紫杉醇合成關(guān)鍵酶基因dbtｎbt的克隆及原核表達(dá)
2012-12-31 00:00:00苗莉云張鵬付春華余龍江
湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2012年9期
摘要：從曼地亞紅豆杉（Ｔａｘｕｓ ｘ ｍｅｄｉａ）細(xì)胞中提取總ＲＮＡ，通過ＲＴ－ＰＣＲ克隆了ｄｂｔｎｂｔ基因，測序結(jié)果表明ｄｂｔｎｂｔ基因全長為１ ３１７ ｂｐ；將ｄｂｔｎｂｔ基因與原核表達(dá)載體ｐＥＴ３２ａ（＋）連接，成功構(gòu)建了重組質(zhì)粒ｐＥＴ３２ａ（＋）－ｄｂｔｎｂｔ，并將其轉(zhuǎn)入Ｅ． ｃｏｌｉ ＢＬ２１ ｐｌｙｓＳ中進(jìn)行表達(dá)，ｄｂｔｎｂｔ基因的表達(dá)產(chǎn)物分子量約為４８．４ ｋｕ，與預(yù)測大小一致。
關(guān)鍵詞：曼地亞紅豆杉（Ｔａｘｕｓ ｘ ｍｅｄｉａ）；紫杉醇；ｄｂｔｎｂｔ基因；原核表達(dá)
中圖分類號(hào)：S791.49；Q943.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：０４３９－８１１４（２０１２）０９－１９12－０３
