汪濤 楊大偉 高永喜 胡衛(wèi)東 曾凡波

(1.廣州軍區(qū)武漢療養(yǎng)院，430074；2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，430030)

2009年，為確保藥品使用的安全性，根據(jù)軍區(qū)藥檢所的要求，我院對已經(jīng)于2006年取得醫(yī)療單位制劑批準(zhǔn)文號：廣制字(2007)F13001的制劑“龍?zhí)俳罟瞧?，進(jìn)行了再申報(bào)。我院在華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院的幫助下，對龍?zhí)俳罟瞧M(jìn)行了急性毒性實(shí)驗(yàn)研究，現(xiàn)總結(jié)如下。

1 資料與方法

1.1 藥品 龍?zhí)俳罟瞧?，批號?90413，規(guī)格：0.3 g/片，由廣州軍區(qū)武漢療養(yǎng)院配制，臨床成人用量為4.5 g/d(口服3次/d，5片/次)。實(shí)驗(yàn)前取龍?zhí)俳罟瞧m量，用乳缽研磨，溶于蒸餾水中，調(diào)整其濃度，至其混懸液能勉強(qiáng)通過小鼠灌胃針頭，即最大濃度為0.25 g/mL。

1.2 動物 清潔級昆明種小鼠40只，體質(zhì)量(20±2)g，7周齡，雌雄各半。動物及飼料均由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量合格證號：SCXK(鄂)：2008-010。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 預(yù)實(shí)驗(yàn) 在進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)之前，進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，以便為正式實(shí)驗(yàn)提供依據(jù)。將12只小鼠隨機(jī)分為2組，雌雄各半，灌胃前禁食不禁水16 h。給藥組：以可供灌胃的最大濃度(0.25 g/mL)、小鼠灌胃可承受的最大體積(每10 g體質(zhì)量0.4 mL)1次灌給龍?zhí)俳罟瞧鞈乙?。給藥后常規(guī)飼養(yǎng)，觀察3 d?？瞻捉M灌胃等量蒸餾水，方法同給藥組。結(jié)果小鼠全部存活，因此，無法測出該中藥制劑的LD50，提示該中藥制劑藥毒性很低，是較安全的，故測定本藥對小鼠的最大耐受量[1]。

1.3.2 最大耐受量的測定 取小鼠40只，體質(zhì)量(20±2)g，雌雄各半，隨機(jī)分為給藥組和對照組，每組各20只；環(huán)境溫度為(18±2)℃，相對濕度為(70±5)%。飼以華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心生產(chǎn)的鼠用顆粒飼料，自由飲水。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，于禁食不禁水16 h后灌胃給受試藥物。第1組為給藥組，每只小鼠按40 mL/kg[2]灌胃給予龍?zhí)俳罟瞧鞈宜幰?約0.8 mL/只)，2次/d，每次用藥劑量為10 g/kg，2次總劑量為20 g/kg；第2組為對照組，每只小鼠灌胃給予蒸餾水0.8 mL，2次/d，2次總劑量為40 mL/kg。

給藥前稱重，給藥后立即觀察動物反應(yīng)情況，第1日觀察3次，以后每日觀察2次，連續(xù)觀察14 d，記錄動物皮膚、黏膜、毛色、眼睛、呼吸、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、自主行為等，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)稱取體質(zhì)量，并對小鼠進(jìn)行尸檢[2]，解剖觀察其心、肝、脾、肺、腎等主要器官的組織變化。

2 結(jié)果

2.1 毒性反應(yīng)情況 第1次給藥后，立即觀察，給藥組小鼠在給藥10 min后表現(xiàn)為活動減少、閉目，2 h后逐漸恢復(fù)正常；第2次給藥后給藥組小鼠表現(xiàn)同上，但持續(xù)時(shí)間延長至3 h恢復(fù)正常。對照組小鼠灌胃給予蒸餾水后無異常反應(yīng)；給藥組小鼠給藥24 h后未見其他異常反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)小鼠的皮膚、黏膜、毛色、眼睛、呼吸、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、自主行為等正常，繼續(xù)觀察14 d，每天觀察2次(08：00和20：00)。

在觀察的14 d中給藥組小鼠同對照組小鼠一樣未出現(xiàn)叫聲異常、震顫、驚厥、運(yùn)動失調(diào)、流涎、流淚、流鼻涕、呼吸困難、心跳過強(qiáng)或過弱、腹瀉、便秘、腸脹氣等現(xiàn)象，未見其他異常反應(yīng)，給藥組小鼠的皮膚、黏膜、毛色、眼睛、呼吸、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、自主行為等正常；給藥14 d內(nèi)小鼠未出現(xiàn)死亡情況。

2.2 給藥前后體質(zhì)量及進(jìn)食量變化情況 對照組與給藥組小鼠體質(zhì)量增長比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，表1)，對照組與給藥組小鼠進(jìn)食量變化比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05，表2)，提示龍?zhí)俳罟瞧瑢π∈蟮募毙远拘苑磻?yīng)不明顯。

表1 龍?zhí)俳罟瞧畲蠼o藥量灌胃前、后小鼠體質(zhì)量變化(n=20，)

表1 龍?zhí)俳罟瞧畲蠼o藥量灌胃前、后小鼠體質(zhì)量變化(n=20，)

組別 給藥前 第2天 第4天 第6天 第8天 第10天 第12天 第14天對照組 ♀ 20.3±0.8 24.5±1.8 25.8±1.9 27.9±2.1 29.1±2.2 30.0±2.4 30.7±2.0 31.6±1.8♂ 21.1±1.4 23.4±1.9 24.6±1.5 25.8±1.9 26.3±1.7 27.6±1.7 28.7±1.4 30.1±1.9給藥組 ♀ 18.8±1.2 20.6±1.5 21.7±1.9 23.4±1.6 24.6±2.2 25.8±2.4 26.4±2.2 26.5±2.4♂ 21.6±1.3 22.1±1.4 24.3±1.7 26.5±1.8 28.4±1.8 29.8±2.3 31.3±2.1 32.2±2.1小鼠體質(zhì)量(g)

表2 龍?zhí)俳罟瞧畲蠼o藥量灌胃前、后小鼠進(jìn)食量變化(n=20，g)

2.3 內(nèi)臟結(jié)構(gòu)觀察 實(shí)驗(yàn)第14天稱重后逐只處死并解剖，肉眼觀察肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、卵巢、子宮、精囊、前列腺、睪丸、胃、腸及胸腔、腹腔，各器官均未出現(xiàn)體積、顏色、質(zhì)地明顯改變。

3 結(jié)論

龍?zhí)俳罟瞧娜擞脛┝繛椋?片/次，3次/d，共15片，總劑量為4.5 g/d。以體質(zhì)量計(jì)算，人劑量為0.075 g/(kg·d)，小鼠劑量20 g/(kg·d)，實(shí)驗(yàn)小鼠的給藥劑量相當(dāng)于臨床人用劑量的266.7倍，未見實(shí)驗(yàn)小鼠有毒性反應(yīng)，可見本品安全性較高。

[1]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：112.

[2]國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品評審中心.Z GPT2-1中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2005.