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        超高壓液相測定技術在人參皂苷含量測定中的應用

        2012-10-21 01:54:14石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司祁星星霍際偉
        河南科技 2012年8期
        關鍵詞:皂苷人參梯度

        石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司 李 凈 祁星星 呂 潔 霍際偉

        超高壓液相測定技術在人參皂苷含量測定中的應用

        石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司 李 凈 祁星星 呂 潔 霍際偉

        人參為五加科植物,具有很高的藥用價值,但由于藥典收錄的人參皂苷的測定方法運行時間較長。本文,筆者采用超高壓液相的測定方法對人參中皂苷的含量進行分析,以縮短測定時間,提高測定效率。

        一、儀器與試藥

        1.儀器。實驗使用的儀器主要有U3000測定儀,該測定儀包括LPG–3400RS型四元泵、WPS–3000型進樣器、TCC–3x00(RS)型柱溫箱和 VWD–3x00(RS)型檢測器;采用的色譜柱有 DIONEX C18 5 μm 4.6 mm ×100 mm 、Agilent XDB–C18 5 μm 4.6 mm×150mm。

        2.試藥對照品。包括人參皂苷Rgl(中檢所:110703–201027)、人參皂苷Re (中檢所:110754–200822)、 人參皂苷Rbl(中檢所:110704-201122)等,所用試劑均為色譜純。

        二、實驗方法與結(jié)果

        1.色譜條件。

        (1)超高壓液相條件。以乙腈為流動相A,以水為流動相B,流速為0.6 m L/m in,按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫,檢測波長為203 nm。具體參數(shù)見表1。

        表1 流速為0.6 m L/m in時的梯度洗脫要求

        (2)《中國藥典》2010年版(一部)條件。以乙腈為流動相A,以水為流動相B,流速為1.0 m L/min,按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫;檢測波長為203 nm。具體參數(shù)見表2。

        表2 流速為1.0 m L/m in時的梯度洗脫要求

        2.溶液的制備。

        (1)對照品溶液的制備。 精密稱取人參皂苷Rgl對照品、人參皂苷Re對照品及人參皂苷Rbl對照品,加甲醇制成質(zhì)量濃度為0.2 mg/m L的混合溶液,搖勻,即可得到對照品溶液。

        (2)供試品溶液的制備。取本品粉末(過四號篩)約1 g,精密稱定,置于索氏提取器中;加三氯甲烷加熱回流3 h,棄去三氯甲烷液并在藥渣揮干溶劑后,連同濾紙筒移入100 m L錐形瓶中,精密加水飽和正丁醇50 mL,密塞,放置過夜,超聲處理(功率250 W,頻率50 kHz)30 m in,濾過,棄去初濾液,精密量取續(xù)濾液25 m L,置蒸發(fā)皿中蒸干,殘渣加甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至5 m L量瓶中;加甲醇稀釋至規(guī)定刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即可得到供試品溶液。

        3.線性回歸分析。精密吸取上述人參皂苷對照品溶液,分別進樣0.5,1.0,2.0,4.0,8.0 μL,按規(guī)定色譜條件測定峰面積。分別以人參皂苷Rgl、Re 、Rb1對照品進樣量為橫坐標,以色譜峰面積為縱坐標,繪制標準曲線。對所得實驗數(shù)據(jù)進行線性回歸,可得不同人參皂苷的回歸方程:

        不同儀器所測得的人參皂苷的含量 見表3。

        表3 不同儀器所測得的人參皂苷含量

        4.精密度試驗。精密吸取上述人參皂苷對照品溶液,按上述超高壓液相色譜條件,2 μL進樣,重復進樣6次,其RSD分別為人參皂苷Rgl為0.5%、人參皂苷Re為 0.6%、人參皂苷Rbl為0.5%,表明進樣精密度較好。

        5.重復性試驗。在上述色譜條件下, 取同一批樣品5 份,按“2.2.2供試品溶液的制備” 項下的方法測定, 測定結(jié)果表明:人參皂苷Rg1的平均含量為0.332 2%,RSD=0.4%;人參皂苷Re的平均含量為0.1515%,RSD=0.3%;人參皂苷Rb1的平均含量為0.4240%,RSD=0.3%。

        6.穩(wěn)定性試驗。按含量測定項下的超高壓色譜條件,在室溫條件下,對同一樣品溶液每隔0,4,8,12,24 h進樣一針,并記錄色譜圖,按峰面積計算RSD,樣品在24 h內(nèi)基本穩(wěn)定。不同時段、不同人參皂苷含量的測量結(jié)果見表4。

        表4 不同時段、不同人參皂苷含量的測量結(jié)果

        三、結(jié)論

        上述實驗結(jié)果表明,利用超高壓液相測定人參皂苷含量的檢測方法準確、可靠,且大大縮短了檢測時間,提高了工作效率,同時也節(jié)約了試劑,減少了對環(huán)境的污染,使人參皂苷測定方法的經(jīng)濟效益和社會效益得到了顯著提高。

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