蔣俊春

(河南省商丘市食品藥品檢驗(yàn)所，河南 商丘 476000)

蒲金散結(jié)膠囊是由蒲公英、夏枯草、金銀花、浙貝母4味藥材加工制成的復(fù)方制劑，具有清熱解毒、消腫散結(jié)之功效，用于乳房腫痛、乳腺增生癥，臨床療效顯著?，F(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中未收載含量測定項(xiàng)目，制劑質(zhì)量不能得到有效的控制。為進(jìn)一步控制其質(zhì)量，保證臨床用藥療效穩(wěn)定、安全可靠，采用高效液相色譜法對處方中的活性成分綠原酸進(jìn)行定量測定[1－3]，方法簡便準(zhǔn)確、結(jié)果可靠，為提高和完善本制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了試驗(yàn)依據(jù)。

1 儀器與試藥

Agilent 1200型高效液相色譜儀(美國安捷倫公司);賽多利斯電子分析天平(德國賽多利斯有限公司);YQ－020超聲波清洗器(上海易凈超聲波清洗機(jī)有限公司)。綠原酸對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為0753－200111);乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純;蒲金散結(jié)膠囊(永城市人民醫(yī)院，自制)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:Diamonsil C18色譜柱(150mm ×4.6mm，5μm);流動相:乙腈 －0.4% 磷酸(14 ∶86);流速:1.0 mL/min;檢測波長:327 nm;進(jìn)樣量:10μL。

2.2 溶液制備

取綠原酸對照品約20 mg，精密稱定，置50 mL量瓶中，加50%甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5mL，置50mL量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。取本品約1.6 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50%甲醇50mL，稱定質(zhì)量，超聲處理30min，放冷，再稱定質(zhì)量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5mL，置25mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取缺金銀花的其他味藥按處方工藝制成陰性制劑，按上述方法制備陰性對照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性考察:取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照品溶液各10μL，按擬訂的色譜條件，分別進(jìn)樣測定，記錄色譜圖。結(jié)果表明，其他成分對綠原酸測定無干擾，見圖1。

線性關(guān)系考察:分別精密量取綠原酸對照品溶液1，2，3，5，6，7，9mL，置50mL量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻。按擬訂的色譜條件，分別進(jìn)樣10μL，記錄綠原酸峰面積值，以峰面積積分值(Y)對對照品質(zhì)量濃度(X)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=2 669.36X －31.28，r=0.999 6(n=7)。結(jié)果表明，綠原酸質(zhì)量濃度在8.056～72.50μg/mL范圍內(nèi)與峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn):取同一對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，每次10μL，記錄峰面積。結(jié)果的 RSD=0.73%(n=5)，表明方法精密度良好。

圖1 高效液相色譜圖

重復(fù)性試驗(yàn):取同一批樣品制備的供試品溶液，分別進(jìn)樣測定，記錄峰面積。結(jié)果的 RSD=0.94%(n=5)，表明方法的重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn):取同一供試品溶液 10 μL，分別在 0，2，4，6，8，10 h時進(jìn)樣測定。結(jié)果的 RSD=1.01%(n=6)，表明供試品溶液中綠原酸在10 h內(nèi)可保持穩(wěn)定。

加樣回收率試驗(yàn):取同一樣品(含量為4.962 5 mg/g)約0.8 g，共 6份;另精密稱取綠原酸對照品 40.05 mg，置 100 mL容量瓶中，加50%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取8，10，12 mL各兩份，分別置上述6份樣品中，分別照供試品溶液制備方法制備待測溶液，按擬訂的色譜條件進(jìn)樣測定。結(jié)果見表1。

2.4 樣品含量測定

取3批樣品，按2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液，各進(jìn)樣10μL，按外標(biāo)法計算綠原酸的含量。結(jié)果3批樣品中綠原酸的含量分別為 4.962 5，4.910 3，5.012 4mg/g。

表1 綠原酸加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

3 討論

本制劑中復(fù)方成分在測定時會互相干擾。筆者采用有機(jī)溶劑將有效成分提取分離后再進(jìn)行測定，參考中國藥典，將流動相各溶劑比例進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，結(jié)果分離度良好。本試驗(yàn)所建立的方法，將蒲金散結(jié)膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)由定性上升至定量，操作簡便，具有較強(qiáng)的專屬性，重復(fù)性好，可更有效控制該制劑的質(zhì)量。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:205－206.

[2]陳惠紅，李 玲.高效液相色譜法測定銀翹感康膠囊中綠原酸含量[J].中國藥業(yè)，2009，18(17):10 －11.

[3]張華蕓，呂國光，任吉蘭，等.高效液相色譜法測定康鼻膠囊中綠原酸含量 [J].中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2006，26(9):1 183－1 184.