許建安

（湖北民族學(xué)院 醫(yī)學(xué)院，湖北 恩施445000）

反復(fù)呼吸道感染（recurrent respiratory tract infections，RRTI）是兒科常見病、多發(fā)病，易引起許多并發(fā)癥，嚴(yán)重影響患兒的發(fā)育［1］。臨床研究表明，免疫功能紊亂是該病的病因所在［2］。本研究通過對(duì)68例反復(fù)呼吸道感染患兒予以T 細(xì)胞亞群、NK 細(xì)胞檢測(cè)，并予以病例對(duì)照研究，探討RRTI患兒T 細(xì)胞亞群、NK 細(xì)胞的免疫狀態(tài)，為RRTI患兒的診治提供臨床理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年5—2010年12月來恩施州中心醫(yī)院兒科就診的68例反復(fù)呼吸道感染患兒為病例組，其中男45例，女23例，年齡2～6歲，平均年齡4.2歲，入選患兒均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)呼吸學(xué)組2008年制定的有關(guān)反復(fù)呼吸道感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)。另選取同時(shí)間段來我院體檢的52例健康兒童作為對(duì)照組，兩組兒童均排除遺傳代謝病、先天性疾病、先天性肺發(fā)育不良、過敏性疾病、哮喘、近期患各種感染性疾病及近期服用影響免疫功能藥物者。兩組兒童的性別、年齡等臨床資料比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 T 細(xì)胞亞群、NK 細(xì)胞的檢測(cè)

檢測(cè)儀器：KDC－40型低速離心機(jī)，由科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司提供。FC500 型流式細(xì)胞儀，由美國COULTER 公 司 提 供。試 劑：T 細(xì) 胞 亞 群（CD3＋，CD4＋，CD8＋）、NK 細(xì)胞（CD3－／CD16＋CD56＋），溶血素均由北京友華志科科技有限公司提供。標(biāo)本：EDTA 抗凝外周血0.5mL。標(biāo) 本 處 理：分 別 取T 細(xì) 胞 亞 群（CD3＋，CD4＋，CD8＋）、NK 細(xì)胞（CD3－／CD16＋CD56＋）各10μL 置于兩個(gè)12×75試管中，然后加入受檢者EDTA 抗凝血各50μL，待充分混勻后在室溫下靜置40min，各管加入溶血素，在室溫下靜置10min，待試管血液透亮后，采用KDC－40型低速離心機(jī)進(jìn)行離心，棄去上清液，用生理鹽水洗滌1次，最后取500mL生理鹽水懸浮細(xì)胞用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。流式分析，先打開激光電源，待預(yù)熱30min后，用FLOW－CHECK調(diào)整光路，用SS9（側(cè)向散射光）、FS（前向散射光）設(shè)門，收集10 000個(gè)淋巴細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)T 細(xì)胞亞群和NK 細(xì)胞統(tǒng)計(jì)分析，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

T 細(xì)胞亞群病例組和對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），NK 細(xì)胞病例組低于對(duì)照組（P＜0.05），差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，詳見表1。

表1 病例組和對(duì)照組T細(xì)胞亞群與NK 細(xì)胞比較（±s）

表1 病例組和對(duì)照組T細(xì)胞亞群與NK 細(xì)胞比較（±s）

項(xiàng)目 病例組（n＝68） 對(duì)照組（n＝52）CD3＋65.80±4.15 66.90±3.80 CD4＋ 35.10±6.20 36.30±5.70 CD8＋ 23.50±2.15 24.60±2.55 CD4＋／CD8＋ 1.46±0.32 1.47±0.27 NK 細(xì)胞10.68±5.82 13.34±4.28

3 討論

反復(fù)呼吸道感染是指一年內(nèi)頻繁發(fā)生的呼吸道感染，其次數(shù)已經(jīng)超過正常范圍，好發(fā)于5歲以下的幼兒［3］。根據(jù)T 細(xì)胞表面標(biāo)志與功能的不同可將T 細(xì)胞亞群分為輔助性T淋巴細(xì)胞（CD4）與抑制性T 淋巴細(xì)胞（CD8）兩大亞群［4］。國內(nèi)外學(xué)者在兒童反復(fù)呼吸道感染中的T 細(xì)胞亞群研究上存在一定的差異，國內(nèi)學(xué)者認(rèn)為兒童反復(fù)呼吸道感染的T細(xì)胞亞群比正常兒童低。國外學(xué)者Bajoriuniene等［5］研究發(fā)現(xiàn)兒童反復(fù)呼吸道感染的CD4＋淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比正常兒童低，具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），而CD3＋、CD8＋、CD4＋／CD8＋和正常兒童比較沒有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本組研究中結(jié)果顯示T 細(xì)胞亞群病例組和對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

天然殺傷細(xì)胞（natural killer ce11，NK 細(xì)胞）可直接將細(xì)菌或病毒感染的靶細(xì)胞直接殺死，其在抗感染及免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)中有著重要的作用。目前，國內(nèi)對(duì)于NK 細(xì)胞與反復(fù)呼吸道感染的研究尚處于初級(jí)階段。本次研究中主要將NK 細(xì)胞上的CD3－／CD16＋CD56＋表面標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果NK 細(xì)胞病例組低于對(duì)照組，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）。研究結(jié)果表明反復(fù)呼吸道感染患兒因早期對(duì)病原清除能力較差，非特異性免疫功能較弱，使得臨床對(duì)NK 細(xì)胞的檢測(cè)有利于患兒的診治與預(yù)后。

總之，在反復(fù)呼吸道感染的兒童中T 細(xì)胞亞群沒有變化，NK 細(xì)胞變化明顯，其對(duì)兒童反復(fù)呼吸道感染的檢測(cè)具有臨床意義。除此之外，為了提高反復(fù)呼吸道感染的防治，還需合理用藥，加強(qiáng)保健，合理膳食及堅(jiān)持運(yùn)動(dòng)等，從而提高患兒機(jī)體的抵抗力，降低臨床發(fā)病率。

［1］ 中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)呼吸學(xué)組，中華兒科雜志編輯委員會(huì).反復(fù)呼吸道感染的臨床概念和處理原則［J］.中華兒科雜志，2008，46（2）：108－109.

［2］ 陳慧中，胡儀吉.如何認(rèn)識(shí)反復(fù)呼吸道感染［J］.中華兒科雜志，2008，46（2）：83－84.

［3］ 周小燕，余華，鄧朝霓.反復(fù)呼吸道感染兒童外周血T 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)的臨床意義［J］.中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2008，5（28）：105.

［4］ 韓瑞珠，郝艷艷，侯安存.反復(fù)呼吸道感染兒童細(xì)胞免疫與體液免疫狀況［J］.實(shí)用兒科臨床雜志，2007，22（10）：736－737.

［5］ BAJORIUNIENE IURBONIENED，SIMONIENEG SAKALAUSKASR，SITKAUSKIENE B.Lymphocyte subsets in patients with recurrent upper airway infections［J］.Kaunas University of Medicine，2005，5（8）：512－520.