邱 麗 丁祥武 (襄陽市中心醫(yī)院消化科，湖北 襄陽 441021)

全球每年新發(fā)原發(fā)性肝癌約26萬例，是目前全球腫瘤相關(guān)死亡的第三位原因，其女性標(biāo)準(zhǔn)化死亡率為5.61/10萬，男性標(biāo)準(zhǔn)化死亡率達(dá)14.52/10萬〔1〕。目前認(rèn)為外科手術(shù)仍是治療肝癌的首選方法和最有效措施。但是手術(shù)后的遠(yuǎn)期療效差，肝癌復(fù)發(fā)率高，轉(zhuǎn)移和侵襲是影響預(yù)后的兩大因素〔2〕。本文主要研究鈣囊素(S100 A11)及基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-9與肝癌患者預(yù)后相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年3月至2011年12月我院肝癌患者50例。均經(jīng)過臨床病理檢查、CT、B超及腫瘤標(biāo)志物實(shí)驗(yàn)室檢查證實(shí)。其中男性28例，女性22例;年齡36～73〔平均(52.3±2.5)〕歲;臨床分期：Ⅰ期14例，Ⅱ期30例，Ⅲ期6例。

1.2 方法 應(yīng)用免疫組化染色試劑盒PV-9000檢測S100 A11的表達(dá)，特異性一抗為兔抗人S100 A11多克隆抗體，陰性對照采用PBS替代第一抗體。以光鏡下半定量結(jié)果綜合考慮染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)。得分0～2分為陰性表達(dá)(－);3分為(+);4分為(?);5分以上為(?)。陽性表達(dá)為+～?。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和免疫組織化學(xué)方法檢測MMP-9，根據(jù)細(xì)胞質(zhì)染色程度和染色百分率進(jìn)行評分，得分0分為(－)，1～4分為(+)，5～8分為(?)，9～12分為(?)。陰性表達(dá)為－～+，陽性表達(dá)為?～?。

1.3 隨訪 所有患者于手術(shù)后定期回門診隨訪，檢查恢復(fù)情況，隨訪時(shí)間為42個(gè)月。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，對預(yù)后因素進(jìn)行Cox回歸分析。

2 結(jié)果

2.1 S100 A11及MMP-9的表達(dá) 行根治性切除手術(shù)后的肝癌患者S100 A11表達(dá)總陽性數(shù)明顯小于手術(shù)前(P＜0.05)行根治性切除手術(shù)后的肝癌患者M(jìn)MP-9表達(dá)總陽性數(shù)明顯小于手術(shù)前(P＜0.05)。見表1。

2.2 復(fù)發(fā)因素分析 將臨床病理因素、S100 A11水平和MMP-9水平納入Cox模型進(jìn)行多因素分析，結(jié)果S100 A11水平、MMP-9水平、術(shù)前播散結(jié)節(jié)、微轉(zhuǎn)移灶是影響肝癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素。見表2。

表1 S100 A11及MMP-9的表達(dá)與患者特征的關(guān)系〔n(%)〕

表2 影響肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)因素的多因素分析

3 討論

腫瘤分為良性腫瘤和惡性腫瘤，兩者的主要區(qū)別就是惡性腫瘤有轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的傾向〔3〕。有各種屬于不同家族的蛋白酶參與腫瘤的轉(zhuǎn)移，包括MMP、半胱氨酸蛋白酶、絲氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶和蘇氨酸蛋白酶。腫瘤細(xì)胞把這些酶作為降解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)、清除轉(zhuǎn)移障礙的工具〔4〕。MMP-9與腫瘤關(guān)系最為密切，在腫瘤組織中有高活性及高表達(dá)，甚至與腫瘤的復(fù)發(fā)及預(yù)后密切相關(guān)。MMP-9具有降解ECM和基底膜、抑制腫瘤細(xì)胞凋亡、激活生長因子、促進(jìn)血管生成因子的釋放等多種生物學(xué)功能〔5〕。MMP-9在多種惡性腫瘤中都呈高表達(dá)，參與腫瘤的新生血管形成，與惡性腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)。

S100鈣連接蛋白家族包括20多個(gè)不同的成員蛋白，含有1個(gè)EF手型鈣離子結(jié)合區(qū)，能夠與鈣離子結(jié)合發(fā)生構(gòu)象改變，之后與相應(yīng)的靶蛋白結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)〔6〕。S100 A11蛋白表達(dá)主要位于細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中，著色后根據(jù)表達(dá)強(qiáng)度不同被染色為淡黃、棕黃至棕褐色不等。S100基因簇在腫瘤細(xì)胞中經(jīng)常存在缺失、重排、重疊、易位等改變，預(yù)測可能與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，在腫瘤中會出現(xiàn)表達(dá)增高的現(xiàn)象〔7〕。

本研究可見S100 A11和MMP-9的總陽性表達(dá)情況與肝癌病情有明顯的相關(guān)性。S100 A11和MMP-9可作為預(yù)示肝癌治療手術(shù)后復(fù)發(fā)及長期生存的風(fēng)險(xiǎn)分子指標(biāo)。癌細(xì)胞表達(dá)MMP-9水平伴隨腫瘤包膜侵犯而增高，與肝癌的癌栓形成密切相關(guān)。腫瘤細(xì)胞可能通過增加MMP-9的表達(dá)，增強(qiáng)侵襲性而易于突破腫瘤包膜，形成播散結(jié)節(jié)，肝內(nèi)的播散與轉(zhuǎn)移得到加速〔8〕。手術(shù)后S100 A11和MMP-9在肝細(xì)胞癌組織中表達(dá)明顯減少，說明可以依據(jù)其表達(dá)水平評判治療效果，預(yù)估復(fù)發(fā)的可能性。肝癌屬于富血管腫瘤，具有易侵犯門脈系統(tǒng)、早期發(fā)生播散和轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)。S100 A11和MMP-9在肝細(xì)胞癌組織中的高表達(dá)說明在肝癌侵襲轉(zhuǎn)移中具有協(xié)同作用。

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5 陳 浩，李建生，王 偉，等.肝細(xì)胞癌患者血清ECMI、MMP-9和VEGF水平的變化及其意義〔J〕.實(shí)用肝臟病雜志，2010;13(6)：424-7.

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