楊曉燕 ，閆 君

（1.山西醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，山西 太原 030001；2.山西生物應(yīng)用職業(yè)技術(shù)學(xué)院，山西 太原 030001）

黃瑞香有效成分的提取研究

楊曉燕1，2，閆 君2

（1.山西醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，山西 太原 030001；2.山西生物應(yīng)用職業(yè)技術(shù)學(xué)院，山西 太原 030001）

方法:采用 L9(34)正交試驗,以瑞香素含量為評價指標(biāo),用反相高效液相色譜法測定,觀察浸潤水量、浸潤時間、乙醇濃度對瑞香素超聲提取的最佳工藝條件.結(jié)果:瑞香素標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為Y=44.914，X-24（r=0.9992，n=6）.最佳提取工藝為 A3B3C2D1，即 10 倍量浸潤水量，浸潤時間為 10h，每次1.0h.結(jié)論:該工藝合理、簡單、可靠、有效成份提取率高.

瑞香素提??；工藝條件

1 材料與儀器

1.1 材料

甲醇（色譜純）：天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司

乙腈（色譜純）：天津市四友精細(xì)化學(xué)品有限公司

瑞香素對照品：中國藥品生物制品檢定所（0900-200001）

所用水為娃哈哈蒸餾水

祖師麻藥材：山西康意制藥有限公司提供

1.2 儀器

高效液相色譜儀：Agilent Technologies 1200 series

電子天平：上海精科天平

中草藥粉碎機：北京環(huán)亞設(shè)備有限公司MH-1000型調(diào)溫電熱套：

2 方法與結(jié)果

2.1 檢測波長的選擇

取瑞香素對照品約2mg，精密稱定，置于10ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為0.2mg·ml-1的黃瑞香溶液.在200nm-400nm波長范圍內(nèi)掃描，發(fā)現(xiàn)在280nm處有最大吸收，故選擇280nm為檢測波長.

2.2 含量測定

2.2.1 色譜條件

色譜?。篠inoChrom ODS-BP柱（4.6mm×250mm,5μl）；流動相：乙腈：0.2%磷酸水溶液 =10：90；檢測波長：327nm;柱溫：25℃；進(jìn)樣量：20μl.

2.2.2 對照品溶液的制備

取瑞香素對照品約2mg，精密稱定，置于10ml棕色容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為0.2mg·ml-1的對照品溶液.

2.2.3 供試品溶液的制備

取祖師麻藥材40g,經(jīng)中草藥粉碎機粉碎,按超聲提取.提取液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液，即得供試品溶液.

2.2.4 黃瑞香標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

取上述對照品溶液 0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml分別置 10ml容量瓶中，得 10μg·ml-1、20μg·ml-1、30μg·ml-1、40μg·ml-1、50μg·ml-1、60μg·ml-1的溶液，分別吸取20μl進(jìn)液相色譜，得回歸方程為 Y=44.914 X-24（r=0.9992，n=6）.

2.2.5 測定

分別精密吸取黃瑞香對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，即得色譜圖.

圖2 黃瑞香對照品液相色譜圖

圖3 黃瑞香供試品液相色譜圖

2.2.6 多因素提取工藝考察實驗

取粉碎黃瑞香藥材9份，每份45g,置1000ml燒瓶中，按正交實驗要求進(jìn)行.實驗采用L9(34)正交設(shè)計表對浸潤水量（A）、浸潤時間（B）、提取時間（C）、空項（D）四個因素進(jìn)行考查，選定的因素進(jìn)行考查，選定的因素水平見表1.

表1 正交實驗因素水平

從表2、表3可以看出，影響提取工藝因素大小順序為A>B>C>D,即影響最顯著的因素為浸潤時間，其次為浸潤水量，而提取時間影響不顯著.由分析結(jié)果可知，最佳提取工藝為A3B3C2D1.即10倍量浸潤水量，浸潤時間為24h，每次1.0h.

2.3 討論

本研究通過正交試驗設(shè)計,優(yōu)化出最佳的最佳提取工藝為A3B3C2D1，即10倍量浸潤水量，浸潤時間為10h，每次1.0h.

表2 正交實驗結(jié)果

表3 正交實驗結(jié)果

本研究提取過程采用了水浸潤的預(yù)處理方法,通過滲透作用逐漸通過細(xì)胞壁透入到細(xì)胞內(nèi),再經(jīng)過10倍浸潤水量、浸潤時間24h，提取1h，比傳統(tǒng)方法節(jié)省能源,且提取效率高,該方案提取工藝科學(xué)合理、先進(jìn)、耗時短、成本低,為黃瑞香的提取提供了一種新的工業(yè)化方法和實驗依據(jù).

〔1〕丁健樺,郝麗,樂長高,王寧.阿司匹林的合成條件研究[J].東華理工學(xué)院學(xué)報(自然科學(xué)版),2005(01).

〔2〕Canton,G.;Barbieri,C.L.;Iacomini,M.;Gorin,P.A.L.;Travassos,L.R Biochem.J.1993,289,155.

〔3〕Wang,S.-H.Course of Ionganic Chemistry,Science Press,Beijing,2000,P 114(in Chinese）.

R284

A

1673-260X（2012）05-0021-02