王 青 李文杰

1 山東省青島市市立醫(yī)院檢驗科 266011； 2 青島婦女兒童醫(yī)院新篩室

肺炎鏈球菌是社區(qū)獲得性肺炎的主因，并且可能是不明原因社區(qū)獲得性肺炎的重要致病原［1，2］。肺炎球菌性肺炎的病死率高達30%，這取決于菌血癥、年齡和潛在性疾?。?］，常見于5歲以下兒童。由于做血培養(yǎng)時肺炎鏈球菌是苛養(yǎng)菌，營養(yǎng)要求高，所需時間長，陽性率低。但肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）是一種薄膜免疫層析試驗，用于檢測人類尿液中肺炎球菌的可溶性抗原，為肺炎鏈球菌性肺炎提供了一種簡便快速的診斷方法，旨在探討它對血培養(yǎng)陽性的肺炎鏈球菌的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2011年5月－2012年5月我院兒科5歲以下呼吸道感染的276例患兒中，男152例，女124例。

1.2 標本采集與處理 將所有患兒尿液分別收集在標準容器中。收集后，24h內(nèi)測定，室溫保存（15～30℃）。此外，將尿液在2～8℃保存或冷凍保存，可存放14d。硼酸可用作防腐劑。對所有患兒分別靜脈采血2～5ml置于血培養(yǎng)瓶中，然后放入自動血液培養(yǎng)儀內(nèi)，按照儀器要求進行培養(yǎng)鑒定。

1.3 儀器與試劑 尿肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法），試劑由Binax NOW公司（英維利斯醫(yī)療器械北京有限公司），BD血培養(yǎng)瓶，全自動血液培養(yǎng)儀（美國BD公司）。

1.4 實驗原理 肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）是一種薄膜免疫層析試驗，用于檢測人類尿液中肺炎球菌的可溶性抗原。兔抗肺炎鏈球菌抗體被吸附到硝酸纖維素膜上作為樣本線，對照抗體作為另一條線吸附到同一膜上。結(jié)合有可視粒子的兔抗肺炎鏈球菌抗體和抗種抗體干燥結(jié)合到惰性纖維支持物上，形成的結(jié)合物墊和帶條紋的膜結(jié)合到一起組成檢測條。檢測條和放拭子標本的孔位于一個書形鉸鏈狀檢測卡的兩側(cè)。

1.5 檢測方法 將患兒尿液和液體對照品放至室溫（15～30℃），輕輕混勻。測試前從包裝袋中取出檢測卡平放。將1根Binax樣本拭子浸入尿液中，完全浸沒拭子頭。取出時拭子不能滴水，將拭子插入檢測卡底部的孔中。向底部的孔中加A試劑3滴，立即揭去黏附襯封閉檢測卡，15min后在窗口判斷結(jié)果。陽性結(jié)果（取決于標本中存在的抗原濃度）在15min讀數(shù)時，會檢測出樣本線和對照線。陰性結(jié)果，15min讀數(shù)時只出現(xiàn)對照線，表示標本中未檢測到肺炎鏈球菌抗原。如果對照線未出現(xiàn)，不管標本線出現(xiàn)與否，都視為無效結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS13.0軟件進行數(shù)據(jù)處理，率的比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

尿肺炎鏈球菌抗原與血培養(yǎng)的檢測結(jié)果：尿肺炎鏈球菌抗原的陽性率為16.3%（45／276），血培養(yǎng)的陽性率9.4%（26／276），兩者有明顯差異（P＜0.05）。以血培養(yǎng)經(jīng)過分離鑒定實驗作為診斷兒童肺炎鏈球菌性肺炎的臨床標準［3］，測得尿肺炎鏈球菌抗原的敏感性、特異性和準確度分別為88.5%（23／26），91.2%（228／250）和90.9%［（23＋228）／276］。結(jié)果見表1。

表1 尿肺炎鏈球菌抗原與血培養(yǎng)的檢測結(jié)果

3 討論

肺炎鏈球菌性疾?。≒Ds）已成為全球一個重要的公共衛(wèi)生問題。肺炎鏈球菌始終是導致嬰幼兒腦膜炎、菌血癥、肺炎等嚴重疾病的首要病原菌，也是引起鼻竇炎和急性中耳炎的最常見原因［4］。根據(jù)WHO 2005年的估計，全球每年約有160萬人死于PDs，5歲以下兒童有70～100萬人，其中多數(shù)生活在發(fā)展中國家［5］，在亞太地區(qū)，每小時約有49名兒童死于肺炎球菌性肺炎［6］。肺炎鏈球菌為鏈球菌屬細菌，是一種常見的菌血癥的病原體，由于它可產(chǎn)生自溶酶及對營養(yǎng)的要求高，導致它的分離率不高［7］。通過全自動血液培養(yǎng)儀來培養(yǎng)肺炎鏈球菌，雖然能提高檢測的陽性率，但它要經(jīng)過分離、培養(yǎng)、鑒定需要2～3d，很難及時滿足臨床的要求。膠體金法是以尿液為檢測對象，特異性、靈敏度較好［8］。對276例患兒檢測敏感性為88.5%，特異性為91.2%和準確度分別為90.9%，說明此法的真實性良好，穩(wěn)定性較強。肺炎鏈球菌陽性組尿肺炎鏈球菌陽性率88.5%明顯高于陰性組8.8%，而且膠體金法測定尿肺炎鏈球菌抗原所用的檢測樣本為尿液，尿液的收集、儲存和運輸都非常方便，試驗簡便、靈敏、快速，15min出結(jié)果，大大節(jié)省時間，為臨床診斷兒童肺炎球菌性肺炎提供了一定的參考價值，同時爭取了更多寶貴的治療時間。

［1］Plouffe JF，Moore SK，Davis R.Serotypes of Streptococcus pneumoniae blood culture isolates from adults in Franklin County〔J〕.Ohio J Clin Microbiology，1994，32：1606－1607.

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［3］陸權(quán)，余宏杰，王輝.兒童肺炎鏈球菌性疾病防治技術(shù)指南（2009年版）〔J〕.中華兒科雜志，2010，48（2）：104－109.

［4］Yao KH，Yang YH.Streptococcus pneumoniae diseases in Chinese children：past，present and future〔J〕.Vaccine，2008，26：4425.

［5］WHO.Pneumococcal conjugate vaccine for childhood immunization－WHO position paper〔J〕.Weekly Epidemiol Rec，2007，82：93－104.

［6］UNICEF／WHO.Pneumonia：The forgotten killer of children〔J〕.Weekly Epidemiol Rec，2008，83：1－16.

［7］Petti CA，Woods CW，Reller LB.Streptococcus pneumoniae antigen testusing positive blood culture bottles as an altemative method to diagnose pneumococcal bacteremia〔J〕.J Clin Microbiol，2005，43（5）：2510－2512.

［8］張穎華，王傳清，郭奕芳，等.尿肺炎鏈球菌抗原診斷肺炎鏈球菌感染的研究〔J〕.中國預防醫(yī)學雜志，2002，3（1）：49－50.