王鳳玲,王桂麗

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院老年病科,黑龍江 佳木斯 154003)

肺癌是當(dāng)前危害人類(lèi)生命和健康最嚴(yán)重的惡性腫瘤之一。其中,非小細(xì)胞肺癌 (Nosmall-eenlungcancer N SCLC)占所有肺癌的60%～80%,是肺癌治療的重點(diǎn)。它的發(fā)生是一個(gè)多基因、多因素、多階段的過(guò)程。BCL11A(B細(xì)胞淋巴白血病 /淋巴瘤11A)首先是作為逆轉(zhuǎn)錄病毒結(jié)合的一個(gè)位點(diǎn)于小鼠中發(fā)現(xiàn)的,它在多種腫瘤組織中表達(dá)增加并和腫瘤惡性程度相關(guān)。LKBl/STK11(serine/threonine kinase 11)(絲 /蘇氨酸蛋白激酶11)基因?yàn)閺?peutz-Jeghers綜合征(黑色素斑-胃腸多發(fā)性息肉綜合征,PJS)患者中鑒定的抑癌基因。本課題旨在探索 BCL11A與 LKB1在肺癌發(fā)生及演變過(guò)程中的作用及兩者之間的關(guān)系,為臨床有效評(píng)估肺癌惡性程度及預(yù)后提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

病例選擇:佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院2011-02～2012-05間病理資料完整,其間未經(jīng)放療、化療,行手術(shù)切除并經(jīng)病理確診的非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)60例,同時(shí)加取遠(yuǎn)離癌的非腫瘤性肺組織作為對(duì)照40例。按美國(guó)聯(lián)合癌癥分類(lèi)委員會(huì)(AJCC)和國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)2002年制訂的 TNM分期標(biāo)準(zhǔn)[1]對(duì)全部資料進(jìn)行統(tǒng)一命名和分類(lèi):男39例,女21例。年齡35～70歲 ,平均 52.6歲。其中鱗癌 28例 ,腺癌 32例。有淋 巴結(jié)轉(zhuǎn)移 31例,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 29例。低分化 17例,中分化 22例,高分化 21例。TNM分期標(biāo)準(zhǔn):Ⅰ 期17例,Ⅱ 期 26例,Ⅲ 期 17例。所有標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林固定,石蠟包埋后在輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)上做4μ m切片,每例連續(xù)切片 3張,經(jīng)蘇木素-伊紅染色,由兩名病理科醫(yī)師做出病理診斷。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè) BCL11A及 LKB1在肺癌中的表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)用 SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,組間比較采用i2檢驗(yàn),兩因子比較采用相關(guān)性分析,P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 BCL11A及 LKB1在肺癌組織及癌旁正常肺組織表達(dá)情況

BCL11A在癌組織及癌旁組織的陽(yáng)性表達(dá)率分別為70.00%和35.00%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.01);LKB1在癌組織及癌旁組織的陽(yáng)性表達(dá)率分別為38.33%和70.00%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.01)。BCL11A及 LKB1在肺癌組織中的表達(dá)均與性別、年齡、腫瘤大小、病理分型無(wú)關(guān) (P＞ 0.05),與臨床分期、分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P ＜ 0.05)。見(jiàn)表1。

表1 肺癌組織中 BCL11A、LKB1的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系

2.2 BCL11A和 LKB1蛋白表達(dá)的關(guān)系

BCL11A、LKB1兩者在肺癌組織中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=- 0.43,i2= 5.64,P ＜ 0.05)。見(jiàn)表2。

表2 非小細(xì)胞肺癌中 BCL11A、LKB1表達(dá)的關(guān)系

3 討論

肺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中存在多層次的基因表達(dá)調(diào)控異常。越來(lái)越多的分子表達(dá)調(diào)控異常與腫瘤特定的細(xì)胞周期、生長(zhǎng)分化、細(xì)胞移動(dòng)、凋亡調(diào)節(jié)等生物學(xué)過(guò)程改變相關(guān)。闡明具有驅(qū)動(dòng)作用的特定基因表達(dá)調(diào)控變異機(jī)制及抑癌基因的失活有助于闡明腫瘤特定階段生物學(xué)行為,而非小細(xì)胞肺癌發(fā)生過(guò)程中經(jīng)常伴有抑癌基因雜合性丟失及癌基因的活化,因此基因水平研究有助于針對(duì)變異靶點(diǎn)進(jìn)行臨床干預(yù)。

BCL11A基因定位于人類(lèi)染色體 2pl6.1區(qū),基因全長(zhǎng)約102kb,首次是在 t(2;14)(p16;q32.3)異位的慢性淋巴細(xì)胞白血病中發(fā)現(xiàn)[2]。BCL11A基因在物種間高度保守,編碼一種 Kr ü ppel樣鋅指蛋白,這種蛋白 N末端有一個(gè)恒定的C2HC鋅指,c末端有6個(gè) C2HC鋅指的結(jié)構(gòu)[3]。之前研究發(fā)現(xiàn)BCL11A能與靶基因啟動(dòng)子區(qū)的5’-GGCCGG-3’基序結(jié)合,影響組蛋白 H3/H4的去乙酸化,從而抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄[4]。BCL11A主要表達(dá)于生發(fā)中心 B細(xì)胞和腦組織中,而本研究顯示 BCL11A在非小細(xì)胞肺癌組織中高表達(dá)。這提示BCL11A原癌基因異?；罨赡軈⑴c非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展。同時(shí)有研究報(bào)道 BCL11A的表達(dá)能上調(diào) V EGF(血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子)的表達(dá),后者能促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。

LKB1基因定位于人 19p13.3帶,cDN A全長(zhǎng) 2158bp,編碼區(qū)1302bp,有9個(gè)外顯子。編碼的 LKB1為一種60KD的由433個(gè)氨基酸組成的絲氨酸 /蘇氨酸蛋白激酶,含有一個(gè)激酶區(qū)域(位于 50-337密碼子),其 N端含有一個(gè)核定位信號(hào)區(qū)和胞漿定位區(qū)。LKBI廣泛的表達(dá)于人體多種組織。Rowan[5]等采用原位雜交技術(shù)對(duì)成人、胎兒組織以及腫瘤組織進(jìn)行LKB1mRNA檢測(cè),發(fā)現(xiàn)幾乎所有組織均有表達(dá),而腫瘤組織中的表達(dá)高于相應(yīng)的正常組織或 /和良性病變。最近研究表明 LKBI基因的突變、雜合型缺失及啟動(dòng)子5’-CpG島的甲基化,可導(dǎo)致多種惡性腫瘤的發(fā)生[6]。近年來(lái)的研究表明LKB1的功能異常不僅是 PJS的致病因素 ,同時(shí)它還是一個(gè)重要的抑癌基因。LKB1作為一種抑癌基因?qū)δ[瘤細(xì)胞的增殖分化起負(fù)性調(diào)控作用,通過(guò) LKB1-SP1-VEGF的調(diào)節(jié)通路,抑制腫瘤血管生成及其轉(zhuǎn)移,因此,被認(rèn)為是抑癌基因。眾所周知,腫瘤的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移有賴(lài)于新生血管的形成,然而腫瘤細(xì)胞本身在代謝的過(guò)程中亦分泌血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子并表達(dá)其受體,加速腫瘤新生血管的形成,從而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。BCL11A、LKB1兩者基因的表達(dá)均對(duì) V EGF基因的表達(dá)產(chǎn)生影響,但是機(jī)制不同,兩者失衡可能促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。本研究顯示 BCL11A在肺癌組織及癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為70.00%和35.00%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),提示 BCL11A在肺癌中高表達(dá),表明 BCL11A高表達(dá)與肺癌的發(fā)生有關(guān);LKB1在肺癌組織和癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為38.33%和70.00%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P ＜0.01)。BCL11A及 LKB1在肺癌組織中的表達(dá)均與性別、年齡、腫瘤大小、病理分型無(wú)關(guān) (P＞ 0.05),而與臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān) (P＜0.05)。且二者在肺癌中的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。因此,二者的聯(lián)合檢測(cè)可以作為評(píng)估肺癌惡性程度及預(yù)后的指標(biāo)。

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