夏 艷，趙海泉，張 莉

（1.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，安徽 合肥230061；2.皖西學(xué)院 生物與制藥工程學(xué)院，安徽 六安237012）

紫萁（Osmunda japonica Thunb）屬紫萁科紫萁屬多年生草本蕨類植物［1］，別名老虎牙、紫萁貫眾等［2］。其嫰葉干制后稱為“薇菜”，并具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，是人們喜愛的一種山野菜［3］。黃酮類物質(zhì)具有抗氧化、抗菌、抗過敏降血糖、降血脂等功能，具有廣闊開發(fā)前景［4］。本研究對(duì)不同生活時(shí)期紫萁的不同部位進(jìn)行黃酮含量比較研究，為紫萁黃酮的開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

紫萁植株分別于2008年4月22日和5月7日采于安徽省金寨縣的響洪甸水庫南邊的山地。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器

TU-1901紫外可見光分光光度計(jì)（北京普析通用儀器設(shè)備有限公司）；101AS-2型不銹鋼數(shù)顯電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海浦東躍欣科學(xué)儀器廠）；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）等。

1.2.2 試劑

蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙醇、無水乙醚等均為國產(chǎn)分析純。

1.3 紫萁黃酮類化合物的提取［6］

將干燥后的各生長(zhǎng)期的樣品分別稱取約3g，用乙醚脫脂后用70%乙醇，在90℃水浴中回流浸提，浸提固液比第一次采用1∶15（g∶ml），以后每次固液比為1∶7（g∶ml），浸提時(shí)間每次均為2h。共浸提11次，收集11次浸提液與250ml容量瓶中，并用70%乙醇定容至250ml。

1.4 提取液中黃酮類化合物含量的測(cè)定［7］

采用陳乃富等人［7］的亞硝酸鈉-硝酸鋁比色法。

由標(biāo)準(zhǔn)系列的測(cè)定得回歸方程：Y＝12.064 X-0.018，相關(guān)系數(shù)r＝0.9996

首先，在進(jìn)行深度校企合作時(shí)，應(yīng)組織學(xué)生到相關(guān)企業(yè)進(jìn)行實(shí)習(xí)，并邀請(qǐng)工程造價(jià)一線從業(yè)人員對(duì)企業(yè)內(nèi)部業(yè)務(wù)進(jìn)行講解。通過實(shí)訓(xùn)的方式給學(xué)生營(yíng)造真實(shí)的操作環(huán)境，使其對(duì)實(shí)際的業(yè)務(wù)內(nèi)容有直觀的了解。其次，在企業(yè)設(shè)置并完善實(shí)習(xí)生制度。應(yīng)根據(jù)實(shí)習(xí)生的實(shí)際情況進(jìn)行分組，要合理利用已建或在建的相關(guān)工程資料來檢驗(yàn)學(xué)生的工程造價(jià)技能，并利用激勵(lì)和淘汰機(jī)制要求學(xué)生在規(guī)定時(shí)間內(nèi)獨(dú)立完成相應(yīng)的工程計(jì)量和計(jì)價(jià)任務(wù)，采取優(yōu)勝劣汰的方式，最終優(yōu)秀畢業(yè)實(shí)習(xí)生獲得與企業(yè)簽訂勞動(dòng)合同的機(jī)會(huì)。在此過程中，學(xué)生通過實(shí)際工程獲得了鍛煉與實(shí)習(xí)的機(jī)會(huì)。

提取液中黃酮類化合物的測(cè)定：取一定量的粗黃酮提取液在6 000r／min下離心10min，取上層清液測(cè)定其黃酮含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 同生長(zhǎng)期不同部位的黃酮含量差異

Ⅰ期和Ⅱ期部分器官?zèng)]有完全形成，因此不同部位的黃酮含量差異未進(jìn)行分析。

2.1.1 生長(zhǎng)Ⅲ期紫萁各部位的黃酮含量

生長(zhǎng)期Ⅲ紫萁各部位黃酮含量見表1。從表1可以看出，紫萁根狀莖的黃酮含量很高，葉片、植株地上部分（整體）和葉柄的黃酮含量近似且較低。以植株地上部分（整體）為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較分析，與根狀莖的黃酮含量差異極顯著，而與其他部分比較差異不顯著。

表1 紫萁生長(zhǎng)Ⅲ期黃酮含量結(jié)果分析（S）

表1 紫萁生長(zhǎng)Ⅲ期黃酮含量結(jié)果分析（S）

注：＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁部位 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（%）植株地上部分（整體）3.0023±0.0003 0.1941±0.0033 1.498±0.0432葉柄部分 3.0016±0.0002 0.1738±0.0023 1.320±0.0347葉片部分 3.0014±0.0002 0.1709±0.0030 1.568±0.0244根狀莖 3.0042±0.0004 0.5574±0.0038 3.531±0.0337＊＊

2.1.2 生長(zhǎng)Ⅳ期紫萁各個(gè)部位的黃酮含量

生長(zhǎng)期Ⅳ各部位的黃酮含量見表2。從表2可以看出，紫萁葉片和植株地上部分（整體）的黃酮含量近似且較高；葉柄部分的黃酮含量低。以植株地上部分（整體）為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較分析，與葉柄的黃酮含量差異顯著；與葉片部分比較差異不顯著。

表2 紫萁生長(zhǎng)Ⅳ期黃酮含量結(jié)果分析（S）

表2 紫萁生長(zhǎng)Ⅳ期黃酮含量結(jié)果分析（S）

注：＊差異顯著（P＜0.05）

紫萁部位 凈重 （g）吸光度（A）黃酮含量（%）植株地上部分（整體）3.0048±0.0002 0.1721±0.0031 1.2437±0.0623 3.0059±0.0004 0.1438±0.0025 1.1243±0.0241葉柄部分 3.0047±0.0001 0.1156±0.0020 0.8749±0.0433＊葉片部分

2.1.3 生長(zhǎng)Ⅴ期紫萁各個(gè)部位的黃酮含量

生長(zhǎng)Ⅴ期各部位的黃酮見表3。從表3可以看出，紫萁根狀莖的黃酮含量最高，其次是葉片部分和植株的地上部分，葉柄部分的黃酮含量最低。以植株地上部分（整體）為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較分析，與葉柄、葉片和根狀莖的黃酮含量差異都極顯著。

表3 紫萁生長(zhǎng)Ⅴ期黃酮含量結(jié)果分析（S）

表3 紫萁生長(zhǎng)Ⅴ期黃酮含量結(jié)果分析（S）

注：＊＊差異極顯著（P﹤0.01）

紫萁部位 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（%）植株地上部分3.0031±0.0004 0.3456±0.0031 2.7233±0.0422葉柄部分 3.0044±0.0002 0.1982±0.0023 1.3652±0.0541＊＊葉片部分 3.0087±0.0004 0.5246±0.0035 4.0438±0.0473＊＊根狀莖 3.0064±0.0003 0.8969±0.0014 8.1223±0.0235＊＊

2.1.4 生長(zhǎng)Ⅵ期的紫萁各個(gè)部位的黃酮含量

生長(zhǎng)期Ⅵ各部位的黃酮見表4。從表4可以看出，紫萁孢子部分的黃酮含量最高；葉柄部分的黃酮含量最低。以植株地上部分（整體）為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較分析，與葉柄和孢子的黃酮含量差異都極顯著。

表4 紫萁生長(zhǎng)Ⅵ期黃酮含量結(jié)果分析（S）

表4 紫萁生長(zhǎng)Ⅵ期黃酮含量結(jié)果分析（S）

注：＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁部位 凈重 （g）吸光度（A）黃酮含量（%）植株地上部分3.0031±0.0002 0.3548±0.0010 2.5749±0.0137葉柄部分 3.0043±0.0001 0.1870±0.0025 1.4153±0.0347＊＊孢子 3.0043±0.0002 0.6288±0.0025 4.6204±0.0339＊＊

2.2 同一部位不同生長(zhǎng)期的黃酮含量差異

2.2.1 不同生長(zhǎng)期的紫萁植株地上部分的黃酮含量不同生長(zhǎng)期的紫萁植株地上部分的黃酮含量如表5所示。從表5可以看出，在紫萁前兩個(gè)生長(zhǎng)期植株地上部分的黃酮含量逐漸增加，在生長(zhǎng)期Ⅲ和生長(zhǎng)期Ⅳ時(shí)，黃酮含量急劇下降，隨后在生長(zhǎng)期Ⅴ和生長(zhǎng)期Ⅵ時(shí)，黃酮含量又逐漸增加。以植株地上部分生長(zhǎng)期Ⅳ（含量最低）為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較分析，與生長(zhǎng)期Ⅲ有顯著差異；與其他幾組有極顯著差異。

2.2.2 不同生長(zhǎng)期的紫萁葉柄部分的黃酮含量

不同生長(zhǎng)期的紫萁葉柄部分的黃酮含量如表6所示。從表6可以看出，紫萁在生長(zhǎng)期Ⅳ葉柄部分的黃酮含量最低，其他各期都較高且含量相近。以生長(zhǎng)期Ⅳ（含量最低）為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較分析，與其他幾組有極顯著差異。

表5 紫萁植株地上部分不同生長(zhǎng)期黃酮含量結(jié)果分析（S）

表5 紫萁植株地上部分不同生長(zhǎng)期黃酮含量結(jié)果分析（S）

注：＊差異顯著（P＜0.05）；＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁生長(zhǎng)期 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（%）生長(zhǎng)期Ⅰ 3.0024±0.0001 0.2698±0.0034 2.2932±0.0347＊＊生長(zhǎng)期Ⅱ 3.0052±0.0004 0.2139±0.0024 3.0042±0.0418＊＊生長(zhǎng)期Ⅲ 3.0023±0.0003 0.1941±0.0033 1.498±0.0432＊生長(zhǎng)期Ⅳ 3.0059±0.0004 0.1438±0.0025 1.1239±0.0241生長(zhǎng)期Ⅴ 3.0031±0.0004 0.3456±0.0031 2.7233±0.0422＊＊生長(zhǎng)期Ⅵ 3.0031±0.0002 0.3548±0.0010 2.5749±0.0137＊＊

表6 紫萁葉柄部部分不同生長(zhǎng)期黃酮含量結(jié)果分析（S）

表6 紫萁葉柄部部分不同生長(zhǎng)期黃酮含量結(jié)果分析（S）

注：＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁生長(zhǎng)期 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（℅）生長(zhǎng)期Ⅲ 3.0016±0.0002 0.1738±0.0023 1.320±0.0347＊＊生長(zhǎng)期Ⅳ 3.0047±0.0001 0.1156±0.0020 0.87±0.0433生長(zhǎng)期Ⅴ 3.0044±0.0002 0.1982±0.0023 1.3652±0.0541＊＊生長(zhǎng)期Ⅵ 3.0043±0.0001 0.1870±0.0025 1.4153±0.0347＊＊

2.2.3 不同生長(zhǎng)期紫萁葉片部分的黃酮含量差異

不同生長(zhǎng)期的紫萁葉片部分的黃酮含量如表7所示。從表7可以看出，紫萁生長(zhǎng)期Ⅳ葉片部分的黃酮含量最低，生長(zhǎng)期Ⅴ最高。以生長(zhǎng)期Ⅳ（含量最低）為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較分析，與生長(zhǎng)期Ⅲ有顯著差異；與生長(zhǎng)期Ⅴ有極顯著差異。

表7 紫萁葉片部部分不同生長(zhǎng)期黃酮含量結(jié)果分析（S）

表7 紫萁葉片部部分不同生長(zhǎng)期黃酮含量結(jié)果分析（S）

注：＊差異顯著（P＜0.05）；＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁生長(zhǎng)期 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（%）生長(zhǎng)期Ⅲ 3.0014±0.0002 0.1709±0.0030 1.568±0.0244＊生長(zhǎng)期Ⅳ 3.0048±0.0002 0.1721±0.0031 1.2437±0.0623生長(zhǎng)期Ⅴ 3.0087±0.0004 0.5246±0.0035 4.0438±0.0473＊＊

2.2.4 不同生長(zhǎng)期紫萁根狀莖部分的黃酮含量差異

不同生長(zhǎng)期的紫萁根狀莖部分的黃酮含量如表8所示。從表8可以看出，紫萁根狀莖部分的黃酮含量整體較高；其中紫萁生長(zhǎng)期Ⅴ的黃酮含量很高，紫萁生長(zhǎng)期Ⅲ較低。以紫萁生長(zhǎng)期Ⅲ（含量最低）為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較分析，與紫萁生長(zhǎng)期Ⅴ有極顯著差異。

表8 紫萁根狀莖部分不同生長(zhǎng)期黃酮含量結(jié)果分析（S）

表8 紫萁根狀莖部分不同生長(zhǎng)期黃酮含量結(jié)果分析（S）

注：＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁生長(zhǎng)期 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（%）3.0042±0.0004 0.5574±0.0038 3.5312±0.0337生長(zhǎng)期Ⅴ 3.0064±0.0003 0.8969±0.0014 8.1223±0.0235生長(zhǎng)期Ⅲ＊＊

3 小結(jié)

從以上分析結(jié)果可以看出，紫萁葉柄部分的黃酮含量普遍很低，紫萁根狀莖部分的黃酮含量普遍很高。在同一部位的不同生長(zhǎng)期，紫萁植株地上部分的黃酮含量在生長(zhǎng)期Ⅰ和生長(zhǎng)期Ⅱ逐漸增加，在隨后紫萁生長(zhǎng)期Ⅲ和生長(zhǎng)期Ⅳ的黃酮含量一直降低，在紫萁生長(zhǎng)期Ⅴ的黃酮含量又升高，在生長(zhǎng)期Ⅵ的黃酮含量又下降；葉片部分的黃酮含量隨生長(zhǎng)期的變化而逐漸升高，在紫萁生長(zhǎng)期Ⅴ黃酮含量達(dá)到最高；葉柄部分的黃酮含量一直較低，隨生長(zhǎng)期的變化不明顯；在生長(zhǎng)期Ⅵ的孢子體中，孢子部分的黃酮含量較高。綜上可知，紫萁在同一生活時(shí)期不同部位之間的黃酮含量是存在差異的，具體機(jī)理還有待于進(jìn)一步研究。

［1］吳兆倫，秦仁昌.中國蕨類植物科屬志［M］.北京：科學(xué)出版社，1991.

［2］全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編（上冊(cè)）［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1983.

［3］樓之岑，石碧，王浴生，等.常用中藥材品種整理和質(zhì)量研究［M］.北京：北京醫(yī)科大學(xué)、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1995.

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［5］張莉，陳乃富，吳美.蕨根莖及老嫩葉中黃酮含量的比較［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2006，32（11）：43-46.

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