摘 要:利用生物信息學(xué)方法,從玉米基因組中鑒定出一個(gè)與擬南芥的SMO2基因同源的基因,并對這個(gè)基因的染色體分布、遺傳進(jìn)化、順式調(diào)控元件等進(jìn)行了分析,以期為該基因的克隆及功能研究提供有益信息。
關(guān)鍵詞:玉米;SMO2基因;遺傳進(jìn)化;順式元件
中圖分類號(hào):Q781文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào):A文章編號(hào):1001-4942(2013)03-0004-03
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Key words Zea mays L.; SMO2; phylogeny; cis-elements
玉米作為我國最重要的糧食作物之一和典型的C4類模式植物,雜種優(yōu)勢強(qiáng),產(chǎn)量高,在糧食生產(chǎn)和單子葉植物功能基因組學(xué)研究中具有重要地位。隨著水土資源的日益匱乏和糧食需求的日益增加,糧食安全問題日益突出。如何提高農(nóng)作物的產(chǎn)量,是我國迫切需要解決的重大課題。從作物自身的遺傳因素入手,解析影響產(chǎn)量形成的遺傳因子及其作用機(jī)理,是進(jìn)行農(nóng)作物產(chǎn)量遺傳改良的重要基礎(chǔ)[10]。近年來多個(gè)植物器官大小和產(chǎn)量相關(guān)基因被克隆,如ARGOS、DA1、ARF2、SMO2、DEP1、GW5、GW2、GS3等[1,2,4,6,8,11,14~21],玉米中已克隆的與器官大小和產(chǎn)量相關(guān)的基因有CNR1、GS3、GW2等[3,5,12,13]。
SMO2是擬南芥中控制器官大小的正調(diào)控因子,這個(gè)基因突變以后擬南芥植株地上部變小,根系變短,細(xì)胞分裂的速度降低;另外還調(diào)控種子萌發(fā)和ABA的應(yīng)答,該基因突變后擬南芥種子萌發(fā)延遲,對ABA超敏感,過量表達(dá)SMO2基因降低擬南芥種子對ABA的敏感性[6,7]。目前,有關(guān)SMO2的研究在單子葉植物中還未見報(bào)道。本試驗(yàn)利用比較基因組學(xué)的方法從玉米中鑒定出一個(gè)與擬南芥SMO2基因同源的序列,并對這個(gè)基因的染色體分布、遺傳進(jìn)化和順式調(diào)控元件進(jìn)行了分析,為進(jìn)一步克隆和研究其在玉米生長發(fā)育中的功能奠定了基礎(chǔ)。
1 研究方法
利用擬南芥SMO2基因序列在GenBank中搜索比對玉米的基因組序列 (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi),尋找玉米SMO2基因序列,并對它的染色體分布、遺傳進(jìn)化和順式元件進(jìn)行分析。遺傳進(jìn)化分析利用MEGA4.1進(jìn)行,采用Bootstrap test-Neighbor Joining 方法,重復(fù)500次運(yùn)算,順式元件預(yù)測采用PlantCARE軟件進(jìn)行在線分析。亞細(xì)胞定位預(yù)測在WoLF PSORT (http://wolfpsort.org/) 中進(jìn)行。
2 結(jié)果與分析
2.1 玉米SMO2基因的鑒定和遺傳進(jìn)化分析
利用擬南芥SMO2基因序列在GenBank中搜索比對玉米的基因組序列,結(jié)果在玉米的2號(hào)染色體上發(fā)現(xiàn)了一個(gè)SMO2類似序列,位于人工細(xì)菌染色體文庫克隆AC210087.3中(見表1)。它沒有內(nèi)含子,編碼區(qū)為396 bp,預(yù)測編碼的蛋白定位到細(xì)胞質(zhì)中。序列分析表明,ZmSMO2與AtSMO2的序列一致性為51.15%,而與SbSMO2的序列一致性高達(dá)96.95%,與水稻的序列一致性為69.92%,與小麥的序列一致性為74.44%。不同物種SMO2遺傳進(jìn)化分析也表明,玉米和高粱的SMO2關(guān)系最近,同屬一個(gè)分支,與小麥、水稻等的關(guān)系較遠(yuǎn),但同在一個(gè)類群。而雙子葉植物擬南芥、番茄、蒺藜狀苜蓿等的SMO2與單子葉植物的SMO2關(guān)系較遠(yuǎn),分在另一個(gè)類群(見圖1)。
2.2 玉米SMO2基因的順式調(diào)控元件分析和功能預(yù)測
順式調(diào)控元件分析表明,玉米的SMO2基因啟動(dòng)子及上游序列中含有ABA應(yīng)答元件ABRE 3個(gè),茉莉酸甲酯應(yīng)答元件CGTCA-motif 3個(gè),赤霉素應(yīng)答元件GARE-motif 2個(gè)和TATC-box 1個(gè), 熱脅迫應(yīng)答元件HSE 1個(gè), 干旱應(yīng)答元件MBS 1個(gè), 水楊酸應(yīng)答元件TCA-element 3個(gè),還有生長素應(yīng)答元件TGA-element 2個(gè)。生長素、赤霉素、茉莉酸甲酯都和植物的生長發(fā)育相關(guān),而ABA和水楊酸與植物的非生物逆境應(yīng)答、種子萌發(fā)和生物脅迫應(yīng)答有關(guān)。根據(jù)以上分析,本試驗(yàn)認(rèn)為玉米SMO2基因與AtSMO2具有相似的功能,參與了細(xì)胞分裂和器官發(fā)育、ABA應(yīng)答、種子萌發(fā)和逆境應(yīng)答過程,值得深入探討研究。
3 結(jié)論
本試驗(yàn)利用生物信息學(xué)方法,從玉米的基因組中鑒定出一個(gè)與擬南芥器官大小相關(guān)基因SMO2同源的基因。它不含內(nèi)含子;系統(tǒng)進(jìn)化分析表明它與高粱SMO2的相似性最高,與小麥、高粱、大麥等的SMO2位于同一類群;順式元件分析表明,玉米的SMO2基因上游序列含有多個(gè)激素和逆境應(yīng)答元件,可能參與多個(gè)玉米生長發(fā)育過程。本試驗(yàn)為進(jìn)一步克隆和研究玉米SMO2的功能奠定了基礎(chǔ)。
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