尹愛武，田 潤，王 盼

（1.湖南科技學(xué)院，湖南永州 425100；2.湖南中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，湖南株洲 412012）

菟絲子粗提物抗疲勞作用研究

尹愛武1，田 潤2，王 盼1

（1.湖南科技學(xué)院，湖南永州 425100；2.湖南中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，湖南株洲 412012）

目的：研究菟絲子的抗疲勞作用。方法：將昆明種小白鼠隨機(jī)分為4組，分別為空白對(duì)照組、菟絲子低、中、高劑量組，分別灌胃給予蒸餾水、5、10、15g生藥/kg·bw的菟絲子水提物，連續(xù)給藥30d，測(cè)定小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。采血、分離血清，測(cè)定乳酸脫氫酶（LDH）、血乳酸（BLA）含量，并取小鼠肝臟與后腿部肌肉，測(cè)定肝糖元（LG）、肌糖元（MG）的含量。結(jié)果：菟絲子低、中、高劑量組與空白組比較，能顯著延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，降低血乳酸水平，增加乳酸脫氫酶的活力及增加肝糖元、肌糖元的含量（p＜0.01）。結(jié)論：菟絲子具有顯著的抗疲勞作用。

菟絲子，抗疲勞，乳酸，肝糖元，肌糖元

人體容易產(chǎn)生疲勞是機(jī)體處于亞健康狀態(tài)的表現(xiàn)。由于人們生活方式與節(jié)奏的改變，研究開發(fā)提神抗疲勞產(chǎn)品已成為國內(nèi)外食品營養(yǎng)行業(yè)關(guān)注的熱點(diǎn)。疲勞的發(fā)生和消除與能量物質(zhì)代謝、血清酶學(xué)變化、自由基等多種機(jī)制有關(guān)[1-3]。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)多種植物成分有抗疲勞作用，如雙孢菇水提物[4]、人參蛋白[5]和鹿茸水提物[6]等。菟絲子中含有黃酮、多糖、生物堿及氨基酸等多類生物活性物質(zhì)[7-11]。研究表明，菟絲子具有壯陽[12]、抗生殖損害[13]、增加冠脈流量與減少心肌耗氧量[14]、抗衰老[15]等作用。目前未見關(guān)于菟絲子抗疲勞作用的研究報(bào)道。本文對(duì)菟絲子抗小鼠運(yùn)動(dòng)性疲勞作用進(jìn)行研究與探討，為菟絲子用于抗疲勞產(chǎn)品的開發(fā)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

菟絲子 湖南廉橋藥材大市場；昆明種小白鼠160只，健康，雌雄各半，體重（22±2）g，湖南省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心；乳酸脫氫酶試劑盒、血乳酸試劑盒、肝糖元試劑盒、肌糖元試劑盒 南京建成生物工程研究所。

N-1000S-WA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 日本EYELA；塑料游泳箱（40cm×60cm×40cm）自制，水深30cm。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 菟絲子提取物的制備 稱取一定量菟絲子，用8倍量潔凈自來水浸泡30m in，在100℃下加熱回流提取60m in，過濾，濾渣加7倍量潔凈自來水加熱回流提取60m in，過濾，合并濾液，減壓濃縮，制成濃度為1g生藥/m L藥液。

1.2.2 小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)[16]

1.2.2.1 動(dòng)物分組和給樣 健康昆明種小白鼠，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、菟絲子高、中、低劑量組共4組，每組20只，雌雄各半。各組小鼠每天灌胃1次，連續(xù)灌胃30d，空白對(duì)照組給予蒸餾水，菟絲子高、中、低劑量組給藥量分別為5、10、15g生藥/kg·bw。

1.2.2.2 負(fù)重游泳時(shí)間測(cè)定 灌胃30d后，于末次灌胃30m in后在尾根部負(fù)荷小白鼠體重6%的鉛皮，置于游泳箱中游泳，水深30cm，水溫（30±1）℃，記錄小白鼠自游泳開始至沉入水中8s不能浮起的時(shí)間，為小白鼠的負(fù)重游泳時(shí)間（s）。

1.2.3 生化指標(biāo)的測(cè)定[17]動(dòng)物分組和給樣同“1.2.2.1”項(xiàng)。末次灌胃前小白鼠隔夜禁食不禁水12h，末次灌胃前小白鼠眼眶采血，離心，制備血清備用。灌胃30m in后，將小白鼠置于水溫度為（30±1）℃的游泳箱中不負(fù)重游泳90m in，休息60m in后眼眶采血，離心，制備血清備用。取小白鼠肝臟和后腿部肌肉，用冰生理鹽水洗去血漬，濾紙吸干備用。按照試劑盒說明測(cè)定乳酸脫氫酶（LDH）、血乳酸（BLA）、肝糖元（LG）、肌糖元指標(biāo)（MG）。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)值用X±SD表示，用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)分析，測(cè)定值采用單因素方差分析，并進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 菟絲子對(duì)小白鼠體重的影響

負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)中各組小白鼠隔天測(cè)體重一次，結(jié)果見表1。結(jié)果顯示各組小白鼠體重沒有顯著差異（p＞0.05）。表明體重不會(huì)影響各組間生化指標(biāo)的比較。

表1 菟絲子對(duì)小白鼠體重的影響（X±SD，n=20）Table 1 Effectof Semen Cuscutae on bodyweigh（t±SD，n=20）

表1 菟絲子對(duì)小白鼠體重的影響（X±SD，n=20）Table 1 Effectof Semen Cuscutae on bodyweigh（t±SD，n=20）

2.2 菟絲子對(duì)小白鼠耐力的影響

疲勞最直接的表現(xiàn)就是運(yùn)動(dòng)能力的下降。小白鼠負(fù)重游泳時(shí)間與小白鼠的運(yùn)動(dòng)能力呈正相關(guān)。表2表明菟絲子低、中、高劑量組能極顯著地延長小白鼠負(fù)重游泳時(shí)間（p＜0.01）；菟絲子中、高劑量與低劑量組之間比較，中、高劑量組小白鼠負(fù)重游泳時(shí)間極顯著延長（p＜0.01），結(jié)果說明菟絲子能顯著提高小白鼠運(yùn)動(dòng)耐力，且有劑量反應(yīng)關(guān)系，增大給藥劑量小白鼠運(yùn)動(dòng)耐力增強(qiáng)。

表2 菟絲子對(duì)小白鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響（X±SD，n=20）Table 2 Effectof Semen Cuscutae on loading swimming time of mice（±SD，n=20）

表2 菟絲子對(duì)小白鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響（X±SD，n=20）Table 2 Effectof Semen Cuscutae on loading swimming time of mice（±SD，n=20）

注：*表示與空白組相比較p＜0.01；△表示與低劑量組比較p＜0.01。

2.3 菟絲子對(duì)小白鼠血乳酸的影響

機(jī)體長時(shí)間劇烈運(yùn)動(dòng)后，肌肉組織供氧不足，糖酵解產(chǎn)生的丙酮酸還原為乳酸。乳酸濃度增加使肌肉組織內(nèi)pH下降，導(dǎo)致機(jī)體疲勞。乳酸脫氫酶催化分解乳酸，減少乳酸在肌肉組織的堆積。由表3可知，與空白對(duì)照組比較，菟絲子低、中、高劑量組小白鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸含量極顯著降低（p＜0.01），乳酸脫氫酶活力顯著增強(qiáng)（p＜0.01）。結(jié)果表明菟絲子可以減少機(jī)體運(yùn)動(dòng)后，血乳酸水平，從而達(dá)到抗疲勞的效果。

表3 菟絲子對(duì)小白鼠血乳酸及乳酸脫氫酶的影響（±SD，n=20）Table 3 Effectof Semen Cuscutae on blood BLA and LDH of mice（±SD，n=20）

表3 菟絲子對(duì)小白鼠血乳酸及乳酸脫氫酶的影響（±SD，n=20）Table 3 Effectof Semen Cuscutae on blood BLA and LDH of mice（±SD，n=20）

注：*表示與空白組相比較p＜0.01；表4同。

組別 血乳酸（mmol/L） 乳酸脫氫酶（U/L）游泳前 游泳30min后 游泳30min后空白 5.5±0.7 9.5±0.9 4529.6±583.0低劑量 5.6±0.6 7.2±0.5* 5904.8±604.7*中劑量 5.5±0.9 6.3±0.8* 6036.4±658.2*高劑量 5.8±1.0 6.2±1.1* 6173.4±675.9*

2.4 菟絲子對(duì)小白鼠運(yùn)動(dòng)后肌糖元與肝糖元的影響

肌糖元是機(jī)體運(yùn)動(dòng)最直接的能量來源，隨著肌糖元的不斷消耗，機(jī)體動(dòng)用肝糖原以維持血糖水平穩(wěn)定。因此，機(jī)體運(yùn)動(dòng)后肌糖元和肝糖元的水平能反映其抗疲勞能力。從表4可知，菟絲子低、中、高劑量組肌糖元、肝糖元的水平極顯著高于空白組（p＜0.01）。表明菟絲子有顯著的抗疲勞效果。

表4菟絲子對(duì)小白鼠運(yùn)動(dòng)后肌糖元與肝糖元的影響（X±SD，n=20）Table 4 Effectof Semen Cuscutae onmuscleglycogen and liver glycogen ofmiceafterswimming（±SD，n=20）

表4菟絲子對(duì)小白鼠運(yùn)動(dòng)后肌糖元與肝糖元的影響（X±SD，n=20）Table 4 Effectof Semen Cuscutae onmuscleglycogen and liver glycogen ofmiceafterswimming（±SD，n=20）

組別 肌糖原（mg/g） 肌糖元（mg/g）空白 0.75±0.16 5.2±0.54低劑量 0.96±0.20* 6.95±0.98*中劑量 0.97±0.21* 6.77±1.01*高劑量 0.97±0.18* 6.84±1.20*

3 結(jié)論

本研究用菟絲子水粗提物對(duì)小白鼠灌胃給藥，從能量物質(zhì)代謝、血清酶學(xué)變化探討菟絲子的抗小白鼠疲勞作用。發(fā)現(xiàn)菟絲子水粗提物有顯著的抗小白鼠疲勞作用，給藥組小白鼠負(fù)重游泳時(shí)間顯著延長，血乳酸水平降低，乳酸脫氫酶的活力增強(qiáng)，肝糖元、肌糖元的儲(chǔ)備量增加。后期將對(duì)菟絲子水粗提物進(jìn)行分離，進(jìn)一步研究菟絲子中哪類物質(zhì)產(chǎn)生抗疲勞作用，并進(jìn)一步研究其抗疲勞機(jī)制。

[1]王瑞元.運(yùn)動(dòng)生理學(xué)[M].北京：人民體育出版社，2002：112-123.

[2]付克翠，陳菊平，陳元武.運(yùn)動(dòng)疲勞概述[J].四川體育科學(xué)，2004，6（2）：31-34.

[3]汪建紅，陳曉琴，張蔚佼.黑果枸杞果實(shí)多糖抗疲勞生物功效及其機(jī)制研究[J].食品科技，2009（2）：203-207.

[4]王春麗，張琳，祖元?jiǎng)?，?雙孢菇水提物抗疲勞作用研究[J].食品工業(yè)科技，2011，32（5）：379-380

[5]徐云鳳，趙雨，邢楠楠，等.人參蛋白對(duì)小鼠抗疲勞作用的研究[J].食品工業(yè)科技，2011，32（11）：406-407.

[6]張睿，趙玉紅，王忠政.鹿茸水提物對(duì)小鼠抗疲勞功能的影響[J].食品工業(yè)科技，2011，32（4）：365-367.

[7]葉敏，閻玉凝，喬梁，等.中藥菟絲子的化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志，2002，27（2）：115-116.

[8]金曉.菟絲子化學(xué)成分研究[J].中國中藥雜志，1992，17（5）：292-293.

[9]王展，方積年.菟絲子多糖H3的研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，2001，36（3）：192－195.

[10]Bao X，Wang Z，F(xiàn)ang J，et al.Structural features of an immunostimulating and antioxidant acidic polysaccharide from the seeds of Cuscuta chinensis[J].Planta Med，2002，68（3）：273－239.

[11]林慧彬，林建強(qiáng)，林建群.山東4種菟絲子氨基酸比較研究[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥，2001，12（3）：195.

[12]宓鶴鳴，韓澄，宋洪濤，等.三種菟絲于補(bǔ)腎壯陽作用的比較[J].中草藥，1991，22（12）：547－550.

[13]任獻(xiàn)青，丁櫻，崔瑞琴.菟絲子黃酮干預(yù)雷公藤多苷所致雄性幼鼠睪丸組織損傷的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國中西醫(yī)結(jié)合兒科學(xué)，2010，4（2）：302－305.

[14]郭澄，邵元福，張純.菟絲子生物學(xué)及其應(yīng)用[M].成都：成都科學(xué)技大學(xué)出版社，1996：66－69.

[15]張芳，孫潔，王迪迪，等.菟絲子醇提液對(duì)D－半乳糖致衰大鼠腦組織抗氧化作用研究[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2008，31（2）：43.

[16]張兆強(qiáng)，張春之，林立，等.無花果水提取液抗疲勞作用及其對(duì)一氧化氮合酶活性的影響[J].中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué)，2006，15（9）：783－784.

[17]梁勇，邵宛芳，黃業(yè)偉，等.云南綠茶抗疲勞作用研究[J].食品工業(yè)科技，2011，32（1）：271－273.

Study on anti-fatigue effect of Semen Cuscutae crude extracts

YIN Ai-wu1，TIAN Run2，WANG Pan1
（1.Hunan University of Science and Engineering，Yongzhou 425100，China；2.Hunan Traditional Chinese Medical College，Zhuzhou 412012，China）

Ob jective：To study the anti-fatigue effec tof Semen Cuscutae.Methods：Kunm ing m ice were random ly d ivided into 4 g roups.Blank control group was given d istilled water by intragastric adm inistration.Semen Cuscutae low-dose，m idd le-dose and high-dose g roup were given the extract 5，10，15g·（kg·bw）-1by intragastric adm inistration，respectively.Loaded swimm ing time was tested after successive adm inistration 30d，the b lood was collected and serum was separated，the content of lactate dehyd rogenase and lactic acid were determ ined.Then the content of liver g lycogen，musc le g lycogen were determ ined by m ice liver and the posterior leg musc les.Results：There was significant d ifference between Semen Cuscutae g roup and b lank control g roup（p＜0.01）.The result showed as follows：Semen Cuscutae could significantly p rolong sw imm ing time，reduce lactic acid level，inc rease lac tate dehyd rogenase vitality，increase liver g lycogen and musc le g lycogen content.Conc lusion：Semen Cuscuta had a remarkab le anti-fatigue effect.

Semen Cuscutae；anti-fatigue；lactic acid；liver g lycogen；musc le g lycogen

TS201.2

A

1002-0306（2012）14-0164-03

2011－12－05

尹愛武（1981-），男，博士，主要從事中藥新藥的研究與開發(fā)。

湖南省重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目資助（2011-76）；湖南省高?？萍紕?chuàng)新團(tuán)隊(duì)支持計(jì)劃資助（2012-318）。