江濤，張恩娟，樊莉，路勇，葛勤

（第三軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院藥劑科，重慶4 0 0 0 3 7）

美速靜膠囊的制備及其成型工藝考察

江濤＊，張恩娟，樊莉，路勇，葛勤#

（第三軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院藥劑科，重慶4 0 0 0 3 7）

目的：對(duì)原美速靜膠囊工藝進(jìn)行改進(jìn)，制定質(zhì)量控制方法，考察成型工藝。方法：采用熔融法將聚乙二醇（PEG）4 0 0 0與褪黑素制成固體分散體，粉碎后加入輔料制成膠囊。采用高效液相色譜法測(cè)定褪黑素的含量，考察美速靜膠囊的含量均勻度和溶出度，并測(cè)定內(nèi)容物的堆密度、休止角、臨界相對(duì)濕度。結(jié)果：褪黑素檢測(cè)濃度在4～2 4 μg·mL－1范圍內(nèi)與其峰面積積分值線性關(guān)系良好（r＝0.9 9 9 8），平均回收率為9 9.6%（RSD＝0.6 4%）。美速靜膠囊的含量均勻度均＜1 5.0，1 0 min內(nèi)溶出約9 0%。粉末堆密度為0.6 6 g·mL－1，休止角為2 3.8°，臨界相對(duì)濕度為6 0%。結(jié)論：建立的美速靜膠囊制備工藝可行，且質(zhì)量可控。

美速靜膠囊；褪黑素；固體分散體；質(zhì)量控制；高效液相色譜法

褪黑素或稱褪黑激素、松果體素，是由大腦松果體分泌的吲哚類激素[1]，具有誘導(dǎo)睡眠、調(diào)節(jié)生物鐘、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)、增強(qiáng)免疫力、抗氧化等生理功能，其水溶性差、半衰期短、生物利用度低[2]。固體分散體能增加水溶性差的藥物的溶解度，提高生物利用度，增加其療效。采用合適的制備方法，藥物能以微?；蚍肿有问骄鶆蚍稚⒂诨|(zhì)中，從而保證藥物在固體分散體中含量的均一性[3]。美速靜膠囊原工藝中是褪黑素與淀粉混合后填充膠囊，二者質(zhì)量比相差數(shù)十倍，不易混合均勻，且粉末流動(dòng)性不佳。根據(jù)褪黑素的理化性質(zhì)，筆者對(duì)工藝進(jìn)行改進(jìn)，先將褪黑素與聚乙二醇（PEG）4 0 0 0制成固體分散體，粉碎后細(xì)粉與淀粉、助流劑混合，從而使各組分間比例差距縮小，利于混合，且粉末流動(dòng)性增加。

1 儀器與試藥

ME2 3 5 S電子天平（德國(guó)Satoris公司）；ZY9 5 1 Q高效液相色譜儀（安捷倫科技有限公司）；L3 2 9 1 2 4電熱恒溫水浴鍋（上海醫(yī)療器械五廠）；LD-2 0 0粉碎機(jī)（常宏制藥機(jī)械設(shè)備廠）；ZRS-6型智能溶出試驗(yàn)儀（天津大學(xué)無(wú)線電廠）。

褪黑素（北京嘉康源科技發(fā)展有限公司，批號(hào)：0 9 1 2 2 8 0 1，純度：9 9.9%）；PEG 4 0 0 0（武漢鑫恒隆工貿(mào)有限責(zé)任公司，批號(hào)：2 0 0 9 1 0 2 5）；滑石粉（廣西龍勝華美滑石開(kāi)發(fā)有限公司，批號(hào)：0 9 0 1 2 1）；淀粉（曲阜市藥用輔料有限公司，批號(hào)：2 0 0 9 1 2 0 2）；美速靜膠囊（自制，批號(hào)：2 0 1 0 5 0 7、2 0 1 0 5 1 6、2 0 1 0 5 1 9，規(guī)格：3 mg·2 5 0 mg－1）；乙腈為色譜純，水為蒸餾水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 美速靜膠囊的制備

采用熔融法制備。稱取PEG 4 0 0 0適量，加入到2 5 0 mL燒杯中，7 5℃水浴不斷攪拌至PEG 4 0 0 0完全熔融，按處方比例緩慢加入褪黑素（PEG 4 0 0 0-褪黑素（質(zhì)量比）＝2 5∶1），攪拌1 0 min，使其充分混勻。趁熱將含褪黑素的液體倒于干凈的玻璃板上，冷卻后凍干2 4 h，制成褪黑素固體分散體[4]。取褪黑素固體分散體適量，粉碎過(guò)8 0目篩，過(guò)篩后粉末備用。按處方比例（固體分散體粉末-滑石粉-淀粉（質(zhì)量比）＝5.5∶1∶1 0.5），稱取褪黑素固體分散體粉末、滑石粉、淀粉適量，混合均勻，2號(hào)膠囊填充，即得。

2.2 褪黑素含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)。色譜柱：YMC柱（2 5 0 mm×4.6mm，1 0μm）；流動(dòng)相：乙腈-水（V/V＝3 0∶7 0），流速：1.0 mL·min－1；檢測(cè)波長(zhǎng)：2 2 3 nm；柱溫：2 5℃；進(jìn)樣量：2 0 μL。2.2.2 對(duì)照品溶液的制備。精密稱取褪黑素5 mg，置5 0 mL量瓶中，用0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解并稀釋至刻度，混勻，得濃度為0.1 mg·mL－1的對(duì)照品貯備液。精密量取5 mL對(duì)照品貯備液，置5 0mL量瓶中，用0.1mol·L－1乙腈溶液稀釋至刻度，混勻，得濃度為0.0 1 mg·mL－1的對(duì)照品溶液。

2.2.3 供試品溶液的制備。取美速靜膠囊2 0粒，傾出內(nèi)容物，研細(xì)，精密稱取2 5 mg，置2 5 mL量瓶中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解并稀釋至刻度，過(guò)濾，即得。另取缺褪黑素的樣品，同法制得陰性供試品溶液。

2.2.4 專屬性試驗(yàn)。精密吸取對(duì)照品、供試品及陰性供試品溶液各2 0μL，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件注入色譜儀。結(jié)果表明，陰性供試品溶液對(duì)褪黑素測(cè)定無(wú)干擾，色譜見(jiàn)圖1。

Fig 1HPLC chromatogramA.negative control；B.reference substance；C.test sample；1.melatonin

2.2.5 線性關(guān)系考察。精密量取“2.2.2”項(xiàng)下對(duì)照品貯備液1、2、3、4、5、6 mL，置2 5mL量瓶中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液稀釋至刻度，分別取2 0 μL注入色譜儀測(cè)定峰面積。結(jié)果，以檢測(cè)濃度為橫坐標(biāo)（X），峰面積為縱坐標(biāo)（Y）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為：Y＝4 5 4 6.0 7 9 9 2 X－1 7.4 2 8 7（r＝0.9 9 9 8），褪黑素檢測(cè)濃度線性范圍為4～2 4 μg·mL－1。

2.2.6 精密度試驗(yàn)。取對(duì)照品溶液2 0 μL注入色譜儀，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件，分別進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，測(cè)定峰面積，考察日內(nèi)精密度；連續(xù)5 d進(jìn)樣，記錄峰面積，考察日間精密度。結(jié)果，日內(nèi)RSD＝0.9%，日間RSD＝1.0 5%，表明精密度良好。

2.2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)。取同一份供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件，分別于0、1、2、5、7、9 h進(jìn)樣2 0 μL，測(cè)定峰面積，記錄色譜圖。結(jié)果，RSD＝0.7 5%，表明褪黑素在9 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。2.2.8 重復(fù)性試驗(yàn)。取供試品溶液6份，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件，測(cè)定峰面積并計(jì)算褪黑素含量。結(jié)果，褪黑素平均含量為9 9.8 0%，RSD＝0.5 6%。

2.2.9 回收率試驗(yàn)。精密稱取已知含量的美速靜膠囊內(nèi)容物9份（每份約2 5mg），分別加入對(duì)照品貯備液，置2 5mL量瓶中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解并稀釋至刻度，過(guò)濾，制備成高、中、低濃度溶液各3份，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定峰面積，計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2.1 0 樣品含量測(cè)定。取3批美速靜膠囊（批號(hào)：2 0 1 0 5 0 7、2 0 1 0 5 1 6、2 0 1 0 5 1 9）適量，按“2.2.3”項(xiàng)下方法制得供試品溶液，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，并計(jì)算樣品中褪黑素含量。結(jié)果含量分別為9 9.8 0%、9 8.3 1%、9 9.5 9%，A+1.8 0 S（A：均值差的絕對(duì)值，S：標(biāo)準(zhǔn)差）分別為5.6、6.3、6.1，均＜1 5.0。

2.2.1 1 含量均勻度[5]。取美速靜膠囊1 0粒，分別傾出內(nèi)容物，置燒杯中，加0.1 mol·L－1乙腈溶液溶解后轉(zhuǎn)移至5 0 mL量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取2 0 μL，注入色譜儀，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定并計(jì)算。結(jié)果3批樣品含量均勻度均符合規(guī)定。

2.2.1 2 溶出度測(cè)定[5]。取美速靜膠囊6粒，照2 0 1 0年版《中國(guó)藥典》（二部）附錄ⅩC第一法（籃法）測(cè)定溶出度，以9 0 0mL 2%十二烷基硫酸鈉為溶出介質(zhì)，溫度（3 7±0.5）℃，轉(zhuǎn)速1 0 0 r·min－1，于1、3、5、1 0、1 5、2 0、3 0、4 5 min取樣5 mL，同時(shí)補(bǔ)加等溫介質(zhì)5 mL，樣品經(jīng)0.8 μm微孔濾膜過(guò)濾，按“2.2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，計(jì)算累積溶出度，結(jié)果見(jiàn)圖2。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果Tab 1 Results of recovery tests

圖2 美速靜膠囊中褪黑素的溶出曲線Fig 2 Dissolution curves of melatonin in Meisujing capsule

2.3 成型工藝考察

2.3.1 堆密度[6]。堆密度測(cè)定采用量筒法。取美速靜藥粉5 g，精密稱定，置量筒中，手持量筒由5 cm高處落在塑膠板上，反復(fù)5次，測(cè)定容積，共測(cè)定5次，以堆密度＝藥粉質(zhì)量（g）/容積（mL）計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表2。粉末的平均堆密度為0.6 6 g·mL－1，與原工藝相比明顯增加，更符合制劑要求。

表2 膠囊中粉末的堆密度和休止角測(cè)定結(jié)果Tab 2 Results of bulk density and angle of repose of powder in capsules

2.3.2 流動(dòng)性[6]。采用固定漏斗法測(cè)定休止角。取半徑為4 0 mm的平底圓皿，將漏斗固定于三角架上，下端正對(duì)平底圓皿的圓心，高1 5 cm，取美速靜藥粉使之從漏斗上自然流下，至錐形周邊到平底圓皿邊緣為止，測(cè)定錐體高度H，計(jì)算公式tgα＝H/R，結(jié)果見(jiàn)表2。一般認(rèn)為休止角＜3 0℃，表明摩擦力小，流動(dòng)性好。由表2的結(jié)果可知，工藝改進(jìn)后平均休止角為2 3.8°，表明粉末的流動(dòng)性好。

2.3.3 吸濕百分率的測(cè)定[7]。將底部盛有氯化鈉過(guò)飽和溶液的干燥器，放入2 5℃恒溫箱內(nèi)，平衡2 4 h，使干燥器內(nèi)的相對(duì)濕度（RH）達(dá)到7 5%，放入裝有適量美速靜藥粉的稱量瓶（厚度約為1 mm），于0、6、1 2、2 4、3 6、4 8、7 2 h稱定重量，以吸濕百分率＝（吸濕后藥粉重量－吸濕前藥粉重量）/吸濕前藥粉重量×1 0 0%計(jì)算。以吸濕百分率為縱坐標(biāo)，時(shí)間為橫坐標(biāo)作圖，即得吸濕曲線，結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3 膠囊中藥粉的吸濕曲線Fig 3 Curve of moisture absorption in powder of capsules

由圖3可知，在暴露1 2 h后，藥粉吸濕百分率顯著增加，因此要避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中，填充過(guò)程最好控制在1 2 h以內(nèi)。2.3.4 臨界相對(duì)濕度（CRH）的測(cè)定[8～10]。分別取粉末適量，平鋪于稱量瓶中（厚度約為1 mm），恒重后精密稱定，放置于由不同濃度硫酸溶液和飽和鹽液制成的不同濕度的干燥器中，RH分別為1 8.5%、3 3.0%、4 2.7 6%、5 9.2%、6 5.0%、8 5.0%，于2 5℃恒溫箱中放置9 6 h，取出，精密稱定重量，計(jì)算各RH下的吸濕百分率。以吸濕百分率為縱坐標(biāo)，RH為橫坐標(biāo)作圖，得吸濕曲線，結(jié)果見(jiàn)圖4。

圖4 不同相對(duì)濕度下膠囊中藥粉的吸濕曲線Fig 4 Moisture absorption curves under different relative humidity in powder of capsules

由圖4可見(jiàn)，藥粉在RH 6 0%時(shí)吸濕明顯增加，故膠囊中藥粉的CRH為6 0%，在實(shí)際操作中可參考此值對(duì)車間的RH進(jìn)行控制，以免吸濕使產(chǎn)品的含水量過(guò)高而影響質(zhì)量。

3 討論

固體分散體通常有2種制備方法，即熔融法和溶劑法。溶劑法在制備過(guò)程中會(huì)使用大量有機(jī)溶劑，這些有機(jī)溶劑可能會(huì)帶入制劑中，有害人體健康[4]。因此筆者選用熔融法制備固體分散體：先將PEG 4 0 0 0加熱熔融成液態(tài)，再與褪黑素混合，保證了固體分散體中褪黑素含量的均勻性，后再與輔料物理混合，從而使各組分間比例差距縮小，易于混合，含量均勻度試驗(yàn)也證明了美速靜膠囊內(nèi)容物是混勻的。

筆者在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)美速靜膠囊內(nèi)容物長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中會(huì)迅速吸濕，這主要是因?yàn)镻EG 4 0 0 0為親水性材料，易吸濕；此外，淀粉中含水量也較高，因此淀粉在使用前必須先烘烤，以去除水分。膠囊填充過(guò)程要嚴(yán)格控制濕度，控制人員的出入，盡量縮短填充時(shí)間，減少在空氣中的暴露。

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Study on Preparation and Forming Technology of Meisujing Capsule

JIANG Tao，ZHANG En-juan，F(xiàn)AN Li，LU Yong，GE Qin
（Dept.of Pharmacy，The Second Affiliated Hospital of Third Military Medical University，Chongqing 4 0 0 0 3 7，China）

OBJECTIVE：To improve preparation process of Meisujing capsules，to establish its quality control method and to investigate forming technology.METHODS：Meisujing capsule was prepared using the excipient and Melatonin solid dispersion which was prepared by hot melting method using melatonin and PEG 4 0 0 0.The content uniformity was studied，and the content and dissolution rate of melatonin in Meisujing capsule were measured by HPLC.The bulk density，angle of repose and critical relative humidity（CRH）were investigated.RESULTS：The linear range of melatonin was 4～2 4 μg·mL－1（r＝0.9 9 98）with an average recovery of 9 9.6%（RSD＝0.6 4%）.The content uniformity of melatonin in 3batches of Meisujing capsule was lower than 1 5.0.The dissolution rate was nearly 9 0%in 1 0min.Its bulk density was 0.6 6g·mL－1，the angle of repose was 2 3.8°，and CRH was 6 0%.CONCLUSION：Established technology of Meisujing capsule is feasible and controllable in quality.

Meisujing capsule；Melatonin；Solid dispersion；Quality control；HPLC

R9 4 4.5

A

1 0 0 1-0 4 0 8（2 0 1 2）3 3-3 1 1 4-0 3

DOI1 0.6 0 3 9/j.issn.1 0 0 1-0 4 0 8.2 0 1 2.3 3.1 6

＊藥師，碩士。研究方向：醫(yī)用新材料和中藥制劑開(kāi)發(fā)。電話：0 2 3-6 8 7 7 4 7 1 6。E-mail：zhongyaozhijishi@yahoo.com.cn

#通訊作者：副主任藥師。研究方向：中藥制劑研發(fā)。電話：0 2 3-6 8 7 7 4 7 1 6。E-mail：zhongyao2 0 0 7@yahoo.com.cn

2 0 1 1-0 9-0 3

2 0 1 1-1 0-1 5）