張秀麗

（繁峙縣第一人民醫(yī)院，山西 繁峙 034300）

標本溶血是由各種因素如真空采血時負壓過大、水浴箱中溫度偏高、離心分離血清時轉(zhuǎn)速過高等造成紅細胞破裂，而使血紅蛋白逸出紅細胞的一種現(xiàn)象［1］。檢測血樣溶血現(xiàn)象是臨床生化檢測中最常見的干擾因素之一。標本溶血可分為體外溶血與體內(nèi)溶血，其中，體外溶血多由物理因素（如抽血時負壓過大、水浴溫度過高、冰凍、振蕩等機械性破壞），化學(xué)因素（血樣接觸表面活性劑）以及代謝因素（如遺傳病引起紅細胞脆性增加）導(dǎo)致；體內(nèi)溶血則主要由物理因素（如人工心臟瓣膜或大血管手術(shù)后）、化學(xué)因素（如惡性瘧疾）以及藥物毒性反應(yīng)等因素引起。隨著真空管采血越來越多地應(yīng)用于臨床生化檢驗，標本溶血現(xiàn)象日趨頻繁。由標本溶血導(dǎo)致白細胞、血小板、紅細胞等血細胞破壞所釋放的某些胞內(nèi)成分已對臨床生化指標造成嚴重干擾。本文通過研究標本溶血現(xiàn)象對臨床生化指標測定結(jié)果的影響，探討溶血標本的防治措施，以提高臨床生化檢驗的準確性。現(xiàn)總結(jié)報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

選取2010年2月—2011年2月我院30例健康體檢者的血液標本，所有體檢者均行早晨空腹血4mL，分別注入兩支干燥試管各2mL，其中一試管置低溫冰箱凍結(jié)20min后，取出融化，以4000r／min離心5min，分離溶血血清；另一試管在取血1h后以相同條件離心，分離不溶血血清，管內(nèi)血清無肉眼可見的黃疸與脂濁。

1.2 標本制備

選取經(jīng)過血細胞學(xué)分析紅細胞比容（HCT）40%±2%，分離血清備用；剩余壓積紅細胞置20℃環(huán)境1h后，取出化凍、震蕩混勻并進行離心，取上層溶血液2，4，6，8，10，12，14，16，18，20μL，分別加入600μL血清中，制備成不同程度的溶血標本。

1.3 檢驗方法

取上述溶血血清及非溶血血清，分別測定其DBIL、AST、TP、GLu、TBIL、ALT、ALP、UA、TBA、GGT、Crea、LDH、Cr、TCH、α－HBD、TG、CK等常規(guī)生化項目。

1.4 統(tǒng)計方法

所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用SPSS11.3統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，用均數(shù)±標準差表示，結(jié)果采用t檢驗。

2 結(jié)果

與正常標本的生化項目檢驗結(jié)果比較，受溶血影響的生化項目較實際數(shù)值偏高，且因溶血程度的不同及生化檢測項目的不同所產(chǎn)生的檢驗干擾也有所不同。

其中，標本輕微溶血（H＝1，Hb＝0.94±0.27g／L）時產(chǎn)生干擾的干擾項目有LDH、AST、CK、AFU、K＋、CK－MB、Na＋、IP、C1－以及Ca2＋；標本嚴重溶血時（H≥10，Hb＝8.27±0.56g／L）對絕大多生化項目均會產(chǎn)生不同程度干擾，最高干擾程度達1521%（CK－MB）。

3 討論

溶血是臨床生化檢驗中最常見的干擾因素之一，標本溶血產(chǎn)生的白細胞、紅細胞以及血小板等血細胞破裂所釋放的某些胞內(nèi)成分均會對臨床生化指標的測定結(jié)果造成不同程度的干擾，從而影響檢測結(jié)果的準確性。通常情況下，標本血細胞高濃度組分逸出使得血漿分析物濃度增加，如血細胞中某一分析物濃度高出血漿濃度過多，相對應(yīng)的，血漿中該成分的濃度也會隨之增高，進而導(dǎo)致項目檢驗結(jié)果高于實際數(shù)值。

紅細胞內(nèi)外液的濃度差是標本溶血產(chǎn)生干擾的主要原因。一般而言，紅細胞內(nèi)濃度較血漿中濃度明顯高的物質(zhì)如下：CK（68倍）、K＋（25倍）、AST（11倍）、ALT（8倍）等［2］；其次，紅細胞外血紅蛋白達到一定程度會對比色檢測產(chǎn)生一定影響；此外，樣本溶血引起細胞內(nèi)外液之間的各種反應(yīng)也是影響項目檢測結(jié)果的重要原因。

大量臨床實踐表明，生化檢驗結(jié)果能否真實反應(yīng)患者血清實際狀況具有十分重要的臨床意義。傳統(tǒng)生化檢測項目中通常采用干化學(xué)法在其干片涂層中附著特殊膠膜，以有選擇性地過濾、吸附過程中的干擾物［3］。但本文實驗結(jié)果表明，標本溶血幾乎會對所有生化項目的檢驗結(jié)果產(chǎn)生干擾，尤其是對CK、K＋、ALT、ALT、GLu等項目的干擾更為嚴重，導(dǎo)致其檢驗數(shù)值極大地偏高。以血清葡萄糖（GLu）的下降原因為例，有學(xué)者經(jīng)過試驗證明：可排除血紅蛋白（HB）對葡萄糖氧化酶的直接抑制作用，引起血清葡萄糖（GLu）及以上生化項目檢驗值降低的原因可大致歸為以下方面影響機制所致：①隨著溶血進入血清，紅細胞中濃度極低的物質(zhì)與紅細胞內(nèi)液體引起了血清體積增加，對血清產(chǎn)生了一定的稀釋作用［4］，造成標本血清中原有成分濃度降低；②紅細胞中的部分成分溶解到血清中干擾結(jié)果反應(yīng)，如對葡萄糖氧化酶的活性抑制及檢驗中試劑的化學(xué)反應(yīng)等。

標本溶血會導(dǎo)致臨床常用生化項目指標偏差，因此，為減少檢驗失誤及誤差，提高檢驗結(jié)果的準確性，一旦發(fā)現(xiàn)有溶血標本，應(yīng)立即采取相應(yīng)解決措施，如對輕度溶血標本檢驗結(jié)果進行較正，甚至重新抽取血標本；也可從方法學(xué)方面減少甚至克服溶血干擾，比如血紅蛋白（HB）對吸光度的干擾可通過設(shè)置樣品空白或改用雙波長比色來解決。

綜上，隨著近年全自動生化分析儀的快速普及，血清標本是否溶血的檢驗已成為臨床生化項目過程中進行質(zhì)量監(jiān)控的重要環(huán)節(jié)。

［1］莊俊華.臨床生化檢驗技術(shù)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009.

［2］季國忠.臨床檢驗診斷解析［M］.南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2011.

［3］孔祥明.臨床檢驗正常參考值手冊［M］.北京：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社，2002.

［4］張秀明.臨床檢驗標本采集手冊［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2011.

［5］張秀明，楊志釗，楊有業(yè).臨床基礎(chǔ)檢驗——質(zhì)量管理與標準操作程序［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2010.

［6］李世榮，孫明強，趙超.血液學(xué)檢驗分冊［M］.北京：軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社，2007.

［7］本社.紅細胞沉降率測定參考方法［M］.北京：中國標準出版社，2011.