王遠明 杜惠容 陳 恒 張 輝

四川省資中資州醫(yī)院兒科，四川資中 641200

16S rRNA基因檢測對新生兒敗血癥診斷價值的Meta分析

王遠明 杜惠容 陳 恒 張 輝

四川省資中資州醫(yī)院兒科，四川資中 641200

目的16S rRNA基因檢測是診斷新生兒敗血癥的方法之一，但是尚無研究綜合評價其診斷價值，本研究擬系統(tǒng)評價16S rRNA基因檢測在新生兒敗血癥中的診斷價值。 方法 在Cochrane圖書館、Medline、Embase、Science Direct、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、萬方、維普等數(shù)據(jù)庫中查找利用16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥的文獻。QUADAS工具評價納入文獻的質(zhì)量，Meta-Disc 1.4軟件檢驗異質(zhì)性并根據(jù)其結(jié)果選擇相應(yīng)效應(yīng)模型計算納入研究的合并敏感性、特異性等指標，繪制匯總受試者工作特征（SROC）曲線，綜合評價16S rRNA基因檢測的診斷價值。 結(jié)果 共有8篇文獻共計2 543例新生兒納入本次研究，Meta分析顯示16S rRNA基因檢測對新生兒敗血癥的合并診斷價值分別為：敏感度為0.93，特異度為0.97，陽性似然比為25.12，陰性似然比為0.08，診斷比值比為323.40。SROC曲線下面積為0.99。 結(jié)論16S rRNA基因檢測中對新生兒敗血癥具有較高的診斷價值，可作為診斷新生兒敗血癥重要工具。

16S rRNA；新生兒敗血癥；Meta分析

新生兒敗血癥指新生兒期細菌進入血液循環(huán)并進行繁殖釋放毒素進而導致全身性感染，是導致新生兒死亡的重要的原因之一[1]。新生兒敗血癥發(fā)生率占活產(chǎn)兒的0.1%～1.0%，在早產(chǎn)兒中發(fā)生率更高，病死率為高達10%～50%，因此，早期診斷新生兒敗血癥是治療的關(guān)鍵[2]。新生兒敗血癥的臨床表現(xiàn)不典型，其診斷“金標準”仍依賴于血培養(yǎng)，該檢查敏感度低并且耗時長，難以早期診斷，臨床上正在探索新的診斷工具[3]。

細菌16S核糖體核糖核酸 （16S ribosomal ribonucleic acid，16S rRNA）基因具有高度保守性，在細菌鑒定中發(fā)揮重要作用，為臨床細菌感染提供了快速、靈敏的檢測方法[4]。正是鑒于此，臨床上正在開展16S rRNA基因檢測用于診斷新生兒敗血癥，并取得了不少進展[5]。利用16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥已有不少研究發(fā)表，本研究擬綜合評價16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥的準確性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

主要依據(jù)文獻的檢索與納入。檢索的主要數(shù)據(jù)庫包括：Cochrane 圖書館、Medline、Embase、Science Direct、 中國期刊全文數(shù)據(jù)庫、萬方、維普等數(shù)據(jù)庫，并對入選文獻的參考文獻進行手工檢索。檢索起始日期不限，截止日期到2012年4月。主要檢索詞包括：16S rRNA、neonatal sepsis、新生兒敗血癥等。只有同時提供利用16S rRNA診斷新生兒敗血癥的敏感度和特異度的并且樣本量大于20的臨床研究才能納入。對于有重復(fù)發(fā)表可能的文章，經(jīng)王遠明、杜惠容兩名評價員協(xié)商后選用質(zhì)量最優(yōu)的文獻。

1.2資料提取與質(zhì)量評價

由上述兩名評價員參照診斷性試驗準確性質(zhì)量評價工具（quality assessment of diagnostic accuracy studies,QUADAS）評價文獻質(zhì)量，分別對14個條目的判斷標準進行評價[6]。提取文獻中的研究信息主要包括：作者、發(fā)表時間、患者數(shù)量、金標準、檢測方法、靈敏度與特異度等臨床背景資料，直接獲取或根據(jù)文獻提供的信息計算四格表數(shù)據(jù)。所有操作均獨立進行并交叉核對，如遇分歧，以小組討論的方法解決。

1.3 統(tǒng)計學方法

所有操作按照診斷性Meta分析的標準操作指南進行[7]。分別提取各獨立研究的靈敏度與特異度，繪制匯總受試者工作特征曲線（SROC）曲線[8]，評估16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥的總診斷精度?？ǚ綑z驗對敏感度、特異度進行異質(zhì)性分析并根據(jù)其檢測結(jié)果選擇相關(guān)的效應(yīng)模型。以I2評價異質(zhì)性大小，I2≥50%提示各研究之間存在顯著異質(zhì)性。根據(jù)選擇的效應(yīng)模型計算納入研究的合并敏感度、特異度、陽性似然比、陰性似然比和診斷比值比等指標。本Meta分析采用Meta-Disc 1.4軟件。

2 結(jié)果

2.1 納入文獻特點及質(zhì)量評價

經(jīng)兩名評價員獨立評價，共有8篇文獻共計2 543例患兒符合本次Meta分析的要求[9-16]，發(fā)表時間跨度為1998～2010年，包含6篇中文文獻，2篇英文文獻。所有研究均采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）法檢測血液標本中的16S rRNA。所有納入文獻均能提供或計算出敏感度和特異度，納入研究的基本臨床資料、樣本量、質(zhì)量評價等信息詳見表1。

質(zhì)量評價發(fā)現(xiàn)各研究之間差距較大，QUADAS評分在7～12分，有4篇文章的QUADAS評分≥10分。

2.2 異質(zhì)性檢驗

異質(zhì)性檢驗的目的在于評價統(tǒng)計合并不同研究的精確估計是否恰當并根據(jù)其檢驗結(jié)果選擇合適的效應(yīng)模型。敏感度、特異度的 χ2檢驗值分別為 17.97（P=0.01，I2=61.1%）和10.81（P=0.15，I2=35.3%），表明各個研究的敏感度存在明顯的異質(zhì)性，綜合考慮本次Meta分析采用隨機效應(yīng)模型。

2.3 Meta分析

將納入的研究數(shù)據(jù)進行合并，合并敏感度為0.93[95%CI（0.89，0.96）]（圖 1），特異度為 0.96[95%CI（0.96，0.97）]（圖2），陽性似然比為 25.12[95%CI（17.40，36.27）]，陰性似然比為0.08[95%CI（0.04，0.16）]，合并診斷比值比為 323.40[95%CI（131.59，794.83）]。16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥的SROC曲線見圖3。SROC曲線是對試驗特性的總體概括，曲線越靠近左上角，曲線下面積（AUC）越接近于1，該診斷性試驗的診斷效能則越高。本次Meta分析顯示靈敏度與特異度最大交點的均值為0.96，AUC為0.99，提示該試驗的總診斷效率非常高。

3 討論

本次Meta分析共納入8項研究共計2 543例新生兒，其中包括224例新生兒敗血癥患兒和2 319例對照新生兒。Meta分析結(jié)果顯示16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥的合并敏感度為0.93，特異度為0.96，SROC曲線分析顯示AUC為0.99,提示16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥的準確度非常高，在臨床篩查和確診方面都具有非常高的價值，可作為新生兒敗血癥的可靠診斷工具。

圖1 16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥敏感度的森林圖

圖2 16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥特異度的森林圖

本文中筆者分別計算了反應(yīng)診斷性試驗準確性的幾個指標，診斷比值比其定義為病例組中診斷試驗陽性的比值和對照組中診斷試驗陽性的比值，其值越大診斷性試驗的診斷價值越大[17]，本研究的診斷比值比為323.40，提示16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥整體診斷效率相對較高。陽性似然比、陰性似然比也是診斷效率的測量指標[18]，其中陽性似然比為25.12，表明新生兒敗血癥者中16S rRNA基因檢測的陽性率大約是對照組的25倍。陰性似然比為0.08，提示16S rRNA基因檢測結(jié)果若為陰性，則罹患新生兒敗血癥的可能性僅為8%，綜合這兩個指標對于診斷和排除新生兒敗血癥有很好的臨床價值。

圖3 16S rRNA基因檢測的匯總受試者工作曲線

SROC曲線是對診斷性試驗的總體概括[19]，圖3中每個點表示納入的獨立研究，體現(xiàn)了特異度與敏感度二者之間的關(guān)系，Q值是試驗總體效能的測量指標，從SROC曲線左上角到右下角做一連線，與曲線的交點即為Q值，本次Meta分析的Q值為0.96，表示16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥的最大聯(lián)合敏感度和特異度為0.96，SROC曲線下面積為為0.99，提示16S rRNA基因檢測具有非常高的臨床診斷價值。

本次Meta分析雖然進行了全面的文獻檢索，嚴格按照診斷性Meta分析操作指南進行[20]，但是仍有值得探討之處。本次Meta分析由于語言限制，只納入了中英文文獻，存在語言偏倚；同時考慮到由于陽性結(jié)果的研究更容易發(fā)表的緣故，具有潛在的發(fā)表偏倚，這些偏倚可能會對Meta分析的結(jié)果造成影響。異質(zhì)性分析顯示各研究之間存在敏感度異質(zhì)性，可能與所采用的具體技術(shù)手段、試驗方法、所處的時代有差異有關(guān)。目前利用16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥的手段相對比較成熟，其診斷效率較高，臨床上在充分結(jié)合新生兒臨床癥狀、其他檢查結(jié)果的同時，盡早開展16S rRNA基因檢測有助于臨床上早期確診新生兒敗血癥，進而早期干預(yù)，有望降低患兒的死亡率。

綜上所述，筆者通過Meta分析從循證醫(yī)學的角度探索了16S rRNA基因檢測對新生兒敗血癥的診斷價值，結(jié)果顯示16S rRNA基因檢測診斷新生兒敗血癥具有高度的敏感性和特異性，可作為診斷新生兒敗血癥的有效工具。

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Meta-analysis of value of 16S rRNA gene detection in diagnosis of neonatal sepsis

WANG YuanmingDU HuirongCHEN HengZHANG Hui
Department of Pediatrics,Zizhong Hospital of Zizhong,Sichuan 641200

Objective16S rRNA gene detection is one of the methods for the diagnosis of neonatal sepsis,but there is not any study evaluating its diagnostic value comprehensively.So this study aims to evaluate the diagnostic value of 16S rRNA gene detection in neonatal sepsis comprehensively.MethodsLiterature on diagnosis of neonatal sepsis using the 16S rRNA gene detection was searched in Cochrane Library,Medline,Embase,Science Direct,CNKI,Wanfang,VIP and other databases.QUADAS tool was used to evaluate the quality of literature;Meta-Disc 1.4 software was used to test heterogeneity,based on which the relevant effect model was selected to calculate the combined sensitivity,specificity and other indicators of the literature,the summary receiver operating characteristic(SROC)curve was drawn and the diagnostic value of 16S rRNA gene detection was evaluated comprehensively.ResultsA total of 8 pieces of literature including 2 543 neonates were included in this study.Meta-analysis showed that the combined diagnostic value of 16S rRNA gene detection in neonatal sepsis was as follows:sensitivity was 0.93,specificity was 0.97,positive likelihood ratio was 25.12,negative likelihood ratio was 0.08,diagnostic ratio was 323.40.Area under the SROC curve was 0.99.Conclusion16S rRNA gene detection has high diagnostic value in neonatal sepsis and therefore can be used as an important tool for the diagnosis of neonatal sepsis.

16S rRNA;Neonatal sepsis;Meta-analysis

R722.13

A

1673-7210（2012）08（c）-0011-03

王遠明（1963-），男，漢族，本科，副主任醫(yī)師，長期從事兒科疾病的治療與研究。

；TP為真陽性；FP為假陽性；FN為假陰性；TN為真陰性；PCR為聚合酶鏈反應(yīng)；QUADAS為診斷性試驗質(zhì)量評價工具

編號* 研究者 時間（年） 檢驗方法 診斷標準 TP FP FN 9 10 11 12 13 14 15 16俞惠民童美琴Shang S吳亦棟張芳Dutta S樓金吐張勤勤1998 2004 2005 2007 2008 2009 2009 2010 PCR PCR PCR PCR PCR PCR PCR PCR TN QUADAS（分）48血培養(yǎng)、臨床診斷血培養(yǎng)血培養(yǎng)血培養(yǎng)血培養(yǎng)、臨床診斷血培養(yǎng)血培養(yǎng)血培養(yǎng)882 0 7992 10 11 12 34 50 32 9 3271 981 08 60007200 70 268 155 787 63 183 470 248 297

2012-04-17 本文編輯：谷俊英）