明倩倩，游 勇，王 闖，張志元

(1長沙健硒保生物科技有限公司，長沙410022;2長沙市植保植檢站，長沙410013;3長沙學(xué)院生物工程與環(huán)境科學(xué)系，長沙410022)

桃，隸屬薔薇目，梅亞科，桃屬。桃軟腐病是由黑根霉菌(Rhizopus nigricans)引起初生淺褐色水漬狀圓形至不規(guī)則形病斑，擴(kuò)展很快，病部長出疏松的白色至灰白色棉絮狀霉層，致果實呈軟腐狀，后產(chǎn)生暗褐色至黑色菌絲、孢子囊及孢囊梗[1，2]。桃采收期集中在高溫的7、8月份，再加上貯運過程中易受損傷，很容易發(fā)生軟腐病，造成大量爛果[3]。因此嚴(yán)格把關(guān)保證桃安全貯藏，研究防治桃軟腐病的有效藥劑，減少初侵染對桃貯藏尤為重要。本試驗采用4種藥劑對桃軟腐病菌的抑菌能力進(jìn)行研究，旨在為果園病害防治和桃貯藏前的藥劑處理提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 桃軟腐病病原菌分離

取長有白色霉層的桃果實，采用組織分離法，在無菌條件下，切病健交界處組織成邊長為0.5 cm的小塊，放在培養(yǎng)皿中，用滅菌的鑷子夾小塊桃在75%酒精中消毒10 s，再用0.1%升汞液適量表面消毒1 min，再經(jīng)無菌水漂洗3次，過火焰去除部分水分后，放入培養(yǎng)基平板上，每個培養(yǎng)皿3～4塊組織均勻排放，將培養(yǎng)皿用封口膜封好，置于28℃培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)。36 h后選擇培養(yǎng)皿中長出黑根霉的菌落，在顯微鏡下檢測，確定為黑根霉后用接種鉤挑取一小塊菌絲，轉(zhuǎn)入試管斜面培養(yǎng)基中，置于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待長出白色菌絲后移入冰箱中冷藏保藏[4]。

1.2 4種殺菌劑對桃軟腐病菌的抑菌試驗

(1)供試藥劑及使用濃度。40%地?zé)o菌(阜城津金農(nóng)藥有限公司);20%五氯硝基苯(山西省臨汾有機化工廠);硫酸銅(分析純);生物農(nóng)藥水生康(長沙高新區(qū)千力農(nóng)業(yè)生物科技有限公司)。

(2)不同殺菌劑對桃軟腐病菌菌絲生長的影響試驗

試驗設(shè)5個處理，重復(fù)3次。處理1:40%地?zé)o菌2 g/L;處理2:20%五氯硝基苯2 g/L;處理3:硫酸銅(分析純)2 g/L;處理4:生物農(nóng)藥水生康2 g/L;處理5:對照組(無菌水)。

采用生長速率法[5]測定殺菌劑對桃軟腐病病菌的殺菌效果。首先將桃軟腐病菌活化，將試管中的菌種接種到培養(yǎng)基中，置于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)36 h后菌種即已活化。然后，將供試藥劑分別用無菌水稀釋成所需的濃度待用。在滅菌培養(yǎng)皿中倒入PDA培養(yǎng)基12 mL，培養(yǎng)基凝固后，取100 uL殺菌劑稀釋液倒入培養(yǎng)基中(直徑為75 mm)，用三角玻棒將藥液均勻涂布到培養(yǎng)基上。用打孔器(直徑為12 mm)制取已活化的病菌菌餅，菌絲面朝下接種于表面有藥的PDA培養(yǎng)基中央，置于28℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)黑暗培養(yǎng)。

(3)試驗結(jié)果調(diào)查。培養(yǎng)3 d后測量供試病菌在含不同藥劑培養(yǎng)基上的菌落直徑，與對照組比較計算各藥劑處理對菌落擴(kuò)展的生長抑制率[6]，分析比較不同殺菌劑對菌絲生長的影響。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同殺菌劑對桃軟腐病病菌菌絲生長的抑制效果

試驗結(jié)果表明，各處理對桃軟腐病菌的抑菌效果具有極顯著性差異，20%五氯硝基苯2 g/L對桃軟腐病菌的抑制效果最好，處理4對桃軟腐病菌也有一定的抑菌作用(表1)。

表1 不同殺菌劑對桃軟腐病病菌的抑制效果

2.2 不同濃度的20%五氯硝基苯的殺菌作用

根據(jù)上述不同殺菌劑培養(yǎng)皿中菌絲生長的情況，20%五氯硝基苯2 g/L的殺菌效果最好。為了進(jìn)一步探索20%五氯硝基苯抑菌效果的最佳濃度，研究了不同濃度的20%五氯硝基苯殺菌作用影響的試驗。結(jié)果表明:抑菌效果隨使用濃度的提高而增強，但當(dāng)濃度至2 g/L時，再提高濃度至4 g/L，抑菌效果增加值就很小了(表2)。因此，生產(chǎn)上使用20%五氯硝基苯最佳濃度為2 g/L。

表2 五氯硝基苯不同使用濃度的抑制效果

3 討論與小結(jié)

20%五氯硝基苯溶液對桃軟腐病的抑制效果最好，該化合物可有效地抑制菌絲的生長，最適宜的使用濃度為2 g/L。實際生產(chǎn)中，在冬季，桃樹要進(jìn)行枯枝清理并燒毀，減少初侵染來源，在春季噴施濃度2 g/L的20%五氯硝基苯溶液可以抑制病原真菌的生長，降低桃果實帶菌率，從而減少桃貯運期病害的發(fā)生，減少果實的腐爛損失。

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