摘要：根據(jù)已發(fā)表的西尼羅河病毒（ＷＮＶ）的ＤＮＡ序列設(shè)計(jì)合成一對(duì)特異性引物，用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ＰＣＲ）擴(kuò)增Ｅ蛋白結(jié)構(gòu)域Ⅲ（Ｅ－ＤⅢ）的基因。將ＰＣＲ產(chǎn)物克隆至ｐＥＴ２８ａ原核表達(dá)載體上，獲得重組表達(dá)質(zhì)粒ｐＥＴ２８ａ－Ｅ－ＤⅢ。將該質(zhì)粒轉(zhuǎn)化ＢＬ２１（ＤＥ３），經(jīng)ＩＰＴＧ誘導(dǎo)后提取包涵體，純化融合蛋白，通過(guò)ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ方法證實(shí)Ｅ－ＤⅢ的基因可以在大腸桿菌中高效表達(dá)。

關(guān)鍵詞：西尼羅河病毒；Ｅ蛋白結(jié)構(gòu)域Ⅲ；原核表達(dá)

中圖分類(lèi)號(hào)：Ｓ８５２．６５＋９．６；Ｑ７８６ 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ 文章編號(hào)：0439－８114（２０12）12－2593-03