常 波，姜一婧，孫長(zhǎng)仁

(吉林省白山市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林 白山 134300)

抗骨增生丸由熟地黃、肉蓯蓉(蒸)、狗脊(鹽制)、女貞子(鹽制)、淫羊霍等9味藥材組方，具有補(bǔ)腰腎、強(qiáng)筋骨、活血、利氣、止痛等功效，用于增生性脊椎炎(肥大性胸椎炎、肥大性腰椎炎)、頸椎綜合征、骨刺。部頒標(biāo)準(zhǔn)中沒(méi)有含量測(cè)定方法[1]。為更有效控制該制劑的質(zhì)量，筆者采用高效液相色譜(HPLC)法[2]測(cè)定抗骨增生丸中淫羊藿苷的含量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

島津LC－2010AHT型高效液相色譜儀。淫羊藿苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)為 110737－200312，供含量測(cè)定用);抗骨增生丸(白山市健寧藥業(yè)有限公司);乙腈(色譜純);水(純化水)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱:Diamansil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相:乙腈－水(29∶71);流速:0.8 mL/min，柱溫:35 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng):270 nm;進(jìn)樣量:對(duì)照品溶液5 μL，供試品溶液 10 μL。在此條件下，理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計(jì)應(yīng)不低于1 500，淫羊藿苷與雜質(zhì)峰的分離度大于1.5，峰形良好，陰性對(duì)照品溶液無(wú)干擾(圖1)。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

精密稱取淫羊藿苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含30 μg的溶液，即得對(duì)照品溶液。取抗骨增生丸10丸，研細(xì)，取2 g，精密稱定，精密加入甲醇50 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理30 min，冷卻，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。按處方比例及工藝自制不含淫羊藿陰性樣品，按供試品溶液制備方法制得陰性對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:精密吸取淫羊藿苷對(duì)照品溶液(30.90 μg/mL)2，4，6，8，10 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為 Y=－1 120.9+2 764 551.78 X，r=1.000 0(n=5)。結(jié)果表明，淫羊藿苷進(jìn)樣量在0.061 8 ～0.309 μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn):取同一對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，依法測(cè)定。結(jié)果峰面積的 RSD為0.82%(n=6)，表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取對(duì)照品溶液，放置 1，5，10，15，20 h 后測(cè)定峰面積。結(jié)果的 RSD為0.23%(n=5)，表明供試品溶液在20 h內(nèi)穩(wěn)定。

重復(fù)性試驗(yàn):取同一批(批號(hào)為080101)樣品，依法制備供試品溶液并測(cè)定。結(jié)果的 RSD為0.79%(n=5)，表明方法重現(xiàn)性良好。

加樣回收試驗(yàn):精密稱取已知含量的樣品6份，分別精密加入對(duì)照品溶液適量，依法測(cè)定含量并計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.4 樣品含量測(cè)定

依法測(cè)定5批樣品的淫羊藿苷含量。結(jié)果批號(hào)為050101，050102，050103，050104，050105的樣品中淫羊藿苷含量分別為0.33，0.32，0.32，0.32，0.31 mg/g。

表1 淫羊藿苷加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

3 討論

曾比較了甲醇超聲提取與先用乙醚回流去除脂溶性雜質(zhì)，再用甲醇回流提取含量測(cè)定差異。結(jié)果以甲醇超聲提取樣品簡(jiǎn)便、穩(wěn)定。高效液相色譜法測(cè)定本品精密度、重現(xiàn)性好，可以有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量。

[1]WS3－B－0084－89，衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)·中藥成方制劑(第一冊(cè))[S].

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:229.