王 驥，韓 斌，王 健

（隴西中天藥業(yè)有限責(zé)任公司，甘肅 隴西 748000）

黃芪為豆科（Legμminosae）植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.var.mongholicus（Bge.）Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根莖。甘肅栽培品主要為蒙古黃芪，主產(chǎn)于渭源、隴西、岷縣、臨潭、卓尼、宕昌、舟曲、榆中、永登、莊浪。根據(jù)本草考證以臨潭、隴西、宕昌的質(zhì)量最好，產(chǎn)量高［2-3］，因此為甘肅道地藥材?，F(xiàn)代藥理研究：黃芪甲苷具有廣泛的藥理作用，包括抗糖尿病、抗炎癥以及保護(hù)心肌抗心力衰竭作用，可減少心肌細(xì)胞損傷和阻止內(nèi)皮細(xì)胞功能障礙［4］。通過對(duì)甘肅地產(chǎn)蒙古黃芪基源鑒定、性狀鑒別和黃芪甲苷含量對(duì)比研究，為正確評(píng)價(jià)甘肅地產(chǎn)蒙古黃芪質(zhì)量、指導(dǎo)黃芪飲片生產(chǎn)工藝研究、糾正依據(jù)藥材規(guī)格大小來(lái)判斷藥材質(zhì)量好壞的用藥偏見，引導(dǎo)臨床正確有效用藥提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 儀器試藥

儀器：高效液相色譜儀：島津SPD-20A高效液相色譜儀（蒸發(fā)光散射檢測(cè)器 ELSD-LT Ⅱ）；梅特勒-托利多（AB135-S）十萬(wàn)分之一天平。試藥：甘肅地產(chǎn)蒙古黃芪原藥材（均為栽培品），試劑：甲醇、正丁醇、氨水、色譜甲醇、色譜乙腈，高純水。黃芪甲苷對(duì)照品（中國(guó)生物制品檢驗(yàn)所，供含量測(cè)定用，批號(hào)：110781-200613）。

2 方法結(jié)果

2.1 色譜條件

島津色譜柱：C18Inertsil ODS-SP （5μm，4.6mm×250mm s／n 8BI92625）；乙腈-水（32：68）為流動(dòng)相；柱溫：25℃，流速：1.0mL／min，進(jìn)樣量：20μL；理論板數(shù)以黃芪甲苷峰計(jì)算應(yīng)不低于4000。

2.2 溶液制備

精密稱取五氧化二磷干燥12h以上的黃芪甲苷對(duì)照品適量，加甲醇配成0.5mg／mL溶液。參照《中國(guó)藥典》（2010年版）黃芪項(xiàng)下黃芪甲苷測(cè)定方法［3］。

2.3 精密度試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄色譜圖，求得RSD＝0.65%，表明儀器精密度良好，見圖1。

圖1 黃芪甲苷對(duì)照品色譜

2.4 線性關(guān)系考察

精密吸取對(duì)照品溶液（5330μg／mL）6，10，14，16，10、20μL，分別注入高效液相色譜儀測(cè)定峰面積，以黃芪甲苷的量為橫坐標(biāo)，峰面積的積分值為縱坐標(biāo)，作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為Y＝246168X+28109（r＝0.9915），在0.0213～0.1066μg／mL范圍內(nèi)線性良好。

2.5 專屬性試驗(yàn)

按以上方法制得的供試液，黃芪甲苷與樣品中其他成分峰分離度R＞1.5，見圖2。

圖2 黃芪供試品色譜

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液，分別于配制后0，1，3，5，21，23，25h依法測(cè)定，計(jì)算RSD＝1.10%，結(jié)果表明供試品溶液在25h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 樣品含量測(cè)定

取中藥飲片黃芪2010001，2010002，2010003，2010004，2010005等5批，將直徑大于0.3cm和直徑小于0.3cm的蒙古黃芪分別測(cè)定黃芪甲苷含量，按供試品制備方法制備，精密吸取對(duì)照品溶液及供試品溶液，依法測(cè)定，計(jì)算黃芪甲苷含量，結(jié)果分別見表1、表2。

表1 直徑大于0.3cm樣品黃芪甲苷含量

表2 直徑小于0.3cm樣品黃芪甲苷含量

3 討論

本實(shí)驗(yàn)測(cè)定中，黃芪甲苷與其他成分很好地分離，測(cè)定方法符合藥典規(guī)定。通過對(duì)甘肅渭源、岷縣、隴西、臨潭、宕昌共5個(gè)產(chǎn)地的黃芪飲片中黃芪甲苷含量分布的測(cè)定，試驗(yàn)結(jié)果：隴西產(chǎn)直徑小于0.3cm黃芪甲苷含量最高，達(dá)到0.580%。臨潭和宕昌地產(chǎn)黃芪甲苷含量差異不大，岷縣地產(chǎn)黃芪中黃芪甲苷含量最低，達(dá)到0.513%。

中藥材其來(lái)源多為根、莖、葉、花等類型。中藥飲片是由原藥材經(jīng)加工炮制而成，黃芪是典型的根部入藥的中藥，根部由數(shù)條細(xì)圓柱根組成，經(jīng)鑒別多以根條粗長(zhǎng)、皺紋少、粉性足、堅(jiān)實(shí)綿韌、味甘、無(wú)空心及黑心者為佳。但本次試驗(yàn)對(duì)甘肅5個(gè)產(chǎn)地蒙古黃芪含量分布測(cè)定，表1和表2含量結(jié)果對(duì)比分析，根部直徑小于0.3cm比根部直徑大于0.3cm的黃芪甲苷含量分布高。本次試驗(yàn)得出：甘肅地產(chǎn)黃芪，在地理、生態(tài)環(huán)境基本一致情況下，黃芪形態(tài)學(xué)根部直徑大小與黃芪甲苷含量并不成線性正比關(guān)系。但缺乏對(duì)不同地區(qū)黃芪生長(zhǎng)的生態(tài)學(xué)影響因素的考察分析，如光照、溫度、降水；另外黃芪生長(zhǎng)發(fā)育不同時(shí)期的田間管理，采收加工對(duì)黃芪含量是否有顯著影響有待進(jìn)一步研究。

［1］康廷國(guó).中藥鑒定學(xué)［M］.北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2002：127-131.

［2］賀正全.五種黃芪屬植物根中游離氨基酸成分的比較分析［J］.藥學(xué)通報(bào)，1988：23（2）：73-75.

［3］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：283-284.

［4］李香華，王洪新.黃芪甲苷在心血管疾病中的作用［J］.心血管病學(xué)進(jìn)展，2011，32（1）：132-136.

［5］XU XL，CHEN XJ，JI H，et al.Astragaloside IV improved improved intracellular calculμm handling in hypoxia-reoxygenated cardiomyocytes via the sarcoplasmic reticulμm Ca2+-ATPase［J］.Pharmacology，2008，81（4）：325-332.

［6］GU M，ZHANG L，ZHANG Z X.Determination of ferulic acid in Xiaoyao Powder and Radix Angelicae Sinensis by HPLC［J］.Chin Tradit Pat Med，2000，22（5）：342.