張文海，姬中偉，艾斯卡爾·艾拉提，毛 健,*

(1.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇 無錫 214122；2.江南大學(xué) 食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 無錫 214122)

FT-IR結(jié)合SIMCA法識(shí)別糯米產(chǎn)地

張文海1,2，姬中偉1，艾斯卡爾·艾拉提1，毛 健1,*

(1.江南大學(xué)食品學(xué)院，江蘇 無錫 214122；2.江南大學(xué) 食品科學(xué)與技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 無錫 214122)

利用傅里葉變換紅外光譜法結(jié)合軟獨(dú)立模式分類法，在3000～2800cm-1和1760～1700cm-1波長范圍內(nèi)，經(jīng)Savitzky-Golay平滑、基線校正和標(biāo)準(zhǔn)矢量歸一化預(yù)處理，利用留一交互驗(yàn)證法建立主成分分析模型，以識(shí)別率和拒絕率為指標(biāo)對(duì)7個(gè)產(chǎn)地的糯米進(jìn)行識(shí)別。結(jié)果顯示，在α＝0.05顯著水平下，陜西省漢中市糯米的識(shí)別率為80%，湖北省武穴市和浙江省杭州市糯米的拒絕率分別為83%和97%，其余產(chǎn)地糯米的識(shí)別率和拒絕率均為100%，表明傅里葉變換紅外光譜法結(jié)合軟獨(dú)立模式分類法可成為快速識(shí)別糯米產(chǎn)地的有效方法。

糯米；傅里葉變換紅外光譜法；軟獨(dú)立模式分類法；產(chǎn)地識(shí)別

近年來，黃酒行業(yè)發(fā)展迅速，使得對(duì)釀造黃酒用主原料——糯米的需求增加。然而，在黃酒傳統(tǒng)產(chǎn)區(qū)，糯米產(chǎn)量相對(duì)不足，故需從其他產(chǎn)區(qū)購進(jìn)糯米以滿足生產(chǎn)。不同產(chǎn)區(qū)的糯米在化學(xué)組成、物理特性以及微生物種群等方面存在差異，而且對(duì)應(yīng)著不同的釀造工藝，所釀黃酒的品質(zhì)也不盡相同[1-2]，因此有必要對(duì)各產(chǎn)區(qū)的糯米進(jìn)行快速、準(zhǔn)確的識(shí)別，以確定最佳的黃酒釀造工藝。

傅里葉變換紅外光譜法(fourier transform infrared spectroscopy，F(xiàn)T-IR)是一種主要研究物質(zhì)分子中代表性官能團(tuán)振動(dòng)及轉(zhuǎn)動(dòng)光譜能夠在分子水平上表征研究對(duì)象特點(diǎn)并進(jìn)行分析的方法[3-4]。由于FT-IR法具有制樣簡單、檢測快速且重復(fù)性好、對(duì)樣品沒有損壞、信息量大等優(yōu)點(diǎn)，所以倍受研究人員青睞，在蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測[5]，小麥和紅豆的儲(chǔ)存年份鑒別[6]等食品領(lǐng)域已得到了廣泛的應(yīng)用。然而要充分利用FT-IR法的信息，克服傳統(tǒng)光譜分析方法的局限性、復(fù)雜性和主觀性，還需要結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法，對(duì)光譜進(jìn)行全面、深入的分析以獲得更有效的信息。目前，利用光譜法結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)對(duì)中藥材品質(zhì)、農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)地等的研究取得了良好效果[7-10]。本研究利用FT-IR光譜法對(duì)不同產(chǎn)地糯米的模式識(shí)別方法進(jìn)行研究，以期為快速鑒別糯米產(chǎn)地提供一種有效方法。

1 材料與方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)用糯米來自湖北省孝感市、湖北省武穴市、浙江省杭州市、安徽省蕪湖市、安徽省蚌埠市、陜西省漢中市、泰國頂上7個(gè)不同地區(qū)共210個(gè)樣品，樣品按產(chǎn)地編號(hào)為HX、HW、ZH、AW、AB、SH、TD。所有樣品經(jīng)食品粉碎機(jī)粉碎并過200目篩，再按四分法隨機(jī)稱取10g粉末，于60℃烘干，待水分平衡后用于紅外采集。

1.2 儀器與參數(shù)設(shè)置

Nicolet Nexus 470傅里葉變換紅外光譜儀 美國Thermo Electron公司。

主要儀器參數(shù)：最小分辨率：0.5cm-1；光源：EverG10TMMid-Infrared Source；附件：Smart Diffuse Reflection；檢測器：氘代硫酸三苷肽/KBr檢測器。采樣參數(shù)：環(huán)境濕度：40%；掃描范圍：4000～400cm-1；掃描次數(shù)：32次；分辨率：4cm-1。

1.3 漫反射紅外光譜法樣品制備

準(zhǔn)確稱量糯米粉末與KBr粉末(過200目篩)，按照1:9的質(zhì)量比混勻，裝于樣品池，以同樣粉碎度的KBr粉末為背景進(jìn)行紅外光譜采集，共計(jì)210張光譜，隨機(jī)選取175張光譜作為訓(xùn)練集，其余光譜組成預(yù)測集。1.4 分析方法

模式識(shí)別，又稱作模式分類，是對(duì)表征事物或現(xiàn)象各種形式的(數(shù)值的、文字的和邏輯關(guān)系的)信息進(jìn)行處理和分析，以對(duì)事物或現(xiàn)象進(jìn)行描述、辨認(rèn)、分類和解釋的過程，是一種將樣本進(jìn)行聚類的過程，是數(shù)學(xué)、信息科學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的綜合利用[11]。目前所采用的方法主要有因子分析、判別分析(如線性學(xué)習(xí)機(jī))、K最近鄰法、支持向量機(jī)、軟獨(dú)立模式分類法(soft independent modeling of class analogy，SIMCA)、神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)、聚類分析及最小生成樹等[12]，本研究選用SIMCA進(jìn)行分析。

SIMCA是一種有監(jiān)督的模式識(shí)別方法，其識(shí)別思想是對(duì)訓(xùn)練集中每一類已知樣本分別進(jìn)行主成分分析(principal component analysis，PCA)并建立數(shù)學(xué)模型，然后將未知樣品與已建立的模型進(jìn)行擬合，確定未知樣品屬于哪一類或不屬于任何一類。SIMCA包括兩個(gè)主要步驟：建立每一類樣本的PCA回歸模型；利用模型對(duì)未知樣本進(jìn)行擬合，確定其分類[12]。

PCA是SIMCA分析的核心，PCA能夠把多維空間數(shù)據(jù)復(fù)雜的相互關(guān)系向低維空間進(jìn)行投影得到簡化，通過降維將有用的信息整理到幾個(gè)主成分之中并剔除噪音、誤差等無用信息，另外，主成分之間相互正交，能夠克服原變量多重相關(guān)性造成的信息重疊，有助于最大限度地提取有用的信息，建立優(yōu)秀的數(shù)學(xué)模型[11,13]。

在數(shù)據(jù)分析時(shí)，PCA將光譜矩陣Am×p分解成式子(1)中的Tm×f和Pf×p兩個(gè)較小矩陣的外積與殘差矩陣E的和[3]：

式中：Am×p為光譜矩陣；Tm×f為得分矩陣；Pf×p為載荷矩陣；E為“殘差”，維數(shù)與Am×p相同；m為樣品數(shù)目，p為光譜變量數(shù)目，f為主成分?jǐn)?shù)目。PCA分析中得分即是主成分矩陣(新變量)，載荷則是主成分與光譜矩陣的相關(guān)系數(shù)矩陣，二矩陣的外積正好得到與光譜矩陣相同的維數(shù)，再加上殘差矩陣E 就能還原光譜矩陣。PCA 分析時(shí)采用的是非線性迭代偏最小二乘算法(nonlinear iterative partial least squares，NIPALS)。

在PCA分析基礎(chǔ)上建立SIMCA模型后，對(duì)未知樣品進(jìn)行預(yù)測，利用識(shí)別率和拒絕率考察糯米不同產(chǎn)地的預(yù)測效果，其中識(shí)別率即是指被考察未知樣品落在正確類模型區(qū)域內(nèi)的比率，見式(2)，而拒絕率是指被考察類模型對(duì)其他不屬于該類的未知樣品的拒絕程度，即不屬于該類的樣品落在該類模型區(qū)域外的幾率，見式(3)[14]。本研究的所有數(shù)據(jù)分析均基于Unscrambler 9.7的軟件平臺(tái)。

2 結(jié)果與分析

175個(gè)樣品用于訓(xùn)練，建立數(shù)學(xué)模型，35個(gè)樣品用于預(yù)測。不同研究對(duì)象的數(shù)據(jù)具有不同特點(diǎn)，為得到良好的判別模型和預(yù)測效果需要對(duì)原始的光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行一系列必要的處理，如特征波長的選擇、數(shù)據(jù)預(yù)處理等。

2.1 特征波長的選擇分析

通過對(duì)光譜的初步分析，去除低波數(shù)不穩(wěn)定信息峰和水峰后，得到3000～500cm-1的紅外光譜圖，如圖1所示。

圖1 不同產(chǎn)地糯米的紅外光譜Fig.1 FT-IR spectra of glutinous rice from different origins

從圖1可知，研究對(duì)象主要含淀粉、蛋白質(zhì)和脂肪類物質(zhì)，特征吸收集中在3000～2800cm-1和1800～1000cm-1兩段波長范圍，吸光度集中在0.3～0.7之間，在光譜學(xué)的線性分析范圍內(nèi)，說明樣品粉末與KBr稀釋比例適中。對(duì)特征吸收范圍的數(shù)據(jù)進(jìn)行矩陣分析見圖2。

圖2 糯米的吸光度矩陣分布Fig.2 Matrix plot for the absorbance of glutinous rice

吸光度矩陣分布圖顯示了不同產(chǎn)地糯米在特征吸收波段內(nèi)的吸光度分布，表明不同產(chǎn)地的糯米在特征吸收波段內(nèi)存在一定差異，結(jié)合圖1、2，分別選取3000～2800、1760～1700、1670～1150cm-1三個(gè)范圍的數(shù)據(jù)進(jìn)行PCA分析，結(jié)果表明3000～2800cm-1＋1760～1700cm-1的效果較好，因此選用3000～2800cm-1＋1760～1700cm-1區(qū)間的數(shù)據(jù)進(jìn)行建模。

2.2 數(shù)據(jù)的預(yù)處理

利用漫反射紅外光譜法采集到的原始數(shù)據(jù)不僅包括樣品的信息，還包括各種噪音，如儀器高頻噪音、基線漂移和樣品粒度不均勻?qū)е鹿馍⑸涞雀蓴_。為了盡量消除干擾信息的影響，在分析之前都要對(duì)光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，主要方法有平滑、基線校正、標(biāo)準(zhǔn)矢量歸一化(standard normal variate transformation，SNV)、多元散射校正(multiplicative scatter correct，MSC)[15]和求導(dǎo)等手段。

本研究采用窗口移動(dòng)平均法、窗口移動(dòng)多項(xiàng)式最小二乘擬合法(Savitzky-Golay多項(xiàng)式法)、中位數(shù)法和高斯濾波器平滑法分別對(duì)光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行平滑處理，比較發(fā)現(xiàn)Savitzky-Golay多項(xiàng)式法的9點(diǎn)平滑效果最好；利用Baseline offset方法對(duì)光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行基線校正。

表1 不同數(shù)據(jù)處理方法PCA的模型間距Table 1 PCA model distance based on different spectral pre-treatments

經(jīng)平滑和基線校正后的數(shù)據(jù)分別進(jìn)行SNV、MSC、一階求導(dǎo)和二階求導(dǎo)處理，建立模型，以浙江省杭州市的糯米(ZH)為參照，得到如表1的模型間距。

從表1可看出，經(jīng)過不同的處理后ZH與其他6個(gè)產(chǎn)地糯米的模型間距有較大差異，在SIMCA分析中不同類的模型間相對(duì)差值要大于3，兩類模型才具備顯著的差異性，具備良好的預(yù)測能力。表1中四種處理方法效果最好的是SNV法，不僅ZH與其他產(chǎn)地糯米的模型間距大于3，而且任意不同的模型間距都大于3，而其他3中處理方法的模型間距都存在小于3的情況，故本研究最終采用SNV方法處理數(shù)據(jù)。

2.3 主成分?jǐn)?shù)的確定和回歸模型的建立

不同產(chǎn)地糯米的光譜數(shù)據(jù)經(jīng)特征波長選取和預(yù)處理后，利用NIPLAS算法和留一交互驗(yàn)證方法進(jìn)行PCA分析[16]，得到見圖3，主成分?jǐn)?shù)(PCs)與校正集均方根誤差(root mean square error of calibration，RMSEC)和交互驗(yàn)證均方根誤差(root mean square error of cross validation，RMSECV)之間的關(guān)系。

圖3 PCA模型的均方根誤差Fig.3 Root mean square error of PCA model

從圖3可看出，當(dāng)主成分?jǐn)?shù)為3時(shí)均方根誤差已經(jīng)很低，且自PC3以后均方根誤差值降低放緩，直至PC10，表明PC3以后的數(shù)據(jù)信息基本是誤差，因此可得最佳主成分?jǐn)?shù)為3；另外圖中RMSECV與RMSEC差異很小，表明利用留一交互驗(yàn)證方法對(duì)PCA進(jìn)行驗(yàn)證能得到穩(wěn)定的模型。

圖4 全部糯米的PCA模型得分圖Fig.4 PCA model scores of all glutinous rice samples

不同產(chǎn)地糯米PC3的得分圖見圖4，可以明顯看出不同產(chǎn)地糯米在三維空間中分別具有相對(duì)獨(dú)立的分布空間，其中泰國頂上香糯米與其他6種糯米距離最遠(yuǎn)，這與泰國糯米的產(chǎn)地密切相關(guān)，而其他6種產(chǎn)自國內(nèi)的糯米距離較近；國內(nèi)糯米中湖北孝感市、武穴市和安徽蚌埠市、蕪湖市分別處于同一省區(qū)，在得分圖上分布在相同“象限”，而陜西漢中市由于地處西北部，相對(duì)其他5個(gè)省市較遠(yuǎn)，在圖中主要分布于得分圖的頂端，總的來說，不同產(chǎn)地糯米能良好區(qū)分，同時(shí)分布位置與地緣遠(yuǎn)近呈一定正相關(guān)性趨勢。確定主成分后，對(duì)不同產(chǎn)地的7種糯米分別建立PCA模型，得到RMSEC和RMSECV見表2。

表2 PCA模型的RMSEC和RMSECVTable 2 RMSEC and RMSECV of PCA models

表2給出了建立不同產(chǎn)地糯米PCA模型的主成分?jǐn)?shù)、RMSEC以及RMSECV。表4中所有糯米的PC3，均方根誤差值都小于2.0×10-5，可以看作是誤差，不計(jì)入主成分計(jì)算，同時(shí)每個(gè)主成分下的RMSECV比RMSEC的值略大，但差異都很小，充分說明PCA模型是優(yōu)秀的模型，故選擇PC3為不同產(chǎn)地糯米建立SIMCA模型。

2.4 未知樣品的預(yù)測

表3 未知糯米樣品的識(shí)別率和拒絕率Table 3 Recognition rates and rejection rates of unknown glutinous rice samples

利用建立的SIMCA模型預(yù)測未知樣品，利用式2和式3計(jì)算得到α＝0.05時(shí)的預(yù)測結(jié)果見表3。表中顯示除SH糯米的識(shí)別率為80%外，其余6產(chǎn)地糯米的識(shí)別率都達(dá)到100%；除HW和ZH的拒絕率分別為83%和97%外，其余5個(gè)產(chǎn)地糯米的拒絕率均達(dá)到100%。效果良好。

3 結(jié) 論

本研究利用FT-IR對(duì)7種糯米進(jìn)行了產(chǎn)地識(shí)別，借助特征波長的有效選擇、Savitzky-Golay多項(xiàng)式平滑法、基線校正及SNV等方法對(duì)原始光譜進(jìn)行了預(yù)處理，結(jié)合基于PCA分析的SIMCA模式識(shí)別方法對(duì)7種糯米分別建模，能有效識(shí)別所考察的糯米，僅SH一種糯米識(shí)別率為80%，HW、ZH兩種糯米的拒絕率分別為83%和97%，其余的識(shí)別率和拒絕率均達(dá)到100%，充分表明FT-IR結(jié)合SIMCA法識(shí)別糯米產(chǎn)地是可行的。與僅憑人工感官識(shí)別方法或化學(xué)組成分析方法進(jìn)行判斷相比，本文提出的識(shí)別方法具有安全、穩(wěn)定性好、準(zhǔn)確率高、適用范圍廣和易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，為快速識(shí)別糯米產(chǎn)地的方法研究提供了新的思路。

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Identification of Geographical Origin of Glutinous Rice by FT-IR Spectroscopy Combined with SIMCA Method

ZHANG Wen-hai1,2，JI Zhong-wei1，AISIKAER Ai-lati1，MAO Jian1,*

(1. School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China；
2. State Key Laboratory of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China)

Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) combined with soft independent modeling of class analogy (SIMCA) method was applied for tracing the geographical origin of glutinous rice. PCA (principal component analysis) models were built by the method of cross-validation based on such pre-treatments as nine-point Savitzky-Golay smoothing, baseline correction and Standard Normal Variate (SNV) normalization in the region of 3000－2800 cm-1and 1760－1700 cm-1. Identification of glutinous rice from seven origins was performed by identification rate and rejection rate. Under the significance level of α＝0.05, the identification rates of predicted samples were 100% except for the glutinous rice (80%) from Hanzhong, Shaanxi province; the rejection rates were 100% except for glutinous rice from Wuxue, Hubei province (83%) and Hangzhou, Zhejiang province (97%). Thus, the combination of FT-IR and SIMCA is an effective and efficient strategy for identifying the geographic original of glutinous rice.

glutinous rice；FT-IR；SIMCA；geographical origin identification

TS207.3

A

1002-6630(2012)08-0225-04

2011-10-28

張文海(1987—)，男，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称饭こ?。E-mail：zwh860802@126.com

*通信作者：毛健(1970—)，男，教授，博士，研究方向?yàn)槭称飞锛夹g(shù)。E-mali：biomao@263.com