姜洪芳，金敬宏，趙伯濤，張衛(wèi)明*

(1.南京師范大學(xué)，江蘇南京，210046;2.南京野生植物綜合利用研究院，江蘇南京，210042)

香水蓮花總提取物對小鼠急性酒精肝損傷的實驗研究

姜洪芳1，2，金敬宏2，趙伯濤2，張衛(wèi)明1，2*

(1.南京師范大學(xué)，江蘇南京，210046;2.南京野生植物綜合利用研究院，江蘇南京，210042)

目的：觀察香水蓮花提取物對酒精所致小鼠急性化學(xué)損傷的保護作用。方法：雄性昆明種小鼠70只，隨機分為正常對照組、急性酒精肝損傷模型組、水飛薊素陽性對照組(46.7 mg/kg)以及香水蓮花低、中、高劑量組(120、180、240 mg/kg)共6組，檢測肝組織甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)和還原型谷胱甘肽(GSH)含量，稱量體重和肝臟重量。結(jié)果：香水蓮花總提取物能夠抑制急性酒精肝損傷小鼠肝組織的TG、MDA含量升高(P＜0.05)，增加GSH含量(P＜0.05)。結(jié)論：香水蓮花總提取物對急性酒精肝損傷有明顯的保護作用。

香水蓮花;酒精性肝損傷;護肝作用

香水蓮花(Nymphaea hybrid)為睡蓮科(Nymphaea)水生宿根草本植物，屬于大型睡蓮類，既是重要的園林觀賞花卉，又是生產(chǎn)切花的新興品種。實驗已經(jīng)證明香水蓮花具有降血脂、抗氧化及抑制酪氨酸酶的活性［1－3］，源于香水蓮花的各種產(chǎn)品也開始不斷開發(fā)，有以子房連同雄蕊一起經(jīng)高溫烘焙制成的香水蓮花茶，也有以其提取物制成的九品蓮花酒，均具有一定的保健作用，但對實驗性酒精肝損傷的保護作用如何?為此，本實驗建立小鼠酒精性肝損傷模型［4］，觀察香水蓮花對實驗性酒精肝損傷的護肝作用。

1 實驗材料

1.1 樣品與材料

香水蓮花干花(以熱風(fēng)干燥法制備)，經(jīng)80%乙醇回流提取兩次，減壓濃縮至干，得率為27%，藥渣加水煮沸提取兩次，減壓濃縮至干，得率為17%，總提取物制備成12 mg/mL、18 mg/mL、24 mg/mL溶液，用于小鼠灌胃。

陽性對照物：水飛薊素膠囊(利加隆，德國馬博士大藥廠)，配成4.67 mg/mL溶液，小鼠灌胃用。

基礎(chǔ)飼料：按衛(wèi)生部衛(wèi)生監(jiān)督司頒布的《保健食品功能學(xué)評價程序和檢驗方法》中的方法配制。

1.2 試劑與儀器

甘油三酯(TG)試劑盒(批號090408)、丙二醛(MSD)試劑盒(批號090513)、谷胱甘肽(GSH)試劑盒(批號090417)由南京建成生物工程研究所提供。

電子天平(SL－1001型，0.1 g，上海民橋電子儀器廠)、分光光度計(722型，上海第三分析儀器廠)。

1.3 試驗動物

昆明雄性SD小鼠，由南京江寧青龍動物繁殖場提供。

2 實驗方法

2.1 實驗動物分組

將健康成年昆明雄性SD小鼠70只，用基礎(chǔ)飼料平衡喂養(yǎng)6d后，篩選出體重為16～22 g的60只進(jìn)行隨機分為6組，每組10只。設(shè)急性酒精肝模型組、空白對照組、陽性對照組、香水蓮花提取物低劑量組、中劑量組、高劑量組。

2.2 給藥方法

從實驗開始到結(jié)束，急性酒精肝模型組、空白對照組：蒸餾水灌胃，香水蓮花提取物低劑量組、中劑量組、高劑量組：分別用濃度為12 mg/mL、18 mg/mL、24 mg/mL總提取物溶液灌胃，陽性對照組：4.67 mg/mL水飛薊素膠囊內(nèi)容物灌胃，灌胃體積均為0.1 mL/10 g.bw，每日一次，每組動物單籠飼養(yǎng)，自由攝取飼料。連續(xù)灌胃30 d，最后一次用藥1 h后造模，樣品組及模型組均按0.12 mL/10g體重灌胃50%酒精，空白組用蒸餾水灌胃，各組動物禁食及水16h后，處死，解剖取肝臟用于檢測。

2.3 檢測方法

稱量一定量的肝臟加入預(yù)冷的細(xì)胞均漿液勻漿后，經(jīng)普通離心機3 000 r/min離心15 min。取上清液，測定勻漿液中TG、MDA和GSH的含量。

2.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計處理方法

采用SAS統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，用Dunnett＇s T檢驗進(jìn)行各試驗組與對照組的比較。數(shù)據(jù)表示方法為均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)，組間差異比較用單因素方差分析，P＜0.05為有差異，P＜0.01為有顯著性差異。

3 結(jié)果及分析

給藥30 d后灌胃酒精各組小鼠肝臟TG、MDA和GSH值及體重測定值，見表1。

表1 給藥后各組動物TG、MDA、GSH值及體重(±s)

表1 給藥后各組動物TG、MDA、GSH值及體重(±s)

(與酒精模型組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01)

指標(biāo)組別TG(mmol/L)MDA(nmol/mgprot)GSH(mg/gprot) 體重(g) 肝重(g)22.75 ±3.83 1.24 ±0.35 27.74 ±6.08 1.40 ±0.36酒精模型組 n=9 0.23 ±0.05 8.67 ±1.30 0.68 ±0.12 24.6±4.70 1.34 ±0.20香水蓮花高劑量組 n=8 0.16±0.04* 7.02 ±2.02* 0.95 ±0.11* 25.33 ±4.32 1.36±0.16香水蓮花中劑量組 n=7 0.19 ±0.02 7.23 ±0.75* 0.88 ±0.16* 31.59 ±2.05 1.50 ±0.26香水蓮花低劑量組 n=8 0.20 ±0.05 7.67 ±0.86* 0.83 ±0.09* 27.42 ±5.85 1.31 ±0.32陽性對照組 n=8 0.13±0.17＊＊ 2.26±1.60＊＊ 1.18±0.53*正常對照組 n=9 0.09±0.04＊＊ 0.76±0.28＊＊ 0.80±0.23＊＊

由表1可見，小鼠喂食30天后，急性酒精肝損傷模型組肝組織中的TG、MDA、GSH與正常對照組有極顯著性差異(P＜0.01)。小鼠喂食香水蓮花提取物高劑量組30天后，與酒精模型組比較肝臟中的TG水平有差異(P＜0.05);香水蓮花3個劑量組之間的MDA沒有差異(P＜0.05)，均與酒精模型組有差異(P＜0.05).香水蓮花提取物高、中、低劑量組與酒精模型組比較均有升高GSH的作用(P＜0.05)，三個劑量沒有明顯差異(P ＜0.05)。

3 討論

本實驗結(jié)果顯示香水蓮花對實驗性急性酒精肝損傷有明顯的保護作用，肝臟TG、MDA及GSH含量的測定表明，香水蓮花總提取物可抑制肝細(xì)胞TG、MDA的升高(P＜0.05)，且能增加GSH的含量(P＜0.05)，提示香水蓮花對急性酒精肝損傷起到良好的保護作用。其作用機制可能是香水蓮花能降低機體內(nèi)氧自由基的產(chǎn)生，增強體內(nèi)抗氧化防御能力，以致提高細(xì)胞膜穩(wěn)定性，保護肝細(xì)胞膜系統(tǒng)，但確切的作用機制還需進(jìn)一步的研究，此實驗為香水蓮花在酒精肝損傷的防治方面提供了一定的實驗依據(jù)。

［1］ 張衛(wèi)明，姜洪芳，徐輝，等.香水蓮花降血脂作用的實驗研究［J］.食品工業(yè)科技，2009(2)：111 －112.

［2］ 任紅榮，張衛(wèi)明，姜洪芳，等.香水蓮花醇提物抗氧化活性的研究［J］.食品科技，2010(3)：200 －203.

［3］ 徐輝.香水蓮花的化學(xué)成分及活性功能研究［D］.南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008：6.

［4］ 裴凌鵬，崔箭.番茄紅素對小鼠急性酒精肝損傷的實驗研究［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2009，36(2)：293 －295.

Study on Protective Effects of Nymphaea hybrid on Acute Alcohol Liver Injury in Mice

Jiang Hongfang1，2，Jin Jinghong2，Zhao Botao2，Zhang Weiming1，2*
(1.Life Science Institute of Nanjing Normal University，Nanjing 210046，China;2.Nanjing Institute for Comprehensive Utilization of Wild Plants，Nanjing 210042，China)

Objective：To study the protective effects of Nymphaea hybrid against the acute alcohol liver injury in mice and offer scientific basis of its health function.Methods：Randomly distribute 70 male Kunming mices to control group，acute alcohol liver injury model group，Silymarin group(46.7 mg/kg)and low，middle，high dose group s of Nymphaea hybrid(120，180，240 mg/kg).Determinaiton and comparing of liver triglycerides(TG)，glutathione(GSH)activities，malondialdehyde(MDA)content between groups.Results：Treatment with different dose Nymphaea hybrid could increase liver GSH activities(P＜ 0.05) ，decrease TG and MDA content in liver tissue(P＜ 0.05).Conclusion：Nymphaea hybrid showed protective effects on the acute alcohol liver injury induce by alcohol in mice.

Nymphaea hybrid;alcohol liver injury;liver－protection effects

R285.5

A

1006－9690(2012)05－0018－02

10.3969/j.issn.1006－9690.2012.05.0004

2012－03－18

國家“十一五”支撐計劃課題(2006BAD06B02);國家科技基礎(chǔ)條件平臺工作項目(2004DEA71010)

姜洪芳，副研究員，從事植物有效物質(zhì)開發(fā)利用研究。E－mail：jhf74@163.com

*通訊作者：張衛(wèi)明，研究員，博導(dǎo)，主要研究植物活性成分開發(fā)與應(yīng)用。E－mail：botanyzhang@163.com