徐水琴

(北京航天中心醫(yī)院 中藥房,北京 100049)

中藥工業(yè)

采用自動(dòng)煎藥機(jī)制備橘紅痰咳液的工藝及穩(wěn)定性研究

徐水琴

(北京航天中心醫(yī)院 中藥房,北京 100049)

目的研究自動(dòng)煎藥機(jī)制備橘紅痰咳液的最佳煎藥工藝及穩(wěn)定性。方法選定影響煎藥的3個(gè)主要因素，通過正交試驗(yàn)確定最佳煎藥工藝；采用HPLC法測定不同貯存方法和貯存時(shí)間橘紅痰咳液中苦杏仁苷和柚皮苷的含量及其衛(wèi)生學(xué)檢測指標(biāo)。結(jié)果橘紅痰咳液在所測定的7周內(nèi)，藥液微生物含量符合《中國藥典》2010版中關(guān)于合劑的微生物限度要求；苦杏仁苷和柚皮苷在7周內(nèi)含量比較穩(wěn)定。結(jié)論煎藥機(jī)制備橘紅痰咳液最佳煎煮工藝為浸泡40 min，100 ℃煎40 min；橘紅痰咳液在常溫和冰箱能保存4周。

中藥煎藥機(jī)；橘紅痰咳；苦杏仁苷；柚皮苷；高效液相色譜法；微生物

自從韓國研制了第一臺(tái)自動(dòng)煎藥機(jī)后，中藥煎藥機(jī)在各大醫(yī)院和零售藥店被廣泛使用。煎藥機(jī)與傳統(tǒng)煎藥方法相比具有方便、快捷、衛(wèi)生、耐儲(chǔ)存等優(yōu)點(diǎn)。但是自動(dòng)煎藥機(jī)的煎藥工藝和質(zhì)量考察卻鮮有報(bào)道，對(duì)其保存時(shí)間的研究也未見報(bào)道。為此，我們選擇橘紅痰咳液對(duì)自動(dòng)煎藥機(jī)的制備工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和貯存期進(jìn)行了系統(tǒng)研究，以期對(duì)自動(dòng)煎藥機(jī)的性能進(jìn)行評(píng)價(jià)，為醫(yī)院和藥店的正確使用提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 高效液相色譜系統(tǒng)

LC-3A溶劑輸送泵，SPD-10Avp紫外檢測器，SIL-10ADvp自動(dòng)進(jìn)樣器。BKL-3010色譜工作站。自動(dòng)煎藥機(jī)為韓國產(chǎn)東南DN-15型，包裝機(jī)為東南DN-12型。

1.2 試藥

柚皮苷對(duì)照品(批號(hào)：722-200107)、苦杏仁苷對(duì)照品(批號(hào)：110820-200403)，購自中國食品藥品檢定研究院?；偌t(北京四方中藥飲片有限公司，批號(hào)：11063003，產(chǎn)地：浙江)?？嘈尤?北京鶴延齡中藥飲片有限公司，批號(hào)：101043，產(chǎn)地：河北)。甲醇、乙腈和磷酸為分析純，水為瓶裝純凈水。

2 方法與結(jié)果

2.1 橘紅痰咳液最佳煎藥工藝研究

根據(jù)文獻(xiàn)[1-3]，影響煎藥效果的主要因素有：藥材粉碎度、加水量、浸泡時(shí)間、煎煮時(shí)間、煎煮溫度等，本研究主要考察后3個(gè)因素對(duì)煎藥的影響。根據(jù)L9(34)正交表進(jìn)行正交試驗(yàn)。

表1 正交試驗(yàn)因素水平

2.1.1 苦杏仁苷煎煮工藝正交試驗(yàn) 正交試驗(yàn)結(jié)果見表2，方差分析見表3。

表2 苦杏仁苷煎煮工藝正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 苦杏仁苷煎煮工藝方差分析表

注：n=2

表3正交試驗(yàn)方差分析表表明以上3個(gè)條件對(duì)苦杏仁苷含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。依據(jù)常規(guī)煎藥方法,選定最佳煎煮工藝為浸泡40 min，100 ℃煎40 min。

2.1.2 柚皮苷正交試驗(yàn) 正交試驗(yàn)結(jié)果見表4，方差分析見表5。

表4 柚皮苷煎煮工藝正交試驗(yàn)結(jié)果

表5 柚皮苷煎煮工藝正交方差分析表

注：n=2

正交試驗(yàn)方差分析表驗(yàn)證以上3個(gè)因素對(duì)柚皮苷含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。綜合以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，并按照常規(guī)煎藥方法,最終確定煎煮工藝為：浸泡40 min，100 ℃煎40 min。

2.2 橘紅痰咳液煎劑中苦杏仁苷和柚皮苷含量測定

2.2.1 色譜條件 色譜柱為Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)柱?？嘈尤受諟y定[4]：流動(dòng)相為甲醇-水-磷酸(110∶390∶2.5)，檢測波長為210 nm，進(jìn)樣20 μL，苦杏仁苷出峰時(shí)間比較合適(約為15 min)，分離度為1.7。

柚皮苷測定[5]：流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水-磷酸(75∶75∶350∶2.5)，檢測波長為283 nm，進(jìn)樣5 μL,流速為1.0 mL·min-1，室溫。柚皮苷出峰時(shí)間比較合適，約為19 min,分離度為1.8，在此條件下，苦杏仁苷不出峰。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備

2.2.2.1 苦杏仁苷對(duì)照品溶液制備 精密稱取苦杏仁苷對(duì)照品1.87 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇適量超聲振蕩溶解，定容即得，濃度為0.187 mg·mL-1,色譜圖見圖1。

2.2.2.2 柚皮苷對(duì)照品溶液制備 精密稱取柚皮苷對(duì)照品1.86 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇適量超聲振蕩溶解，定容即得，濃度為0.186 mg·mL-1,色譜圖見圖1。

A.苦杏仁苷 B.柚皮苷?qǐng)D1 苦杏仁苷和柚皮苷對(duì)照品HPLC圖

2.2.3 供試品溶液的制備 精密量取供試品5 mL，上大孔樹脂HPD-100小柱(1 cm內(nèi)徑)，用純凈水80 mL沖洗，繼用95%乙醇50 mL淋洗，洗液水浴蒸干，殘?jiān)蛹状歼m量，溫?zé)崾谷芙?，轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，上清液用0.45 μm微孔濾膜濾過，即得。供試品樣品HPLC圖見圖2、3。

圖2 供試品樣品HPLC圖(苦杏仁苷)

圖3 供試品樣品HPLC圖(柚皮苷)

2.2.4 線性關(guān)系

2.2.4.1 苦杏仁苷標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密吸取苦杏仁苷對(duì)照品溶液不同體積進(jìn)樣，測得峰面積，以峰面積和進(jìn)樣量計(jì)算回歸方程Y=1.178 27×10-6X+1.908 35×10-3，r=0.999 7。結(jié)果表明苦杏仁苷在0.187～4.675 μg線性關(guān)系良好。

2.2.4.2 柚皮苷標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密吸取柚皮苷對(duì)照品溶液不同體積進(jìn)樣，測得峰面積，以峰面積和進(jìn)樣量計(jì)算回歸方程Y=6.589 51×10-7X+0.011 037 6,r=0.999 8。結(jié)果表明柚皮苷在0.186～5.58 μg線性關(guān)系良好。

2.2.5 精密度考察

2.2.5.1 苦杏仁苷 精密吸取同一對(duì)照品溶液進(jìn)樣6次，測定，計(jì)算RSD=1.25%。

2.2.5.2 柚皮苷 精密吸取同一對(duì)照品溶液進(jìn)樣6次，測定，計(jì)算RSD=0.88%。

2.2.6 穩(wěn)定性考察

2.2.6.1 苦杏仁苷 取同一供試品溶液，分別在0，2，4，6，8 h各測定1次,計(jì)算RSD=3.03%,說明供試品在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.6.2 柚皮苷 取同一供試品溶液，分別在0，2，4，6，8 h各測定1次，計(jì)算RSD=2.42%，說明供試品在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.7 重復(fù)性試驗(yàn)

2.2.7.1 苦杏仁苷 取同一批號(hào)的供試品6份，按供試品溶液制備方法處理，制備供試品溶液，每份供試品溶液進(jìn)樣3針，測定峰面積，計(jì)算RSD=2.77%。說明重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果良好。

2.2.7.2 柚皮苷 取同一批號(hào)的供試品6份，按供試品溶液制備方法處理，制備供試品溶液，每份供試品溶液進(jìn)樣3針，測定峰面積，計(jì)算RSD=2.97%。說明重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果良好。

2.2.8 加樣回收率試驗(yàn)

2.2.8.1 苦杏仁苷 取已知含量的藥液，精密加入0.5，1，1.5倍量的苦杏仁苷對(duì)照品，按樣品含量測定方法測定，每個(gè)濃度測3份，計(jì)算回收率及RSD，結(jié)果見表6。

2.2.8.2 柚皮苷 取已知含量的藥液，精密加入0.5，1，1.5倍量的柚皮苷對(duì)照品，按樣品含量測定方法測定，每個(gè)濃度測3份，計(jì)算回收率及RSD，結(jié)果見表6。

表6 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.2.9 不同放置時(shí)間樣品的含量測定及微生物檢測

2.2.9.1 飲片含量測定[6]精密稱取苦杏仁粗粉1.317 3 g，置于具塞錐形瓶中，加100 mL甲醇，稱重，超聲30 min，放至室溫，稱重，補(bǔ)足分量，0.45 μm微孔濾膜濾過，進(jìn)樣10 μL。精密稱取化橘紅粗粒1.456 3 g，加60～90 ℃石油醚80 mL水浴回流2.5 h，揮盡石油醚，加甲醇回流提取3 h，移至100 mL容量瓶中，定容，0.45 μm微孔濾膜濾過，進(jìn)樣5 μL。

2.2.9.2 不同放置時(shí)間的樣品含量測定及微生物檢測 按照最佳煎藥條件，一次煎煮20付藥，一部分常溫保存，一部分冰箱(-4 ℃)保存，一部分40 ℃、RH=75%保存。按照前面所示配制供試品，苦杏仁苷樣品進(jìn)樣10 μL，柚皮苷樣品進(jìn)樣5 μL。結(jié)果見表7。微生物含量測定照《中國藥典》2010版一部附錄ⅠJ合劑微生物限度檢查法檢查，都符合規(guī)定。

表7 不同放置時(shí)間的橘紅痰咳液含量測定結(jié)果 /mg·g-1

注：標(biāo)號(hào)1為常溫保存，2為冰箱冷藏保存，3為加速保存(40 ℃，RH=75%)。

3 討論

《中國藥典》2010年版橘紅痰咳液項(xiàng)下只有柚皮

苷含量測定，沒有苦杏仁苷含量測定。苦杏仁苷含量雖然比較少，也是一個(gè)很重要的成分,并且苦杏仁苷有小毒。本試驗(yàn)建立了兩個(gè)成分的含量測定方法，對(duì)完善橘紅痰咳液的含量測定提供了一定的依據(jù)。

煎藥機(jī)煎得的藥液成分很復(fù)雜，雜質(zhì)很多，需要經(jīng)過預(yù)處理，比較了石油醚、乙酸乙酯萃取，大孔吸附樹脂處理，最后確定最佳條件為大孔樹脂HPD-100，95%乙醇處理效果最佳。

藥液在設(shè)定的幾個(gè)因素下,苦杏仁苷和柚皮苷含量差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,可能是煎煮半小時(shí)以上,這兩個(gè)成分已溶出完全。

藥液放置兩個(gè)月微生物檢測仍然合格，說明藥液的密封性能很好，但藥液本身含有的抑菌成分是否在起作用需進(jìn)一步研究。

[1] 林寧.中藥煎煮機(jī)技術(shù)特點(diǎn)與使用[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2001,10(23):2271-2272.

[2] 宋小勇，應(yīng)裕國，張樹堯，等.煎藥機(jī)的煎煮條件研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2000,11(9):782

[3] 李彬.應(yīng)用新型煎藥機(jī)煎藥時(shí)對(duì)加水量的實(shí)驗(yàn)研究[J].天津醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2004,10(1):68-70.

[4] 袁丹，胡爽，畢開順，等.HPLC測定復(fù)方制劑中苦杏仁苷含量的研究[J].藥物分析雜志,2002,22(5)：361-365.

[5] 陳新，柯康保.HPLC法測定橘紅痰咳液中柚皮苷的含量[J].中藥材,2000，23(8)：489.

[6] 國家藥典委員會(huì).中國藥典[S].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010:69，187，1224.

StudyonOptimizationProcessandStabilityofJuhongtankeDecoctionPreparedbyAutomaticChineseMaterialMedicaBoilingMachine

XU Shui-qin

(AerospaceCenterHospital,Beijing100039,China)

Objective:To study the optimal process and stability of Juhongtanke decoction prepared by automatic CMM(Chinese Material Medica) boiling machine.MethodsOrthogonal experimental method was used to sellect an optimal process from three factors. Amounts of animalcules and contents of amygdalin and naringin of Juhongtanke decoction were used as evaluation on storage way and time.ResultsAmounts of animalcules was accord with specified number in Chinese Pharmacopoeia.Contents of amygdalin and naringin are steady comparatively in 7 weeks.ConclusionThe optimal process of decoct Juhongtanke is soaking in water for 40 minutes, boiling for 40 minutes in 100 ℃; Juhongtanke decoction can be preserved for 7 weeks in friger or room temperature.

Automatic CMM (Chinese material medica) boiling machine;Juhongtanke; Amygdalin;Naringin; HPLC;Animalcule

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徐水琴,E-mail：lindaxu188@163.com

2011-11-19)