狹窄并出現(xiàn)心絞痛或是粥樣斑塊急性破裂、血栓形成誘發(fā)心肌梗死等惡性癥狀時(shí)才容易引起重視，而此時(shí)已難以采取有效措施進(jìn)行治療。于是，開展冠心病致病因素的篩選和發(fā)掘，是從源頭上降低冠心病死亡率和改善預(yù)后的有效途徑。C-反應(yīng)蛋白和microRNA作為近年來引起關(guān)注的冠心病相關(guān)因子，已逐步成為病理機(jī)制研究和診斷應(yīng)用開發(fā)等領(lǐng)域的熱點(diǎn)。本文擬根據(jù)C-反應(yīng)蛋白和microRNA的最新研究進(jìn)展，詳述它們的生化功能及其在冠心病發(fā)病過程中的作用機(jī)制，并闡明其應(yīng)用于冠心病早期診斷技術(shù)的重要價(jià)值。

1 高敏CRP：冠心病新的危險(xiǎn)因素

CRP是一類由肝臟產(chǎn)生，與炎癥、組織損傷以及感染有關(guān)的急性期蛋白，具有高度的靈敏性。大量的研究證據(jù)表明高敏CRP、IL-6、細(xì)胞粘附因子-1等在動(dòng)脈粥樣硬化和動(dòng)脈血栓形成過程中扮演著重要的角色，與冠心病事件的風(fēng)險(xiǎn)性息息相關(guān)。CRP的致動(dòng)脈粥樣硬化作用，可能原因有以下兩點(diǎn)：① CRP可以和血漿中的LDL和VLDL選擇性結(jié)合，然后隨著LDL和VLDL沉淀于動(dòng)脈血管壁，導(dǎo)致動(dòng)脈血管壁硬化變性。② CRP對組織因子具有強(qiáng)大的刺激作用，進(jìn)而在血管壁血栓形成過程中起到重要的作用。Liuzzo等[1]觀察了35位患有不穩(wěn)定型心絞痛、但無心肌梗死的患者，發(fā)現(xiàn)當(dāng)高敏CRP在血漿中的濃度大于3 mg/L時(shí)，心絞痛、心肌梗死以及心源性猝死發(fā)生的幾率增加。來自ECAT心絞痛研究小組的數(shù)據(jù)顯示，高敏CRP的標(biāo)準(zhǔn)偏差增加可使非致死性心肌梗死和心源性猝死的相對危險(xiǎn)度(RR)升高。有學(xué)者認(rèn)為，高敏CRP對冠心病危險(xiǎn)度的預(yù)測價(jià)值遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于TC、HDL、LDL等常用于冠心病危險(xiǎn)分層的生化指標(biāo)，與IL-6、細(xì)胞粘附因子-1等相比也具有較大的優(yōu)勢，并且對那些有胸痛癥狀但CTnI為陰性的患者而言，升高的血漿CRP可為冠心病的診斷提供有利的參考。Paul等[2]對28263名健康婦女(無心肌梗死、心絞痛、中風(fēng)的病史)的血液樣本進(jìn)行CRP定量測定，在年齡-吸煙匹配分析中發(fā)現(xiàn)，CRP含量高的婦女，發(fā)生心肌梗死和中風(fēng)的概率是CRP水平正常或較低的婦女的7倍，提示CRP可作為健康中年婦女預(yù)測心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，同時(shí)還將CRP與其他常用的危險(xiǎn)因素進(jìn)行比較，得出了CRP對于預(yù)測高血壓、家族遺傳性冠心病等疾病具有顯著性優(yōu)勢的結(jié)論。但是CCGC[3]卻認(rèn)為CRP與冠心病無相關(guān)性。Jhon[4]的研究也認(rèn)為沒有充分的證據(jù)證明CRP在冠心病的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。因此，CRP是否可以作為冠心病的危險(xiǎn)因素存在著較多的爭議。為了能更好的了解這一分子，需要在更大的樣本和周期更長的研究中去驗(yàn)證該分子在冠心病的發(fā)生發(fā)展中占據(jù)的地位。

2 MicroRNAs:心肌梗死新的特異性標(biāo)記物？

MiRNAs是一類長度為18～24個(gè)單核苷酸、非編碼的內(nèi)源性小RNA分子，調(diào)控著人類超過30%的基因，至今發(fā)現(xiàn)的人類基因組中的miRNA分子已超過1000個(gè)。在miRBase收錄的miRNA就有900多個(gè)。成熟的miRNAs通過與靶mRNA的3’UTR端(非編碼區(qū))結(jié)合在轉(zhuǎn)錄后水平抑制靶mRNA的翻譯或促進(jìn)靶mRNA的降解來完成對目的基因的調(diào)控，是調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、定向分化及凋亡的重要因子。因此miRNA不僅參與了機(jī)體的正常發(fā)育和生理代謝，在許多疾病的發(fā)展中也起到了不可忽視的作用，包括癌癥和心血管病。目前發(fā)現(xiàn)的與冠心病和心肌梗死相關(guān)的miRNA分子有miR-1，miR-133a，miR-208a，miR-499，miR-21等。例如miR-133a，miR-499[5,6]在心肌損傷時(shí)分泌量會(huì)增加；miR-21[7]在大鼠心肌梗死區(qū)域表達(dá)量下降，梗死邊緣則為上調(diào)。在更進(jìn)一步的研究中，Jing Ai等[8]發(fā)現(xiàn)miRNA-1在冠心病心肌梗死患者血清中高表達(dá)，且其表達(dá)水平與心肌梗死患者QRS波群的異常增寬密切相關(guān)，推測其具有致心律失常的作用，并將miR-1與具有平滑肌特異性的miR-133比較，在心肌梗死和正常對照組血清中未見miR-133的差異性表達(dá)，從而認(rèn)為miR-1可作為預(yù)測心肌梗死的血清特異性標(biāo)記物。另外，Wang等[9]利用RT-PCR技術(shù)分別檢測心肌梗死患者和健康對照組血清中miRNA的水平，發(fā)現(xiàn)有90.9%(30/33)的心肌梗死患者血清中miR-208a水平顯著升高，特異性達(dá)到100%，同時(shí)還在心肌梗死發(fā)生的4 h內(nèi)檢測了患者血清中的cTnI水平，其陽性率為85%(17/20)，而miR-208a的陽性率為100%(20/20)。這可能是因?yàn)樘禺愋缘男募?biāo)記物cTnI大部分儲(chǔ)存于肌原纖維內(nèi)，僅有2.8%-4.1%儲(chǔ)存在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)內(nèi)。因此在心肌損傷的早期，cTnI從壞死心肌中釋放的量非常的少，難以檢測，而miRNA主要于細(xì)胞基質(zhì)中的蛋白結(jié)合，釋放的量多，容易檢測。組織不同，miRNA的含量也不同。例如，骨骼肌中含量豐富的miR-1，miR-133由于肌組織的損傷在大鼠假手術(shù)組中表達(dá)量也出現(xiàn)上升，以至于難和真手術(shù)組相鑒別。Olof[10]分析了心肌梗死發(fā)生12 h內(nèi)患者的血清miR-208a的水平變化，卻未能檢測到該分子的表達(dá)，而miR-208b與原來的水平相比升高了3000倍，在心肌梗死3 d后仍在70倍左右的高度波動(dòng),對于和Wang的研究結(jié)論相反這一結(jié)果，Olof認(rèn)為可能是因?yàn)閙iR-208a的半衰期比較短，在循環(huán)血液中的含量隨著心梗時(shí)間的延長逐漸降低，導(dǎo)致心梗12 h后的血清含量明顯低于4 h。綜上所述，雖然許多研究認(rèn)為具有心肌特異性或肌組織特異性的miRNA分子可做為心肌梗死的特異性標(biāo)記物，但是這一類分子是否真的能取代肌鈣蛋白的地位，還需要更多的研究來證實(shí)。

3 展望

雖然目前臨床上很少使用CRP和miRNA分子作為冠心病危險(xiǎn)因素及心肌梗死特異性標(biāo)記物，但是相信隨著研究樣本的逐步擴(kuò)大和研究機(jī)制的逐步深入，這兩個(gè)分子在臨床可用性證據(jù)就會(huì)越充分，在臨床上的應(yīng)用價(jià)值會(huì)逐漸受到重視，從而對冠心病的早期診斷、危險(xiǎn)評估和干預(yù)治療做出重大貢獻(xiàn)。

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