王利群，徐 冶，金仁順

(1.吉林醫(yī)藥學(xué)院護(hù)理學(xué)院急救社區(qū)護(hù)理學(xué)教研室，吉林 吉林 132013；2.吉林醫(yī)藥學(xué)院醫(yī)學(xué)科研實(shí)驗(yàn)室,吉林 吉林 132013；3.延邊大學(xué)附屬醫(yī)院病理科，吉林 延邊 133000)

前列腺癌的發(fā)病率在男性泌尿、生殖系統(tǒng)惡性腫瘤中占第三位，嚴(yán)重影響著男性的生活質(zhì)量及壽命，是泌尿外科領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)[1-3]。盡管近年來早期前列腺癌的檢出率有所提高，但臨床上發(fā)現(xiàn)的仍多為中晚期患者，因此早期發(fā)現(xiàn)、早期治療對(duì)有效切除癌腫，延長患者生命具有重要意義。

表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)作為靶點(diǎn)在腫瘤生物治療中扮演著重要角色。迄今發(fā)現(xiàn)，EGFR共有6種配體，如表皮生長因子(eαpidermal growth factor，EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子α(transforming growth factor α，TGF-α)、雙調(diào)蛋白(amphireguin，AR)、B-細(xì)胞素(betacelluin，BTC)、肝素結(jié)合的表皮生長因子(heparin-binding EGF，HBEGF)、表皮素(epiregulin，EPR)等，其中最重要的是EGF和TGF-α[4]。EGFR與其配體的結(jié)合引起一系列相關(guān)基因活化，最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡抑制，促使腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移并導(dǎo)致放療、化療的耐受，在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中扮演著重要角色。據(jù)文獻(xiàn)[8-13]報(bào)道：EGFR在非小細(xì)胞肺癌、頭頸部鱗癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌及大腸癌等惡性腫瘤存在過表達(dá)，并在其發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。而有關(guān)EGFR和TGF-α 在前列腺腺癌(prostatic adenocarcinoma,PAC)及高級(jí)別前列腺上皮內(nèi)瘤(high grade prostatic intraepithelial neoplasia,HGPIN)和癌旁良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)組織中的表達(dá)情況，以及二者相關(guān)性的研究，目前尚未見系統(tǒng)報(bào)道。本研究采用免疫組織化學(xué)染色方法觀察EGF及TGF-α在不同分化程度的PAC組織、HGPIN以及BPH組織中的表達(dá)，探討其在PAC及癌前病變中的生物學(xué)意義，為臨床進(jìn)行PAC診斷以及個(gè)體化靶向治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集臨床病例資料完整的延邊大學(xué)附屬醫(yī)院病理科及日本巖手醫(yī)科大學(xué)病理科經(jīng)病理確診的根治性手術(shù)切除及經(jīng)尿道前列腺切除(TUR-P) PAC標(biāo)本41例，HGPIN 標(biāo)本32例，BPH標(biāo)本41例。患者年齡49～85歲，平均年齡71.6歲。

1.2 方 法所有標(biāo)本均經(jīng)10%甲醛溶液固定24～48 h，按常規(guī)方法取材，手術(shù)切除標(biāo)本選擇腫瘤面積大者，包括癌旁BPH組織，所有組織石蠟包埋，制作蠟塊，進(jìn)行連續(xù)切片，切片厚度為4 μm，分別進(jìn)行HE染色和免疫組織化學(xué)染色，免疫組織化學(xué)染色方法采用SABC法，PBS替代一抗做陰性對(duì)照，染色結(jié)果在光鏡下觀察。

1.3 PAC評(píng)分判斷標(biāo)準(zhǔn)PAC組織按照Gleason評(píng)分方法進(jìn)行病理分級(jí)：Gleason評(píng)分2～6分為高分化腺癌，7分為中分化腺癌，8～10分為低分化腺癌。

1.4 免疫組織化學(xué)結(jié)果判斷EGFR和TGF-α均在細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)著色，出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，黃至棕黃色或顆粒狀為強(qiáng)陽性，淡黃色為弱陽性。染色結(jié)果具體判斷方法如下：顯微鏡下觀察5個(gè)高倍視野，將陽性細(xì)胞按其數(shù)量及著色強(qiáng)度分為3級(jí)，無陽性細(xì)胞或陽性細(xì)胞呈點(diǎn)狀弱陽性為(-)；陽性細(xì)胞散在、灶狀呈強(qiáng)陽性或陽性細(xì)胞彌漫分布呈弱陽性染色為(+)；陽性細(xì)胞分布較廣并強(qiáng)陽性為()。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，EGFR與TGF-α的相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析法。

2 結(jié) 果

2.1 EGFR在PAC、HGPIN和BPH組織中的表達(dá)EGFR在PAC、HGPIN及BPH組織中的陽性表達(dá)率分別為56.6%、53.7%及85.4%，BPH中EGFR的表達(dá)率高于PAC和HGPIN，與兩者比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；但PAC和HGPIN比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。EGFR的表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的分化程度無關(guān)，在高、中和低分化PAC中EGFR陽性表達(dá)率分別為53.9%、55.6%及52.6%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1和圖1(插頁四)。

表1 EGFR在PAC、HGPIN及BPH組織中的表達(dá)

2.2 TGF-α在PAC、HGPIN和BPH組織中的表達(dá)TGF-α在PAC中的陽性表達(dá)率為56.1%，低于癌旁BPH組織，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；但與腫瘤細(xì)胞的分化程度無關(guān)，在高、中和低分化PAC中陽性表達(dá)率分別為53.8%、66.7%和52.6%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。TGF-α在HGPIN病變中的陽性表達(dá)率為56.3%，與PAC比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但與BPH比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2和圖2(插頁四)。

表2 TGF-α 在PAC、HGPIN和BPH組織中的表達(dá)

2.3 EGFR和TGF-α 在PAC、HGPIN、BPH中表達(dá)的相關(guān)性EGFR和TGF-α 在PAC中共同陽性率為81.8%，EGFR陽性率為18.2%，TGF-α陽性率為26.3%，兩者呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.558，P<0.001)，但在HGPIN(r=0.111，P=5.450)和BPH(r=0.024，P=0.883)中兩者無相關(guān)性。見表3。

表3 EGFR和TGF-α在PAC、HGPIN和BPH組織中表達(dá)的相關(guān)性

3 討 論

EGFR及其配體自從1962年被發(fā)現(xiàn)之后引起了廣泛的重視。EGFR又稱HER-1或ErbB1，屬于HER/ErbB家族，包括EGFR、HER2、HER3和HER4，是一種細(xì)胞膜表面的糖蛋白受體，均定位于細(xì)胞膜，其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的異常激活與細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過程相關(guān)。在生理情況下，EGFR與配體結(jié)合促進(jìn)細(xì)胞的增殖分化、遷移，EGFR的異常表達(dá)與惡性腫瘤細(xì)胞的增殖、黏附、血管形成以及腫瘤的轉(zhuǎn)移等關(guān)系密切[5]。EGFR配體包括EGF、TGF、BTC、AR、EPR、HBEGF等，其中以EGF和TGF-α最為重要[4]。

EGFR幾乎在所有的表皮細(xì)胞、基底細(xì)胞以及部分神經(jīng)膠質(zhì)中表達(dá)，而在腫瘤中異常表達(dá)。目前研究較多的是EGFR在黏膜損傷修復(fù)中的作用，研究[6-7]認(rèn)為：EGFR在胃黏膜修復(fù)過程中可抑制胃酸分泌，保護(hù)胃黏膜損傷，并促進(jìn)胃黏膜上皮細(xì)胞的增殖，起到對(duì)胃黏膜組織修復(fù)和保護(hù)作用。近年發(fā)現(xiàn)：TGF-α是EGF家族中另一參與胃黏膜損傷后修復(fù)的主要調(diào)節(jié)肽，其主要參與細(xì)胞增殖和分化，調(diào)節(jié)黏膜上皮的更新和黏膜損傷的修復(fù)，是維持黏膜完整性的重要介質(zhì)，在慢性胃炎、異型增生及胃癌中均表達(dá)[8]。

研究[9-12]證實(shí)：EGFR不僅在黏膜的損傷修復(fù)過程中起重要作用，而且在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程也起重要作用。據(jù)報(bào)道：EGFR在多種腫瘤中過表達(dá)，在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌達(dá)90%～100%、腎癌達(dá)50%～90%、肺癌達(dá)40%～80%、乳腺癌達(dá)14%～90%、結(jié)直腸癌達(dá)25%～77%、卵巢癌達(dá)25%～70%、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤達(dá)40%～63%、胰腺癌達(dá)30%～50%、膀胱癌達(dá)31%～48%、胃癌達(dá)40%～65%。EGFR的過度表達(dá)常預(yù)示患者預(yù)后差、轉(zhuǎn)移快、對(duì)放化療抗拒、激素耐藥、生存較短等[10]特點(diǎn)。

在本研究中，EGFR在PAC中表達(dá)率為56.6%，同時(shí)，TGF-α在PAC中的表達(dá)率與EGFR接近，兩者共同陽性率為81.8%，兩者在PAC組織中表達(dá)顯著相關(guān)，表明兩者在PAC的發(fā)生及發(fā)展過程中共同發(fā)揮作用。另外，TGF-α和EGFR在HGPIN中的表達(dá)也相近，HGPIN與PAC具有形態(tài)學(xué)上相關(guān)性并具有移行關(guān)系，在遺傳學(xué)特征上也有相同之處，認(rèn)為是癌前期病變，EGFR和TGF-α的表達(dá)結(jié)果也支持HGPIN是癌前期病變的觀點(diǎn)，與PAC關(guān)系密切。BPH是常見疾病，在活檢小標(biāo)本時(shí)與腫瘤性病變難以鑒別，在本研究中EGFR和TGF-α在BPH組織中高表達(dá)，并高于HGPIN及PAC，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示EGFR和TGF-α的檢測(cè)在臨床上可用于PAC、癌前期病變和BPH的診斷及鑒別診斷。

本研究從蛋白水平上探討EGFR及TGF-α在良性前列腺組織、癌前病變組織以及PAC組織中的表達(dá)情況，豐富了臨床研究資料，為臨床應(yīng)用上述抗EGFR分子靶向藥物治療PAC提供了理論依據(jù)。

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