劉 濤，徐玉玲，李 娟，詹永成

（1.成都大學(xué)生物產(chǎn)業(yè)學(xué)院，四川 成都 610106；2.成都大學(xué)實驗技術(shù)中心，四川 成都 610106；3.南京海陵中藥制藥工藝技術(shù)研究有限公司，江蘇 南京 210049；4.淮海工學(xué)院，江蘇 連云港 222001）

中藥有七情之說，即“單行、相須、相使、相反、相畏、相殺、相惡”。研究藥物君臣佐使的差異性，說明藥物之間相須、相使、相乘、相惡等或協(xié)同、或制約、或拮抗關(guān)系的客觀存在，以及不同藥味在復(fù)方中地位的主次有重要意義［1］。

按病情需要和藥物性能，選擇兩種以上藥物組合運用，以達到增強藥物的療效，增強治療的作用，這種配伍關(guān)系中醫(yī)謂之相須相使［2］?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)稱之為協(xié)同作用。具有這種協(xié)同作用的中藥組合很多。協(xié)同作用表示兩者相加，可以在控制藥物副作用的同時，增強藥物的療效，或減少藥物用量而不改變藥物療效［3］。藥性、功能相同或相似的藥物一起使用，其原有功效得以顯著加強，稱相須。 “須”與“需”通，“資用”也。說明相須的藥物，關(guān)系非常密切，以至“同類不可離也”［4］。

油菜花粉性涼，味甘；入肝、脾、肺經(jīng)，臨床上主要用于腎氣不固，腰膝酸軟，尿后余瀝。普樂安片 (前列康)主要成分就是油菜花花粉直接打粉壓制成片，是臨床上治療前列腺的首選藥物［5］。野菊花［6］為菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥頭狀花序。本品性辛，微寒，味苦，歸肝、心經(jīng)。具有抗菌消炎、增強吞噬細胞吞噬等作用，對前列腺疾病有較好的療效，如臨床上常用的野菊花栓具有抗菌消炎的功效，用于前列腺炎的治療［7］。

按照中藥配伍理論，相須配伍的藥物性味 (指藥物的即寒、熱、溫、涼性及辛、甘、酸、苦、咸味)應(yīng)一致，如果性味不一致，其配伍后功效是否能達到協(xié)同作用呢?本實驗以油菜花粉 (性涼，味甘；入肝、脾、肺經(jīng))與野菊花 (性辛，微寒，味苦，歸肝、心經(jīng))配伍，考察此兩類藥聯(lián)合應(yīng)用的效果。

1 實驗材料

1.1 試驗動物 雄性SD大鼠100只，體質(zhì)量190～210 g，清潔級，由南京江寧區(qū)青龍山動物繁殖場提供，許可證:SCXK(蘇)2007-0008。

1.2 藥物與試劑

水提物干膏，每1 g相當于原生藥1.88 g(由野菊花與油菜花粉和油菜花粉按照1∶1的配伍比例經(jīng)水提、濃縮干燥而成)。

醇提物干膏 (由野菊花與油菜花粉和油菜花粉按照1∶1的配伍比例經(jīng)醇提、濃縮及乙酸乙酯萃取)，每1 g相當于原生藥13.54 g。

角叉菜膠，25 g/瓶，美國Sigma公司，批號:070912。

前列康 (普樂安片)，浙江康恩貝藥業(yè)有限公司提供，規(guī)格:0.5 g×60片/瓶，批號:080205。

2 試驗方法

參照文獻［8］方法，取大鼠100只，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，隨機選擇89只大鼠10%水合氯醛 (350 mg/kg)腹腔麻醉，剪去腹部毛，碘酒、酒精常規(guī)消毒，無菌條件下切開皮膚創(chuàng)口1.5 cm左右，沿腹正中線剖開下腹壁，用鑷子輕輕提起膀胱及兩側(cè)精囊，暴露附于精囊內(nèi)側(cè)的前列腺背葉，于兩側(cè)分別注入0.1%角叉菜膠0.1 mL，縫合腹壁肌肉皮膚；其余11只大鼠作為正常組，只剖開腹壁，暴露出精囊和前列腺背葉后即回納臟器，縫合肌肉皮膚。所有手術(shù)大鼠放回鼠籠，自由飲食。術(shù)后觀察飼養(yǎng)1周，隨機分為5組，即:①模型對照組 (14只)，每天灌胃純凈水2 mL/100 g。②陽性藥物組，每天普樂安片1 g/kg灌胃 (15只)。③水提物中劑量組 (15只):每天水提物溶液2.97 g/kg灌胃。④水提物高劑量組 (15只):每天水提物溶液5.94 g/kg灌胃。⑤乙醇提取物組 (15只):每天乙醇提取物溶液1.06 g/kg灌胃。灌胃容積1 mL/100 g。末次給藥后24 h處死動物，開腹，觀察前列腺大體形態(tài)。取雙背側(cè)前列腺稱質(zhì)量，計算前列腺指數(shù)。左側(cè)背葉前列腺置于10%甲醛溶液送病理學(xué)檢查。右側(cè)前列腺稱質(zhì)量，每100 mg加生理鹽水1 mL，放入勻漿器中，于冰水浴中制成勻漿，離心取上清液，進行前列腺勻漿液Zn量測定。統(tǒng)計各指標組間差異。

3 統(tǒng)計學(xué)方法

4 結(jié)果

4.1 造模結(jié)果 和正常組比較，模型組前列腺指數(shù) (前列腺質(zhì)量/體質(zhì)量×100)明顯增高，具有顯著性差異 (P＜0.05)說明造模成功。

4.2 試驗結(jié)果 和模型組比較，陽性藥物組前列腺指數(shù)有所降低 (P=0.078)，水提物中劑量組和醇提物組前列腺組織含鋅量明顯升高 (P＜0.05或P＜0.01)，試驗結(jié)果見表1。

表1 試驗藥物對前列腺炎大鼠模型前列腺指數(shù)和組織含鋅量的影響

4.3 病理檢驗

4.3.1 病理檢驗結(jié)果

4.3.1.1 正常組病理檢驗結(jié)果 正常組 (隨機選取10只):前列腺腔大小不一，腺上皮為單層立方或單層柱狀上皮，細胞排列整齊，腺腔內(nèi)有多量伊紅染的分泌物，并見上皮折疊形成的皺壁。本組未查見明顯病變。

4.3.1.2 模型組病理檢驗結(jié)果 模型組 (隨機選取10只):受檢前列腺組織病變范圍不等，半數(shù)受檢組織病變范圍為4級。間質(zhì)血管輕度擴張、充血，水腫，并出現(xiàn)以淋巴細胞、單核細胞為主的炎細胞浸潤，炎細胞浸潤程度多為3級。間質(zhì)纖維組織增生，散在分布、部分區(qū)域呈束狀分布，少數(shù)可見玻璃樣變。

4.3.1.3 陽性藥物組病理檢驗結(jié)果 陽性藥物組 (隨機選取9只):本組半數(shù)前列腺炎癥病變范圍為1級或2級，僅累及部分前列腺組織。半數(shù)病例淋巴細胞、單核細胞散在分布，為1級。半數(shù)間質(zhì)可見散在分布的纖維組織，半數(shù)不明顯。

4.3.1.4 水提物高劑量組病理檢驗結(jié)果 水提物高劑量組(隨機選取10只):本組病變程度較模型組略輕。多數(shù)病例病變范圍為1～3級，炎細胞浸潤多數(shù)為1～2級，間質(zhì)散在纖維組織增生。

4.3.1.5 水提物中劑量組病理檢驗結(jié)果 水提物中劑量組(隨機選取10只):本組病變程度較模型組略輕，與水提物高劑量組相似。多數(shù)病例病變范圍為1～3級，炎細胞浸潤多數(shù)為2級，間質(zhì)散在纖維組織增生，少數(shù)區(qū)域為束狀分布。

4.3.1.6 乙醇提取物組病理檢驗結(jié)果 乙醇提取物組 (隨機選取10只):本組病變程度較模型組及水提物中、高組略輕。多數(shù)病例病變范圍為1～3級，炎細胞浸潤多數(shù)為1～2級，間質(zhì)纖維組織增生不明顯或散在纖維組織增生。見表2，圖1。

4.3.2 病理檢驗結(jié)論

4.3.2.1 本試驗病理模型檢驗結(jié)論 本法復(fù)制的大鼠前列腺炎病變累及范圍廣，病理表現(xiàn)為間質(zhì)血管擴張、充血，水腫，并出現(xiàn)以淋巴細胞、單核細胞為主的炎細胞浸潤。間質(zhì)纖維組織增生。

表2 各組前列腺炎病變比較

4.3.2.2 本實驗各組炎癥病理結(jié)論 各組炎癥輕重程度相比較，以乙醇提取物組病變程度較輕。

5 結(jié)論

5.1 藥效試驗結(jié)果表明油菜花粉和野菊花配伍后對角叉菜膠性前列腺炎大鼠模型具有一定的治療作用，但作用不明顯，與陽性藥物組相比，亦無明顯效果。

5.2 病理檢驗結(jié)果表明以乙醇提取物組病變程度較輕，炎細胞浸潤程度及間質(zhì)纖維組織增生與模型組相比有統(tǒng)計學(xué)差異，但與對照組亦無顯著性差異。

6 討論

6.1 目前有關(guān)前列腺模型主要歸納起來分兩大類:一類為細菌性前列腺炎模型，另一類為非細菌性前列腺炎模型。本實驗采用非細菌性前列腺炎模型，即角叉菜膠致大鼠實驗性模型［9］，兩藥配伍后對大鼠細菌性前列腺炎模型是否有協(xié)同作用有待進一步研究。

圖1 病理照片 (切片厚度約3～4 μm，HE染色，于LEICA DMLB光學(xué)顯微鏡下觀察)

6.2 微量元素Zn是促進性腺發(fā)育和維持性功能不可缺少的元素。它能增加血中睪酮水平，促進前列腺的正常分泌。Zn亦能激活機體的活性酶，增強機體的免疫力和白細胞的趨化功能，對前列腺炎的癥狀和性功能的改善均有利。據(jù)文獻報道慢性前列腺炎綜合征 (CPS)患者前列腺液中Zn離子明顯較正常為低，治愈后前列腺液中含Zn離子量恢復(fù)正常。提示Zn元素的缺乏也是CPS的致病因素之一［10］。但Blacklock等研究發(fā)現(xiàn)慢性細菌性前列腺炎與非細菌性前列腺炎患者前列腺液中含鋅量無顯著差異，前列腺炎患者雖然前列腺含鋅量降低，但其血漿含鋅量正常，說明前列腺液含鋅量降低并非由于體內(nèi)缺鋅造成的，而是由于前列腺的組織細胞攝取和排泌鋅的功能受損造成的［11］。本研究中模型組與空白組中含鋅量無顯著性差異，對此我們作進一步研究討論。

6.3 中藥配伍是中藥臨床應(yīng)用的主要形式，歷代醫(yī)家積累了豐富的經(jīng)驗，受到中醫(yī)藥界的廣泛重視。中藥配伍理論是中藥理論中的重要組成部分，對中藥的臨床配伍應(yīng)用具有重要的指導(dǎo)意義，對于相須理論，李時珍解釋為“同類不可離也”，即同類藥物 (指性味相同)關(guān)系密切的配伍。本研究的結(jié)果表明，不是任何功效性能相同或相似的藥物都能產(chǎn)生滿意的相須效果，這其中存在特異性選擇問題。功效相同 (似)的藥物之間，既有一定的共同性，又有其一定的特殊性［12-14］。油菜花粉和野菊花配伍后，對于前列腺炎大鼠模型并未達到相須配伍的目的，其原因很有可能是這兩味的藥物性味不一致，油菜花粉的性味為性涼，味甘；入肝、脾、肺經(jīng)，野菊花的性味為味苦、辛，微寒。歸肝、心經(jīng)。

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