[摘要] 目的 構(gòu)建甲型副傷寒桿菌外膜蛋白基因ompX的原核表達(dá)系統(tǒng),確定其重組表達(dá)產(chǎn)物rOmpX免疫原性。 方法 采用PCR從甲型副傷寒桿菌標(biāo)準(zhǔn)株50001擴(kuò)增目的基因并構(gòu)建其原核表達(dá)系統(tǒng),IPTG誘導(dǎo)表達(dá)目的蛋白,提取并純化表達(dá)產(chǎn)物。采用免疫擴(kuò)散法和Western blot鑒定其免疫原性。 結(jié)果 成功構(gòu)建了ompX的原核表達(dá)系統(tǒng),rOmpX表達(dá)量約為細(xì)菌總蛋白的28%。rOmpX免疫家兔可產(chǎn)生抗體并能與重組蛋白rOmpX產(chǎn)生陽性Western blot雜交信號。 結(jié)論 成功構(gòu)建甲型副傷寒桿菌外膜蛋白基因ompX的原核表達(dá)系統(tǒng),rOmpX具有良好的免疫原性,可作為甲型副傷寒桿菌基因工程疫苗候選抗原之一。
[關(guān)鍵詞] 甲型副傷寒桿菌;ompX基因;原核表達(dá);免疫原性
[中圖分類號] R392.7 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-9701(2012)34-0004-02